Регенерация почки: Ученые МГУ выяснили, как старение влияет на способность почек к регенерации

Содержание

Ученые МГУ выяснили, как старение влияет на способность почек к регенерации

Группа исследователей из МГУ имени М.В. Ломоносова под руководством профессоров Дмитрия Зорова и Егора Плотникова изучила влияние старения на такие ключевые клеточные процессы, как аутофагия, функционирование митохондрий и окислительный стресс. Ученые также предложили перспективные методы лечения почечной недостаточности. Исследования поддержаны грантом Российского научного фонда (РНФ). Результаты опубликованы в журнале CellCycle.

Аутофагия — это процесс, при котором клетки разрушают и перерабатывают свои поврежденные компоненты. Так клетка самоочищается от ненужных органелл, а иногда и «самопоедается» целиком. С помощью этого адаптивного механизма на клеточном уровне поддерживается здоровый фенотип. Аутофагия активируется при определенных видах острой почечной недостаточности (например, вызванной приемом антибиотиков или противораковых препаратов), а также при сепсисе и ишемии почки. Ученым уже известно, что именно активация аутофагии снижает выраженность почечных повреждений. Однако при старении эффективность аутофагии падает, и, хотя количество лизосом (органелл, переваривающих поврежденные клеточные компоненты) в старых клетках даже возрастает, они не справляются со своей функцией. В таких клетках происходит накопление окисленных белков и поврежденных органелл, в том числе митохондрий, которые в норме принимают участие в процессах дыхания и продуцируют энергию.

В международной базе научных публикаций по медицине PubMed исследованиям старения почки было посвящено более 3000 статей. Однако меньше 10 из них затрагивали исследования эффективности терапии острой почечной недостаточности у пожилых. Ученые из НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского МГУ рассмотрели почечные патологии, сопровождающие старение организма, — прежде всего, это острая почечная недостаточность, которая встречается у людей старше 60 лет в несколько раз чаще.

«В нашей статье мы показали, что старение ассоциируется с накоплением поврежденных биологических структур в почке (белков, липидов, нуклеиновых кислот, органелл). Замена «молодого» (здорового) фенотипа на «старый» происходит в тот момент, когда достигается некое пороговое значение таких изменений»,— рассказал ведущий научный сотрудник Научно-исследовательского института физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского, доктор биологических наук Егор Плотников.

Одна из эффективных стратегий борьбы с изменениями, связанными со старением, – это ограничение питания (сaloricrestrictionили dietrestriction— разгрузочно-диетическая терапия). Оно активирует процессы аутофагии и уменьшает возрастные патологические изменения в почке. Хотя наибольшую эффективность в экспериментах показали подходы, в которых ограничение питания применяется на протяжении всей жизни, ученые экспериментально доказали, что кратковременное снижение потребления пищи (на 30-40% в течение нескольких недель) может повышать устойчивость почки к развитию острой почечной недостаточности. Кроме системного физиологического подхода к лечению иногда применяют фармакологические препараты, имитирующие ограничение калорийности (например, рапамицин), однако его эффективность для лечения старой почки пока не доказана.

Другим подходом к защите почки является митохондриально-адресованная терапия. Поскольку при острой почечной недостаточности даже в клетках молодых организмов митохондрии сильно повреждаются, а старение само по себе приводит к нарушению митохондриальных функций, то идея воздействия на митохондрии для предотвращения повреждения почек старых организмов выглядит очень привлекательной. Среди соединений, доказавших свою эффективность на экспериментальных моделях, в первую очередь выделяются митохондриально-направленные антиоксиданты, такие как митоTEMPO, пептиды SS-31 (Bendavia) и разработанные в МГУ имени М.В. Ломоносова соединения группы SkQ.

«К сожалению, сейчас доминируют исследования, в которых различные терапевтические подходы по защите почки опробуются на молодых животных. Гораздо меньше существует работ, изучающих изменения в почках старых животных. Более того, работы, посвященные целенаправленной защите почки в стареющем организме, практически отсутствуют.

Мы предлагаем восполнить этот пробел не только за счет экспериментов на старых животных, но и за счет анализа данных клинических исследований»,— прокомментировал ученый.

В настоящее время эффективность препаратов в клиническом исследовании зачастую усредняется между различными возрастными группами. Более персонализированный подход позволил бы выявить ключевые отличия физиологии почки у пожилых пациентов и создать препараты, воздействующие именно на те сигнальные пути, которые будут эффективны в этой группе больных.

Дорожная клиническая больница

В нашем отделении урологии внедрены и успешно применяются многие современные методы лечения мочекаменной болезни. Инновационные методы лечения позволяют без выполнения хирургических разрезов провести дробление и удаление практически любых камней в почках, мочеточниках или мочевом пузыре. Это существенно сокращает сроки лечение, увеличивает его безопасность и легче переносится пациентом.

В клинике применяется целый спектр современных видов литотрипсии (дробление камней):

   Лазерная литотрипсия – метод эндоскопического дробления камней в мочеточниках и почках с использованием энергии лазерного луча. На сегодняшний день большинством ведущих специалистов лазерная литотрипсия признана наиболее эффективной для разрушения мочевых камней. Доступ к камню (в мочеточник или полостную систему почки) осуществляется путем уретероскопии (проведение эндоскопа в мочевые пути через уретру) или путем нефроскопии (эндоскопический доступ в почку через прокол в поясничной области).

    Ультразвуковая литотрипсия – метод эндоскопического дробления камней почек ультразвуком с одновременным удалением фрагментов камня (Чрескожная нефролитотрипсия, нефролитолапаксия). Данный способ наиболее эффективен для удаления крупных (размерами 2 см и более) коралловидных камней почек. Доступ к камню, расположенному в полостной системе почки осуществляется эндоскопическим способом через прокол в поясничной области (нефроскопия). Так же, данным методом удаляются камни мочевого пузыря, часто встречающиеся при аденоме предстательной железы.

    Контактная пневматическая литотрипсия — метод эндоскопического дробления камней в мочеточниках и почках с использованием высокоэффективного литотриптора, использующего энергию сжатого воздуха. Позволяет разрушать камни любой плотности в мочеточниках, почках и мочевом пузыре.

   Трансуретральная эндоскопическая цистолитотрипсия – метод дробления и удаления камней мочевого пузыря без хирургических разрезов. Дробление камней в мочевом пузыре осуществляется лазером или ультразвуком. Образование камней в мочевом пузыре частое осложнение аденомы предстательной железы (доброкачественной гиперплазии предстательной железы) – распространенного заболевания среди мужчин старшей возрастной группы. Аденома предстательной железы является основной причиной нарушений мочеиспускания у мужчин старше 50 лет.

    Дистанционная ударноволновая литотрипсия – безоперационный метод дробления камней в почках при помощи энергии сфокусированной ударной волны. Для разрушения камня не требуется выполнения разрезов или введения в организм эндоскопов, так же не требуется наркоз. Данный метод позволяет эффективно разрушать камни размерами до 1,5 – 2,0 см. Генерация ударной волны достигается путем электрогидравлического эффекта. Сфокусированная ударная волна прицельно, под контролем рентгена, направляется через поясничную область на камень.

    Для лечения пациентов страдающих мочекаменной болезни в урологическом отделении Клинической больницы «РЖД-Мкдицина» г. Хабаровск применяются современное медицинское оборудование.

   Многофункциональный хирургический гольмиевый лазер Auriga XL (Boston Scientific, США) — позволяет проводить разрушение (дробление) камней в мочевых путях, а также необходим для выполнения эндоскопических урологических операций. Так же лазер позволяет выполнять удаление аденомы предстательной железы (операция HoLEP – гольмиевая лазерная энуклеация предстательной железы). На сегодняшний день это мощнейший в Хабаровске и Хабаровском крае хирургический лазер, не имеющий аналогов).

   Литотриптор Lithoclast Master (EMS, Швейцария) – позволяет выполнять ультразвуковую и пневматическую литотрипсию. Большинством специалистов признается наиболее эффективной в мире моделью среди аналогов. Позволяет разрушать камни почек, мочеточников и мочевого пузыря.

   Литотриптор Medispec 3000 (Израиль) – предназначен для дистанционной литотрипсии. Имеет небольшую фокусную зону в сочетании с высоким давлением в ней, превосходя по данному параметру большинство аналогов, в том числе и более современные модели. Благодаря этому, комплекс позволяет эффективно разрушать почечные камни с незначительным повреждающим эффектом для почки и окружающих тканей. Камни размерами до 1,5 см в 80 % случаев разрушаются во время одного сеанса.

   Для эндоскопического доступа в мочевые пути применяются

современные эндоскопические системы – цистоскопы, нефроскопы, уретерореноскопы производства компаний Olympus, Karl Storz и EKA.

   Для диагностики мочекаменной болезни в клинике широко применяется мультиспиральная компьютерная томография (МСКТ) – высокоэффективный диагностический метод XXI века. МСКТ позволяет получить всю необходимую информацию для правильного планирования лечения. Метод позволяет узнать точное расположение камня, определить его размеры, объём и вычислить плотность. Одновременно возможно исследовать особенности строения мочевых путей и сосудов почки.

   Врачами урологами нашей клиники накоплен значительный клинический опыт лечения пациентов с мочекаменной болезнью. В клинике выполнено более 2000 уретероскопий и контактных литотрипсий при камнях мочеточника, а также свыше 5000 дистанционных литотрипсий.

   В настоящее время отделение является региональным лидером в Хабаровском крае в области выполнения чрескожных нефролитотрипсий при крупных и коралловидных камнях почек. Внедрение современных технологий лечения мочекаменной болезни позволило, практически полностью, отказаться от традиционных открытых операций. Врачи регулярно посещают конференции и образовательные мероприятия. В 2016 году заведующим отделением, к.м.н. Василием Владимировичем Гордеевым принято участие в повышении квалификации по программе “Percutaneous Nephrolithotomy: From Start to Exit” организованной Endourological Society при содействии Научного клинического центра ОАО “РЖД”.

   В мае 2017 году на базе урологического отделения нашей клиники, совместно с главным урологом Центральной дирекции здравоохранения ОАО “РЖД” (сети РЖД-Медицина) д.м.н., профессором Федором Анатольевичем Севрюковым, был организован семинар “Современная эндоурология”, а в мае 2018 года состоялся семинар “Новые технологии в урологии”. Проведение образовательных семинаров способствует обмену передовым опытом среди врачей урологов, работающих в сети “РЖД — Медицина” и медицинских учреждениях города Хабаровска.

   Сотрудничество урологов в сети «РЖД-Медицина» позволяет шагать в ногу с развитием современных медицинских технологий. Активно внедряются операции на предстательной железе с помощью лазера. В ходе семинара продемонстрированы возможности мощной многофункциональной хирургической лазерной установки AURIGA XL (Boston Scientific), поступившей на оснащение урологического отделения Дорожной клинической больницы на ст. Хабаровск-1. На данный момент, это единственная подобная установка на Дальнем Востоке. Этот хирургический лазер способен не только разрушать камни в мочевых путях (в почках, мочеточниках, мочевом пузыре), но и разрезать ткани, останавливать кровотечение, что позволяет использовать его для эндоскопической хирургии аденомы предстательной железы.

Запишитесь на консультацию по телефону 8(4212)41-82-82

Животное, способное заново отрастить голову

  • Трейси Логан
  • BBC Future

Автор фото, Corbis

Подпись к фото,

Гидрактиния: как она это делает?

Может ли обитатель морских глубин, обладающий необычайными регенеративными способностями, поделиться своим умением с людьми? На этот вопрос решил найти ответ корреспондент BBC Future.

В лаборатории Голуэйского университета (Ирландия) стоит аквариум, в котором — удивительные существа: на синих ножках, словно леденцы на палочках, примостились ряды ракушек, покрытых странными «живыми волосами», слегка покачивающимися в морской воде. Эта колония крошечных морских полипов, которых называют гидрактиниями, была собрана на панцирях раков-отшельников у ирландских прибрежных скал. Необычные создания — родственники медуз, кораллов и морских анемон.

Каждое из них размером не больше детской реснички и при ближайшем рассмотрении напоминает деревце на ножке, со стволиком и головой, покрытой щупальцами, с помощью которых оно ловит проплывающие мимо лакомые останки животных и растений.

А еще эти животные наделены сверхъестественной способностью: когда какая-нибудь зубастая рыба откусывает волосатой гидрактинии голову (а это происходит нередко), та отрастает заново и через неделю уже щеголяет новыми щупальцами.

Автор фото, REMEDI

Подпись к фото,

Гидрактиния всего за несколько дней может заново отрастить себе голову (Фото — Институт регенеративной медицины, Голуэй, Ирландия)

Этот-то их талант и привлек внимание Ури Фрэнка и его коллег по Институту регенеративной медицины (REMEDI), расположенному в ирландском Голуэе. Фрэнк утверждает, что способность к регенерации тканей, которая встречается у организмов, подобных гидрактинии, возможно, издревле была присуща большинству животных, в том числе человеку, просто сейчас она не проявляется. Ученых, которые разделяют это убеждение, становится все больше. Так как же гидрактиния восстанавливает утраченные части тела? И не здесь ли кроется ключ к возможности регенерации тканей у человека?

Восстанавливать части тела могут многие животные — от морской звезды до саламандры. Но примитивные полипы выделяются на их фоне своими поистине необычайными способностями.

Перегруппировка стволовых клеток

Регенеративный талант гидрактинии основан на том, что она сохраняет свои эмбриональные стволовые клетки в течение всей жизни. Это означает, что в процессе заживления не просто образуется корочка и шрам, но и вырастает новая часть тела, как у зародыша, — даже голова.

В этом году на конференции специалистов по биологии развития Фрэнк продемонстрировал видеоролик, где заснят процесс восстановления головы у гидрактинии: эмбриональные стволовые клетки, генетически модифицированные таким образом, чтобы светиться зеленым, движутся к шее безголового полипа. Аудитория пришла в восторг. Как написал в «Твиттере» один из ученых: «Ури Фрэнк показал на видео, как стволовые клетки гидрактинии физически перемещаются в сторону головы (поврежденного места). Класс!»

Автор фото, Thinkstock

Подпись к фото,

Саламандра может заново отрастить хвост, но не другие части тела

После записи видеоролика ученые в Голуэе стали пытаться понять, каким образом гидрактиния восстанавливает свое покалеченное тело. Полученные результаты они надеются уже в ближайшее время опубликовать в каком-нибудь научном журнале. Подробности пока не разглашаются, но известно, что статья голуэйских биологов будет посвящена тому, как гидрактиния перегруппировывает свои стволовые клетки, чтобы заново отрастить голову, — к примеру, как до стволовых клеток доходит информация об утрате органа, и откуда берутся эмбриональные стволовые клетки.

Изучение гидрактинии натолкнуло Фрэнка и его коллег на еще более глубокую мысль: почему восстанавливать свое тело могут лишь некоторые животные, тогда как большинству это недоступно? Саламандра может заново отрастить хвост, но ее близкие родственники — лягушки — не в состоянии воссоздать утраченные конечности. И если крошечный морской полип способен восстановить откушенную голову, почему люди не умеют заново выращивать себе хотя бы коренные зубы? Как говорит Фрэнк, в конце концов, стволовые клетки у человека и гидрактинии не такие уж разные.

Древний предок

Процессы, происходящие в стволовых клетках, сформировались в древности, и у многих видов животных они схожи. К примеру, сложная сигнальная система Wnt, которая отвечает за контроль над стволовыми клетками у развивающихся эмбрионов и при отсутствии такого контроля провоцирует рост раковых клеток, практически одинакова у всех животных, в том числе у гидрактинии и у человека. Это одна из немногих сложных систем стволовых клеток, состоящих из сотен элементов, которые остались неизменными с тех пор, как 600 миллионов лет назад гидрактиния отпочковалась от эволюционного дерева, в итоге давшего миру человека.

В последнее десятилетие ученые стали приходить к выводу о том, что сначала стволовые клетки развились у еще более древнего, нежели гидрактиния, существа, чье мягкое тело давным-давно растворилось на дне древних морей. Фрэнк полагает, что, возможно, способность к регенерации сначала выработалась у этого доселе неизвестного существа, и все животные, появившиеся после него, уже обладали всем необходимым для восстановления утраченных частей тела, однако в современном мире эта их способность, в основном, никак не проявляется.

Автор фото, Tracey Logan

Подпись к фото,

Удивительные способности этого существа могут указать путь к возможности регенерации тканей у человека (фото — Трейси Логан)

«Может быть, это не такая уж безумная идея. Системы стволовых клеток весьма сложны, 600 миллионов лет может не хватить для того, чтобы разработать этот комплекс с нуля. Поэтому с большей долей вероятности можно предположить, что система стволовых клеток гидрактинии и человека унаследована от какого-то общего предка, — считает Фрэнк. — Кстати, вот гидрактиния может заново отрастить голову, а мы хоть и неспособны сделать это во взрослом состоянии, в утробе матери именно этим и занимаемся — формируем свою голову. Возможно, человек с возрастом просто утрачивает эту способность, а гидрактиния – нет».

Эта теория укладывается в результаты исследования, опубликованные в прошлом году в британском научном журнале Nature, о двух разновидностях древнего плоского червя — планарии. Этот червь уже более века привлекает исследователей своими удивительными регенеративными способностями. Планарию можно разрезать на мелкие кусочки, и некоторые черви восстановят свое тело даже из мельчайшей частицы хвоста. Остальным требуется сохранить большую часть своего тела, чтобы суметь заново вырастить себе голову. Во всяком случае, так считалось до сих пор.

Автор фото, Thinkstock

Подпись к фото,

Плоские черви давно являются объектом исследований благодаря своим регенеративным способностям

Научные сотрудники Института Макса Планка (Германия) рассматривали гипотезу о том, что все планарии обладали одинаково сверхъестественными способностями к регенерации тканей, однако на начальном этапе эволюции у некоторых этот талант пропал. Ученые оказались правы. Довольно простая операция с системой стволовых клеток развивающегося зародыша позволила сделать из особи, неспособной вырастить голову из маленькой частицы хвоста, особь, наделенную таким талантом.

Ури Фрэнк надеется, что его исследовательская работа поможет объяснить невероятные результаты опытов с планариями и разгадать другие загадки. Почему, например, планарии легко могут отрастить хвост, а гидрактинии тяжело восстановить свою ножку? Один из вариантов объяснения состоит в том, что миграция клеток может регулироваться за счет симметрии тела (передняя и задняя или левая и правая стороны), которой обладают планарии и люди, но не гидрактинии.

Теоретически люди могут иметь скрытые регенеративные способности, не менее удивительные, чем у гидрактиний и плоских червей, как бы эти существа ни были далеки от человека. На базовом клеточном уровне между ними наблюдаются поразительные сходства. Возможно, исследуя их, мы тоже научимся восстанавливать утраченные или поврежденные части тела. «Спроса на выращивание новой головы у человека сейчас нет, — говорит Фрэнк, — но разве не здорово было бы уметь восстанавливать спинной мозг, больное сердце или почки, искалеченные руки и другие органы, которые мы можем потерять?».

Автор фото, REMEDI

Подпись к фото,

А может, все не так уж невероятно, как нам кажется? И мы когда-нибудь сможем отращивать себе новые руки и ноги?

Исследования планарии показали, что это, может быть, не так уж невероятно, как было принято считать. Американский биолог Томас Хант Морган, которого называют отцом науки о регенерации тканей, еще в 1901 году проводил эксперименты с плоскими червями, демонстрируя их удивительную способность восстанавливать все тело из обрубка. Однако позже он забросил свои исследования, написав: «Нам никогда не понять явлений развития и регенерации».

Конечно, многие тайны процесса регенерации еще только предстоит раскрыть, но, по-видимому, крошечное существо, живущее в аквариуме голуэйской лаборатории, и ему подобные могут помочь нам разгадать, как устроен процесс восстановления частей тела, раньше чем мы думали.

Доктор наук Петр Тимашев: Клеточные технологии

Как можно «вырастить» барабанную перепонку, уретру или, скажем, новую почку? «Запчасти» для человека — уже не фантастика? Термин «регенеративная медицина» появился в конце девяностых. Но так стремительно внедрился в службу здоровья, что теперь даже самые далекие от медицины люди о нем наслышаны. О восстановительных супертехнологиях и о том, что с ними связано, обозреватель «РГ» беседует с директором Института регенеративной медицины Первого Московского государственного медицинского университета имени Сеченова доктором химических наук Петром Тимашевым.

Петр Сергеевич, все-таки поясните: что такое регенерация?

Петр Тимашев: Перевод слова известен — восстановление. Восстановление тканей, а иногда и целых органов. Это свойственно всему живому. Раны на коже затягиваются. И это простейший пример регенерации. Не будь регенерации, можно было бы погибнуть от простой царапины. Если бы кожа утратила способность к восстановлению и заживлению, а вела бы только к разрушению.

Наша разработка барабанной перепонки успешно прошла эксперимент. Но разрешения на проведение клинических испытаний до сих пор нет

Но не все органы и ткани имеют эту удивительную способность. Скажем, трансплантологам не обязательно пересаживать целую печень, можно брать небольшой фрагмент, который умудряется превратиться в целую печень. Но если требуется пересадка легкого… Никакой фрагмент легкого не разрастется до полного органа. И вот тут вы вступаете со своими предложениями о регенерации?

Петр Тимашев: Да, вступаем, а точнее пытаемся вступить, потому что пока наши возможности очень ограниченны. Но те, кто занимается регенеративной медициной, оптимисты. Мы свято верим, что через одно-два десятилетия регенеративная медицина найдет практическое применение.

Блажен, кто верует! А конкретные примеры?

Петр Тимашев: Примеры есть. Причем не из области экспериментов, а из области реальной помощи реальным пациентам. Об уретре в печати не очень принято говорить, но давайте сделаем исключение. К нам обратился пациент, у которого вышла из строя уретра. И если бы не наши возможности, ему бы грозили калечащая операция и незавидное качество жизни. А у нас уже были свои наработки.

В наших лабораториях мы создали специальную губку из белка (коллагена), выделенного из кожи крупного рогатого скота. Губка мягкая, и надо было ее укрепить. Мы это сделали с помощью синтетического полимера. После этого взяли клетки эпителия из щеки самого пациента. Размножили и поместили их на укрепленную губку. Затем эта конструкция была трансплантирована в поврежденную уретру. Конструкция не отторгалась, поскольку в ней присутствуют клетки данного пациента. В течение полугода функция уретры полностью восстановлена.

Не всегда же можно использовать свои клетки! Это, конечно, несколько из другой области, но знаю многих онкологических пациентов, которых удается спасти благодаря донорским стволовым клеткам. Мы не раз писали о девочке, страдающей лимфобластным лейкозом, которую удалось спасти с помощью стволовых клеток, взятых у брата. Замечу, первая их пересадка не совсем удалась: организм девочки отторг стволовые клетки. А вторая попытка ее спасла. С тех пор прошло много лет. Девочка стала взрослой, живет нормально. Клетки брата стали своими.

Петр Тимашев: Но замечу: не всегда клетки родного человека помогают. К сожалению, это так. Всех тайн иммунитета, пожалуй, никто в мире пока не знает.

Если я вас правильно поняла, без своих клеток ни о какой регенеративной медицине речи быть не может. По большому счету речь идет о популярной ныне клеточной терапии? Пересадка стволовых клеток, пересадка клеток кожи мало кого удивляет. Но всегда в таких ситуациях очень остро стоит вопрос донора. Не каждый, даже тот, кто считает себя совершенно здоровым, может им стать. Есть возрастные ограничения, когда донором быть нежелательно. И конечно, донор должен быть здоров: никаких ВИЧ, сифилиса и различных инфекций быть не должно. Но организм реципиента (то есть человека, который получает эти клетки) устроен так, что иммунная система, разглядев чужаков, их отторгнет. Это ведь закон природы. Как вы его обходите?

Петр Тимашев: В регенеративной медицине мы используем разные клетки, в том числе и донорские. Как мы с вами ходим в одежде, благодаря которой можно вполне достоверно сказать, кто мы и чем занимаемся, так и каждая клетка имеет свой «наряд». По нему и идет распознавание, в первую очередь клетками иммунной системы. Если вводимые клетки будут одеты как свои или, наоборот, раздеты (то есть «обезличены»), то тогда и вероятность, что их примут за чужаков, гораздо меньше, и они смогут выполнить свою миссию. Но иногда наша задача не в том, чтобы эти клетки сами служили строительным материалом в процессе регенерации, а в том, чтобы они снабдили дополнительно место поражения веществами, которые заставят собственные клетки организма работать лучше.

Вам это удается?

Петр Тимашев: Не всегда. Но чем больше работаем в этой области, тем чаще видим положительные результаты — регенерация происходит.

В Сети прошла информация о том, что вы создали барабанную перепонку. Где она применяется?

Петр Тимашев: Нигде. Говорю это с болью, потому что нашей разработке скоро исполнится год. Этот подход успешно применен в эксперименте на шиншиллах, живущих в нашем виварии. Вся документация, положенная в таких случаях, имеется. Но разрешение на проведение клинических испытаний мы до сих пор не получили.

А что представляет собой предложенный метод?

Петр Тимашев: Дело в том, что в век всяческих мобильных устройств люди часто, даже в молодости, утрачивают слух. Прежде всего страдает барабанная перепонка. Любой отоларинголог вам скажет, что численность слабослышащих растет. Восстановление слуха становится глобальной проблемой. Никакие медикаменты восстановить барабанную перепонку не могут. Мы не случайно создали специальную группу для разработки регенеративной терапии уха. В группе врачи, химики, физики, биологи.

Мы благодарны, что у нас были добровольцы-помощники, согласившиеся дать свой костный мозг для создания «ушного устройства». Клетки костного мозга берут из бедренной кости. Эта манипуляция абсолютно безопасна для донора. Полученные клетки костного мозга помещают в биобанк, где они могут храниться сколь угодно долго. Когда необходимо, мы берем эти клетки и помещаем в губку, о которой говорилось выше. После этого полученный конструкт помещаем в ухо животному, и оно через месяц начинает слышать.

Никогда не задумывалась о том, что шиншилла, шуба из которого стоит безумных денег, служит не только украшением для дам, но еще и науке. И, кстати, вы используете белок, выделенный из кожи коров. Коров тоже держите в виварии?

Петр Тимашев: Не ехидничайте! Вы наверняка знаете, что держать коров в центре Москвы нельзя. Мы сотрудничаем с подмосковными хозяйствами, и, кстати, нам никто никогда не отказал. Белок, выделенный из кожи коров, для нас не дефицит. Да, у нашего университета есть свой виварий, в котором мы держим мышей, крыс, шиншилл, кроликов.

Но этот реципиент не человек, а шиншилла! А когда такое изделие получит человек?

Петр Тимашев: Пока ответа нет. Знаю, что в некоторых странах уже делают нечто похожее, людям возвращают слух. Мы пока ждем официальное разрешение.

Вы действительно оптимисты. У вас эти разработанные конструкции печатаются? Вот вы сегодня пришли на мою кухню, чтобы работать и к чаю принесли пряник «Ярославский рецепт». К нему дана аннотация «Пряник печатный с начинкой вишня». Понимаю, пряник напечатать проще, чем барабанную перепонку. Но пусть на меня не обижаются любители сладкого, барабанная перепонка важнее пряника.

Петр Тимашев: Конечно. Мы используем методы биопечати для создания наших конструктов. Похвастаюсь, у нас есть биопринтер. Именно свой! Его разработали наши сотрудники вместе с физиками из Института фотонных технологий ФНИЦ Кристаллография и фотоника РАН. Все это стало возможным только благодаря поддержке наших междисциплинарных работ со стороны государственной программы 5-100.

Институт, который вы возглавляете в России, единственный и неповторимый. Вы только что вернулись из Нижнего Новгорода, где выступали с докладом «Ландшафт регенеративной медицины в России». Вы говорили о том, что в нашей стране клеточные технологии развиваются не только в Москве. И это очень важно.

Петр Тимашев: Клеточные технологии — технологии будущего. Они обязательно должны стать неотъемлемой частью практического здравоохранения. Нам не нужно соперничество в этой области, нам нужно объединение усилий, чтобы мы могли максимально помочь пациентам.

Мечтать не возбраняется. Как вы считаете, может ли случиться так, что можно будет с помощью ваших технологий создать, например, руку, потом соединить ее с человеком, и она будет работать как своя?

Петр Тимашев: Думаю, это не из области только мечтаний. Не исключено, что лет через 15-20 такое произойдет. Можно будет создать (не вырастить!) руку с помощью новейших технологий, научиться ее подсаживать человеку. Не исключено!

Давно в газете, где тогда работала, готовила первую подборку статей на тему медицины, меня познакомили с молодым кандидатом медицинских наук Николаем Лопаткиным. От него впервые услышала слово «гемодиализ». А Николай Алексеевич пригласил посмотреть искусственную почку. Поехала. Думала, где-то на специальном столе будет лежать эта искусственная почка, которая, как утверждал Николай Алексеевич, спасает тех, у кого собственные почки не функционируют. А он повел меня в зал, где стояли аппараты для проведения гемодиализа. Я увидела, как они работают вместо пораженной почки. Это потом Николай Алексеевич стал известным всему миру урологом. Его имя носит институт. А гемодиализ до сих пор не устарел. До сих пор спасает. А маленькой, созданной и внедренной в организм человека чужой, но своей почки, как не было, так и нет. С помощью клеточных технологий такое возможно?

Петр Тимашев: Вся регенеративная медицина трудится, чтобы такое стало реальностью. Есть уже первые успешные результаты в области создания живой почки. Но пока это в пределах лаборатории.

Ключевой вопрос

Вы один из ведущих специалистов в России в области регенеративной медицины, хотя по образованию химик, доктор химических наук. А недавно на полосе «Медицина» мы опубликовали беседу с главврачом Боткинской больницы членом-корреспондентом РАН Алексеем Шабуниным, который убежден, что во главе медицинского учреждения должен быть врач. Институт регенеративной медицины — учреждение медицинское, а возглавляет его химик. Ваш комментарий?

Петр Тимашев: С Алексеем Васильевичем абсолютно согласен. Но должен заметить, он ратует за специалистов в данной области. Именно за специалиста, а не менеджера-администратора со стороны! Надеюсь, я прежде всего не менеджер и не администратор. Моя область — наука, призванная заниматься проблемами охраны здоровья. А современная медицина становится отраслью междисциплинарной. И чем дальше, тем больше.

Даже если посмотреть на крупнейшие открытия, которые поставлены на службу спасения людей от тяжелейших болезней, то не редко они созданы не чисто медиками. Испокон веков, чтобы поступить на медицинский факультет, надо сдавать экзамен по физике, химии и биологии. Без них, а теперь еще и математики, немыслимо создание новых медицинских технологий и, конечно, лекарств. А уж если говорить о регенерации, то она невозможна без объединения усилий медиков, химиков, физиков, биологов, математиков… Теперь часто как об огромном достижении хирургии говорят о роботе Да Винчи, забывая о том, что Да Винчи обязан своим происхождением прежде всего физикам…

Гидронефроз у детей: почему не стоит затягивать с обращением к врачу

Когда болеют дети, тяжело вдвойне. К счастью, сегодня многие врожденные патологии поддаются 100% коррекции. К их числу относится и такое тяжелое заболевание мочеполовой системы, как гидронефроз. О том, каким бывает гидронефроз, как его диагностируют и какие современные методики успешно применяют для лечения болезни, проекту «Москва — столица здоровья» рассказал Артур Владимирович Кулаев — детский хирург, уролог-андролог отделения детской урологии и андрологии Морозовской детской больницы.

Что представляет собой гидронефроз?

Гидронефроз — это заболевание почки, которое характеризуется расширением коллекторной системы и истончением ее паренхимы (основной ткани почки). Высокое давление, которое создается в лоханках и чашечках, отрицательно влияет на рабочую часть почки. Истончение паренхимы и ухудшение кровотока внутри нее вызывают нарушение функции почки, и, в итоге, могут привести к ее гибели.

Какие виды заболевания существуют?

Гидронефроз бывает двух видов: врожденный или приобретенный. Когда речь идет о детской урологии, чаще встречается врожденный гидронефроз. Как правило, заболевание вызвано стенозом (сужением) мочеточника в том месте, где он отходит от лоханки, но возможны и другие причины.

Что касается приобретенного гидронефроза, то он появляется в старшем возрасте, когда у детей развивается, например, мочекаменная болезнь. В этом случае нарушение проходимости вызывают конкременты (т. е. камни) в области верхней трети мочеточника. Также в основе приобретенного гидронефроза могут лежать различные онкологические заболевания, например, когда опухоль снаружи почки сдавливает зону отхождения мочеточника от лоханки.

Каковы симптомы гидронефроза?

К сожалению, специфических симптомов гидронефроза не существует. Единственный признак, который может говорить о том, что у ребенка критически расширилась лоханка — так называемый блок почки. Это комплекс симптомов, проявляющийся болью в поясничной области, тошнотой и рвотой. При их наличии следует немедленно обратиться за помощью к врачу, который проведет дифференциальную диагностику.

Как лечат гидронефроз почек у детей?

Мы лечим гидронефроз оперативным путем. Оперативные вмешательства при гидронефрозе делятся на две группы: это лапароскопические операции и открытые. Они направлены на то, чтобы восстановить проходимость мочевых путей, т. е. убрать препятствие, которое не дает моче без проблем оттекать из лоханки в мочеточник. В Морозовской больнице, начиная с 2010 года, отдается предпочтение именно лапароскопическим операциям, при которых травматичность для ребенка минимальна, а следовательно, менее выражен болевой синдром и короче период госпитализации.

Расскажите подробнее, как проходит лапароскопическая операция?

Правильное название операции «лапароскопическая пластика лоханки мочеточника» (или лапароскопическая пиелопластика). Лапароскопическая пиелопластика обладает высокой эффективностью и в данный момент считается золотым стандартом в лечении гидронефроза. Чем она отличается от открытой операции? Открытое оперативное вмешательство при гидронефрозе выполняется при помощи обычных хирургических инструментов: проводится разрез в поясничной области или на животе, а затем из этого разреза осуществляется реконструкция.

При лапароскопической пиелопластике операция проходит практически без крови: мы используем оптику, которую вводим в живот ребенка через 3 небольших прокола, и манипуляторы — специальные лапароскопические инструменты. Далее смотрим на монитор и работаем руками внутри брюшной полости ребенка. Операция выполняется под общей анестезией и может занять от 1,5 до 3 часов, в зависимости от того, как почка располагается по отношению к нашей камере (повернута она или нет и т. п.).

В чем залог успеха оперативного лечения гидронефроза в Морозовской детской клинической больнице?

Если коротко, то я бы выделил три слагаемых успеха: современное оборудование, профессионализм хирургов и мультидисциплинарный подход к лечению. У нас накоплен самый большой опыт из всех российских клиник в лечении гидронефроза с использованием лапароскопических технологий. Мы активно работаем с 3D-лапароскопией. Это уникальное оборудование, которое позволяет хирургу увидеть трехмерную картину и более точно выполнять движения, накладывать швы и делать другие манипуляции. Нам лучше видно и более понятно, что мы делаем, да и трехмерная картина для человеческого глаза более привычна. В итоге риск кровотечений, равно как и других послеоперационных осложнений, сводится практически к нулю.

Насколько операция по поводу гидронефроза у ребенка в Морозовской больнице доступна иногородним?

Все виды лапароскопической пиелопластики в Морозовской больнице выполняются для пациентов бесплатно, вне зависимости от их места жительства. Единственное условие — это наличие полиса ОМС.

Сколько времени уйдет на восстановление ребенка после лапароскопической пиелопластики?

В среднем, 5 — 7 дней. В течение первых суток после операции ребенку прописан постельный режим. Кроме того, пациент находится под круглосуточным наблюдением. Затем на протяжении 2 — 3 дней ребенок получает необходимую антибактериальную и инфузионную терапию (в виде капельниц), после чего его выписывают домой.

В чем на сегодняшний день заключается профилактика гидронефроза у детей?

К сожалению, болезнь нельзя предотвратить с помощью приема лекарств. Пользуясь случаем, я хочу обратиться ко всем родителям, столкнувшимся с проблемой гидронефроза у ребенка: не надо бояться. Просто как можно раньше обратитесь за помощью к профессионалам.

Источник: Москва — столица здоровья

Гидронефроз

В норме моча, образованная в почке, беспрепятственно попадает в почечные чашечки, затем в лоханку, в мочеточник и, наконец, в мочевой пузырь, откуда полностью эвакуируется при нормальном мочеиспускании.

К гидронефрозу приводит масса различных причин, однако общим для всех них является нарушение эвакуации мочи из почки.

Причины гидронефроза (почки)

  • врожденное сужение лоханочно-мочеточникового сегмента (ЛМС) – места перехода почечной лоханки в мочеточник,
  • наличие дополнительного сосуда, идущего к нижнему полюсу почки, который перекрещивается с мочеточником и вызывает обструкцию     последнего,
  • аномалии положения мочеточника (например, расположение мочеточника за нижней полой веной),
  • наличие камней (конкрементов) в просвете мочевых путей,
  • аденома предстательной железы,
  • новообразования мочеточника и мочевого пузыря,
  • травматические повреждения мочевых путей и др.

Принципиально гидронефроз почки можно разделить на два типа:

  • Первичный (или врожденный) гидронефроз. Данная форма гидронефроза, как правило, развивается вследствие врожденного сужения лоханочно-мочеточникового соединения. В абсолютном большинстве случаев первичный гидронефроз диагностируется в молодом возрасте (до 30 лет).
  • Вторичный, или приобретенный гидронефроз – осложнение какого-либо заболевания (мочекаменная болезнь, опухоли, травмы).

Стадии гидронефроза (почки)

В течении гидронефроза традиционно принято выделять три стадии, имеющие характерные объективные признаки.

  • На I стадии гидронефроза выявляется расширение лоханки почки (пиелоэктазия).
  • II стадия гидронефроза характеризуется расширением не только лоханки, но и чашечек почки. На этой стадии начинает страдать ткань почки, начинается ее повреждение и атрофия.
  • III стадия – финал развития гидронефроза. Почка полностью атрофируется, перестает функционировать и превращается, по сути, в тонкостенный мешок.

Стадии развития гидронефроза, вызванного наличием дополнительного сосуда в области лоханочно-мочеточникового сегмента (ЛМС).

Симптомы гидронефроза (почки)

Как проявляется гидронефроз почки?

Трудно выделить какие-то специфические жалобы. Возможно чувство тяжести (тупой боли) в поясничной области, примесь крови в мочи (макрогематурия), повышение артериального давления, периодические необъяснимые подъемы температуры, общая слабость. Хотя часто жалоб нет вовсе.

Чем опасен гидронефроз?

При хроническом нарушении оттока мочи почка рано или поздно атрофируется (погибает). Помимо этого возникает целый ряд неприятных сопутствующих проблем. Страдающая почка в повышенном количестве выделяет вещества, приводящие к повышению артериального давления (нефрогенная артериальная гипертензия). Особенность этой гипертензии в ее «злокачественности»: она крайне плохо поддается терапии и с высокой степенью вероятности приводит к «сосудистым катастрофам», таким как инсульт. Кроме того, «умирающая» почка может инфицироваться и привести к серьезным осложнениям, требующим экстренной операции.


Обращаем Ваше внимание на то, что интернет-сайт uroportal.ru несет исключительно информационный характер. В действительности заболевание может протекать по другому. Не пытайтесь заниматься самостоятельной диагностикой и лечением, при наличии симптомов заболевания настоятельно рекомендуем обратиться за консультацией к специалисту. 

Запись на консультацию к урологу


Диагностика гидронефроза (почки)

Современные методы диагностики (УЗИ, рентгеноскопия, КТ, МРТ), как правило, позволяют не только выявить гидронефроз, но и определить причину развития гидронефроза, а также спланировать оперативное вмешательство.

  
Гидронефроз — УЗИ Гидронефроз — экскреторная урография (рентген после введения контрастного вещества в вену)

Лечение Гидронефроза (почки)

В абсолютном большинстве случаев для лечения гидронефроза необходима операция. Хирургическое вмешательство направлено на устранение причины нарушения оттока мочи.

В настоящее время существует большое количество хирургических методов лечения гидронефроза. При этом основная роль отводится так называемым «малоинвазивным» (нетравматичным) операциям, например, лечение гидронефроза при помощи лапароскопии. В частности, лапароскопическая пиелопластика по Андерсену-Хайнцу уже давно является «золотым стандартом» лечения гидронефроза, вызванного сужением лоханочно-мочеточникового сегмента. 


Лечение гидронефроза  — лапароскопия. Этапы пиелопластики (операции Андерсена-Хайнца): A,В -резекция зоны сужения и избыточной ткани почечной лоханки, С — наложение анастомоза (соединения) между мочеточником и лоханкой.


Лапароскопическая пиелопластика — этап наложения анастомоза

В целом, методика лечения гидронефроза определяется в первую очередь причиной его развития, а также состоянием здоровья, возрастом пациента и, что немало важно, техническими и «человеческими» возможностями конкретного лечебного учреждения.


Процесс восстановления организма после отказа от алкоголя

Алкоголизм — это одно из самых распространенных хронических заболеваний.

Злоупотребление алкоголем находится в первой тройке среди всех возможных факторов риска преждевременной смерти, инвалидности и потери здоровья в мире 1. С ним связано множество экономических и социальных проблем, например именно чрезмерное употребление спиртного становится одной из самых частых причин разводов в России 2.

Алкоголь — токсичное вещество, вызывающее поражение большинства органов и провоцирующее более 60 различных расстройств 3.

Злоупотребление им — фактор риска развития стеатоза 4, цирроза печени, различных видов рака, сахарного диабета, психоневрологических расстройств 5, нарушения репродуктивной функции 6, а также инфекционных болезней, таких как ВИЧ, туберкулез, пневмонии и заболевания, передающиеся половым путем 1. Неблагоприятные социально-бытовые условия, в которых находится больной алкоголизмом, и вызванное алкоголем поражение иммунитета повышает вероятность развития инфекций 7.

Алкоголь поражает различные органы, действуя в трех основных направлениях: вызывает интоксикацию (опьянение), провоцирует развитие зависимости и оказывает прямое токсическое действие 3.

Интоксикация — это острое состояние опьянения, которое появляется после избыточного приема спиртного в течение относительно короткого времени. Именно интоксикация повинна в большинстве случаев насилия, травм и несчастных случаев, вызванных употреблением алкоголя 3.

Зависимость формируется из-за психоактивных свойств алкоголя. Он вызывает различные изменения на уровне нейрохимических реакций, из-за которых пациент перестает контролировать количество и кратность употребления спиртного, невзирая на явные изменения здоровья и социального статуса 3.

Токсичность алкоголя становится причиной развития кардиомиопатий 8, онкологических заболеваний 9 различных органов, а также поражения печени. Поэтому после отказа от алкоголя перед человеком встает проблема восстановления организма в целом и печени в частности.

Симптомы поражения печени из-за алкоголя

Хроническое поражение ткани печени, вызванное систематическим употреблением алкоголя, называется алкогольной болезнью печени. Она развивается в несколько стадий:

  • 1

    Алкогольная жировая дистрофия печени (АБП/АЖБП или стеатоз) —

    избыточное накопление жировых капель в печеночной ткани.

  • 2

    Гепатит (стеатогепатит) —

    развитие воспалительного процесса на фоне жировой инфильтрации печени.

  • 3

    Фиброз —

    некроз (гибель) гепатоцитов и их замещение соединительной тканью.

  • 3

    Цирроз —

    дальнейшее прогрессирование фиброза с изменением структуры печени и значительными нарушениями ее функции. Развивается за 20 лет у 22% пациентов с АБП15.

На скорость и степень поражения печени влияют количество выпиваемого алкоголя и продолжительность злоупотребления (женщины более подвержены токсическому воздействию 11), этническая принадлежность и сопутствующие заболевания. На ранних стадиях поражения печени явные признаки, как правило, отсутствуют и только в анализах крови можно обнаружить повышение уровня печеночных ферментов 11, а на УЗИ — выявить признаки стеатоза печени. По мере прогрессирования заболевания и достижении декомпенсации функции органа могут проявляться признаки поражения печени: желтуха, склонность к кровоточивости, отеки, расширение подкожных вен живота и т. д.

Восстанавливается ли печень после отказа от алкоголя

На стадии стеатоза поражение печени обычно диагностируют случайно, проводя исследования по какому-то другому поводу 12. И это можно рассматривать как удачное стечение обстоятельств, потому что на стадии стеатоза можно полностью вернуть нормальное состояние печени 13. По сути, для этого достаточно совершенно отказаться от алкоголя, адекватно питаться и поддерживать необходимый уровень физической активности, а об остальном позаботится организм, так как печень обладает высокой способностью к регенерации. Для ускорения процесса восстановления может использоваться и лекарственная терапия 13.

На более поздних стадиях процесс поражения печени не всегда можно полностью обратить вспять, но отказ от алкоголя, соблюдение режима и приверженность терапии помогают улучшить состояние органа.

Как способствовать быстрому восстановлению печени

Прежде всего необходимо полностью отказаться от спиртного 13. Даже уменьшение количества алкоголя и кратности его употребления пойдет во благо 11.

Диета

Питание пациента должно быть сбалансированным и разнообразным. Это поможет обеспечить организм макро- и микроэлементами, дефицит которых характерен при хроническом злоупотреблении алкоголем. Калорийность рациона в среднем должна составлять не менее 2000 ккал в сутки (точно рассчитывается в зависимости от пола, возраста и физической активности). Диета должна содержать не менее 1–1,5 г белка на килограмм массы тела больного в сутки 11.

Лекарственные препараты

Поскольку хронический алкоголизм часто сопровождается дефицитом витаминов в организме, врач может назначить витаминно-минеральные комплексы, особенно витамины группы В 11. При тяжелом течении алкогольного стеатогепатита могут быть рекомендованы глюкокортикоиды. Для терапии алкогольной болезни печени и ускорения ее восстановления могут быть использованы эссенциальные фосфолипиды 14. Они способствуют стабилизации клеточных мембран гепатоцитов, защищают клетки печени от оксидативного стресса и способствуют предупреждению фиброза. Препараты на основе эссенциальных фосфолипидов обладают благоприятным профилем безопасности и способствуют улучшению состояния печени при алкогольной болезни печени 11.

При тяжелом течении алкогольной болезни печени показана трансплантация органа 11, однако на практике доступность этого метода весьма ограничена.

Регенерация почек и роль стволовых клеток

Abstract

Из-за своей сложности, высокой метаболической активности и выделительной функции почки особенно восприимчивы к острым ишемическим и токсин-опосредованным повреждениям. Современные методы лечения не способствуют регенерации почек, и растет интерес к новым методам лечения, основанным на клеточных источниках регенерации почек, таких как терапия стволовыми клетками. Наше понимание клеточных источников для регенерации почек и стволовых клеток, присутствующих во взрослой почке, резко изменилось за последние годы.Здесь мы обсуждаем текущее понимание почечных стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых млекопитающих, и их роль в регенерации почек. Мы также обобщили наилучшие имеющиеся данные, подтверждающие роль стволовых клеток в регенерации почек.

Ключевые слова: регенерация почек, стволовые клетки, клетки-предшественники

Введение

Заболевания почек достигли масштабов эпидемии и привели к значительной заболеваемости и смертности. Согласно Национальному исследованию здоровья и питания (NHANES), в период с 1999 по 2004 год примерно 11% населения США в возрасте 20 лет и старше страдали заболеваниями почек. 1 Из-за своей сложной структуры, быстрого метаболизма и воздействия продуктов жизнедеятельности и токсинов почки особенно подвержены острым повреждениям. В настоящее время пациентам с повреждением почек проводят диализ в ожидании спонтанной регенерации, которая часто бывает неполной. Пациентам с необратимым повреждением почек требуется пожизненный диализ или трансплантация. Эти методы лечения несут значительные расходы для системы здравоохранения. В 2007 году стоимость лечения ESRD составляла примерно 35 миллиардов долларов. 2

Поскольку ни один из современных методов лечения не способствует регенерации почек, исследователи активно изучают новые методы лечения острого повреждения почек (ОПП), основанные на клеточных механизмах регенерации, такие как терапия на основе стволовых клеток. Регенерация почек может происходить за счет пролиферации выживших зрелых клеток, стволовых клеток, присутствующих в почках, или за счет стволовых клеток внепочечного происхождения. Роль внепочечных клеток в регенерации почек, хотя первоначально считалась важной, в настоящее время убедительными исследованиями показано, что она незначительна. 3 5 Считается, что один из механизмов регенерации почек включает дифференцировку, пролиферацию и редифференцировку выживших зрелых клеток. 5 Понимание стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых, и их возможного вклада в регенерацию почек быстро развивалось. Здесь мы обсуждаем роль стволовых клеток в регенерации органов и текущее понимание стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых млекопитающих.

Стволовые клетки и регенерация органов

Стволовые клетки представляют собой недифференцированные клетки, способные к самообновлению и дифференцировке.Стволовые клетки классифицируются как тотипотентные, плюрипотентные и мультипотентные в зависимости от их способности дифференцироваться в один или несколько типов зрелых клеток. Тотипотентные стволовые клетки могут давать как эмбриональные, так и внеэмбриональные клетки. Считается, что оплодотворенная яйцеклетка после первых нескольких клеточных делений является тотипотентной стволовой клеткой. 6 Напротив, плюрипотентные стволовые клетки могут образовывать клетки только эмбрионального, но не внеэмбрионального происхождения. Мультипотентные стволовые клетки могут продуцировать два или более зрелых типа клеток. 6 Термин «клетка-предшественник» часто используется в литературе по стволовым клеткам. В отличие от стволовых клеток клетки-предшественники обладают ограниченной способностью к самообновлению, и их потомство дает начало определенным типам зрелых клеток. Клетки-предшественники играют важную роль в регенерации тканей.

Способность к регенерации тканей различается у разных видов. Например, беспозвоночные, такие как планарии, могут полностью регенерировать из небольших сегментов тела. Напротив, низшие позвоночные обладают ограниченной регенеративной способностью и могут регенерировать только ампутированную часть тела в той или иной степени. Интересно, что эта способность к регенерации часто утрачивается на более поздних стадиях развития и во взрослой жизни. Примером этой переменной способности к регенерации являются головастики бесхвостых животных, которые могут регенерировать конечности только до метаморфоза, в то время как тритоны и аксолотли сохраняют способность к регенерации на протяжении всей личиночной и взрослой жизни. 7

Подобно конечностям, регенерация внутренних органов, таких как почки, у взрослых животных различна. Низшие животные, такие как хрящевые рыбы, могут образовывать новые нефроны после повреждения, в то время как высшие животные просто демонстрируют компенсаторный рост оставшихся нефронов, а именно «регенеративную гипертрофию».» 8 Способность образовывать новые нефроны после завершения нефрогенеза называется «неонефрогенезом». Пластиножаберные, такие как скаты и акулы, во взрослом возрасте демонстрируют неонефрогенез после частичной резекции почки. 9 Недавно в работе Diep et al. выявили неонефрогенез у взрослых рыбок данио. 10 В отличие от низших позвоночных млекопитающие обладают очень ограниченной регенеративной способностью почек. Постнатальная почка млекопитающих реагирует на частичную резекцию регенеративной гипертрофией без неонефрогенеза. 8 Однако у млекопитающих во внутриутробном периоде путем частичной нефрэктомии можно индуцировать образование новых нефронов. Например, число нефронов в контралатеральной почке увеличивается на 45% после односторонней нефрэктомии на 100-й день (срок 150 дней) беременности у нерожденной овцы. 11

Роль стволовых клеток лучше определена в органах с высоким клеточным оборотом, таких как костный мозг, кишечник и кожа. Однако их роль в органах с низким клеточным оборотом, таких как почки, плохо определена.Недавняя литература продемонстрировала способность почки к регенерации. Учитывая регенеративную способность взрослой почки, наличие стволовых клеток в эмбриональной почке, неонефрогенез во время пренатальной жизни у позвоночных и пре- и постнатальную жизнь у беспозвоночных, вполне вероятно, что почка взрослого млекопитающего имеет стволовые клетки, которые являются клеточными источниками регенерация почек.

Стволовые клетки почек

Исследователи использовали различные методы для идентификации стволовых клеток в почках взрослых.К ним относятся маркеры клеточной поверхности, экспрессируемые другими стволовыми клетками, удержание метки редко делящимися клетками, экспрессия факторов транскрипции, экспрессируемых во время нефрогенеза и экструзии флуоресцентных красителей, и условия культивирования клеток. Используя эти методы, потенциальные стволовые клетки были идентифицированы в капсуле Боумена, почечных канальцах и интерстиции почек взрослых млекопитающих. Несмотря на то, что было идентифицировано несколько многообещающих кандидатов в стволовые клетки почек и ниши, окончательные стволовые клетки взрослых почек и их идентификационные маркеры остаются неуловимыми.

Почка представляет собой сложный орган, который возникает в результате взаимодействия между двумя отдельными эмбриональными придатками и имеет более 24 различных зрелых клеток. Следовательно, почки взрослых млекопитающих, вероятно, имеют несколько стволовых клеток и ниш. Здесь мы обсудим некоторые из наиболее многообещающих кандидатов в стволовые клетки почек и доказательства, подтверждающие их роль в регенерации почек. Поскольку выделение стволовых клеток с использованием селективных условий культивирования имеет ряд ограничений, таких как заражение клетками крови и дедифференцировка зрелых клеток в условиях культивирования, мы не обсуждали этот метод в настоящем обзоре.Мы также не обсуждали роль экзогенного введения и паракринных эффектов стволовых клеток в регенерации почек.

CD133 (проминин-1).

CD133 представляет собой белок пентаспановой мембраны, присутствующий в выступах плазматической мембраны клеток. Эпитоп CD133 экспрессируется на нескольких стволовых клетках, таких как гемопоэтические, нейральные, эндотелиальные клетки-предшественники и раковые стволовые клетки. 12 Поскольку CD133 имеет несколько изоформ с экспрессией, зависящей от ткани и дифференцировки, зрелые клетки и стволовые клетки, вероятно, экспрессируют разные изоформы CD133. Это подтверждается идентификацией стволовых клеток моноклональными антителами только против эпитопов CD133/1 и CD133/2, а не другими антителами против CD133. 13 Почка имеет обильную экспрессию мРНК CD133, клетки 12 и CD133 + были идентифицированы в клубочках, канальцах и интерстиции взрослой почки. Хотя CD133 экспрессируется несколькими взрослыми стволовыми клетками, CD133 может быть недостаточно и могут потребоваться сопутствующие маркеры для идентификации стволовых клеток почек.

Убедительные доказательства в пользу CD133 как маркера почечных стволовых клеток получены в работе Сагринати и его коллег. Они показали наличие клеток CD133 + CD24 + PDX в мочевом полюсе капсулы Боумена. 14 PDX экспрессируется зрелыми подоцитами, тогда как CD24 экспрессируется в неофрогенной зоне развивающихся почек. 15 Эти клетки CD133 + CD24 + совместно экспрессировали факторы транскрипции стволовых клеток Oct4 и BmI-1 и были способны к самообновлению и дифференцировке в несколько линий в условиях культивирования. 14 Наиболее интересно, CD233 + CD24 + PDXCELLS, последовательно дифференцированные в CD133 + CD24 + PDX + и CD133 CD24 CD24 клетки PDX + , как они мигрировали из мочи к сосудистому полюсу капсулы Боумена. 16 , 17 Экзогенно введенные клетки CD133 + CD24 + PDX человека улучшали морфологическое и функциональное восстановление после острого повреждения почек (ОПП), вызванного рабдомиолизом, у мышей SCID.Кроме того, другие исследователи показали ускоренную дифференцировку CD133 + париетальных гломерулярных эпителиальных клеток в зрелые подоциты после потери подоцитов. 18 Способность стволовых клеток, присутствующих в мочевом полюсе капсулы Боумена, образовывать зрелые подоциты была показана несколькими исследователями с использованием различных методов идентификации, таких как иммуногистохимия, сохранение метки и трансгенный подход. 14

Bussolati и коллеги были одними из первых, кто идентифицировал стволовые клетки CD133 + в почках взрослого человека.С помощью иммуногистохимии авторы показали, что 1% интерстициальных клеток в корковом веществе почки человека представляют собой CD133/1 + . 19 В отличие от Sagrinati и коллег, они не обнаружили CD133 + клеток в клубочках. Это может быть результатом различий в исследованных образцах и методологии. Клетки CD133 + , присутствующие в почечном интерстиции, экспрессировали PAX-2 и не экспрессировали гемопоэтические маркеры. После выделения клетки CD133 + дифференцировались in vitro в эндотелий и эпителий и после субкапсулярной инъекции образовывали трубчатые структуры.Интересно, что после экзогенного введения в мышиную модель ОПП, вызванного рабдомиолизом, клетки CD133 + интегрировались в регенерирующие канальцы.

Ward и коллеги идентифицировали клетки CD133/1 + , интеркалированные между эпителиями в сосочковой части петли Генле. 20 Эти клетки совместно экспрессировали нестин, белок промежуточного филамента, экспрессируемый несколькими стволовыми клетками, эндотелиальными предшественниками, присутствующими в мезонефральной мезенхиме и зрелых подоцитах.Они также совместно экспрессировали несколько маркеров эмбриональных стволовых клеток, таких как SSEA4, Nanog, Sox2 и Oct4; однако они были отрицательными для CD24. Интересно, что эти клетки дифференцировались в эпителиальные и нейральные фенотипы, показали интеграцию в развивающиеся канальцы и ассоциировались с эпителием кортикальных канальцев в совместных культурах и в экспериментах с 3D-культивированием коллагенового геля.

Недавно Линдгрен и его коллеги идентифицировали клетки-предшественники в проксимальных канальцах человека на основании активности альдегиддегидрогеназы. 21 Эти клетки были рассеяны по проксимальным канальцам и экспрессировали CD133, CD24 и виментин. Интересно, что некоторые из регенерирующих канальцев были выстланы по всей окружности CD133- и экспрессирующими виментин клетками. Это исследование также поддерживает CD133 как потенциальный маркер почечных стволовых клеток. 21

Клетки с медленным циклом.

Одной из особенностей, отличающих стволовые клетки от дифференцированных клеток, является редкое деление клеток. Эти клетки с медленным циклом могут быть идентифицированы с помощью импульсного и чейзового метода мечения.В этом методе клетки метят маркерами, которые включаются во время клеточного деления, после чего следует длительный период поиска, когда метка теряется из делящихся клеток и сохраняется в редко делящихся клетках. Поэтому редко делящиеся клетки часто называют клетками, сохраняющими метку (LRC). Наиболее часто используемые метки представляют собой слитый белок 5-бром-2-дезоксиуридин (BrdU) и гистона 2B-зеленого флуоресцентного белка (h3B-GFP). BrdU является экзогенно вводимым аналогом нуклеотида, в то время как экспрессию h3B-GFP можно включать и выключать с помощью индуцибельного трансгенного подхода.h3B-GFP предлагает несколько преимуществ по сравнению с BrdU: (1) BrdU является митогеном, который потенциально может повреждать ДНК стволовых клеток; (2) Маркировка с помощью BrdU основана на предположении, что стволовые клетки асимметрично разделяют ДНК, при этом более старая цепь сохраняется стволовыми клетками, а новая цепь передается дочерним клеткам. Напротив, мечение с помощью h3B-GFP не зависит от асимметричного разделения нитей ДНК во время клеточного деления; (3) BrdU может метить клетки только в фазе S клеточного цикла, тогда как маркировка с помощью h3B-GFP не зависит от клеточного цикла; (4) Мечение с помощью h3B-GFP является более чувствительным методом обнаружения клеток с медленным циклом, чем BrdU, а стабильность h3B-GFP допускает более длительный период вымывания, и (5) h3B-GFP не требует жесткой обработки для обнаружения и, следовательно, может использовать для сортировки живых клеток.

Несмотря на то, что это многообещающий метод, удержание метки имеет следующие ограничения при идентификации стволовых клеток: (1) Каждая ткань имеет различный период мечения и поиска в зависимости от времени цикла стволовых и зрелых клеток, присутствующих в ткани. (2) Пул стволовых клеток может быть неоднородным в органе, при этом одни стволовые клетки имеют более длительное время цикла, чем другие. (3) Время цикла стволовых клеток зависит от потребности тканей в новых клетках. Он короче в тканях с высоким клеточным оборотом, таких как костный мозг, кожа и кишечник, и зависит от возраста организма и потребности в регенерации тканей.(4) Эти методы маркировки не могут отличить терминально дифференцированные стареющие клетки, которые перестали делиться, от покоящихся стволовых клеток, которые ждут продолжения клеточного цикла. Хотя этот метод был успешно использован для идентификации стволовых клеток в коже, кишечнике и легких, никогда не было показано, что удерживание метки избирательно идентифицирует популяции стволовых клеток. В хорошо проведенном исследовании Киля и его коллег удержание BrdU имело низкую чувствительность и специфичность при идентификации гемопоэтических стволовых клеток (HSC). 22 В этом исследовании менее 6% HSC сохраняли BrdU, и менее 0,5% всех BrdU-сохраняющих гемопоэтических клеток были HSC.

Хотя сохранение этикетки имеет несколько ограничений, в почках имеется достаточно данных для дальнейшего использования этого метода идентификации стволовых клеток. Некоторые из наиболее многообещающих доказательств, подтверждающих стволовость LRC, присутствующих в почках, получены в работах Oliver и коллег, а также Maeshima и коллег. 23 26 Oliver et al. показали наличие LRC в сосочках взрослых мышей и почек крыс при введении BrdU в постнатальном периоде с последующим длительным периодом поиска. 25 Эти клетки присутствовали в канальцах и интерстиции. После ишемии LRC пролиферировали и перемещались из сосочка. Когда эти клетки вводили в кору, многие из них включались в почечную паренхиму. Более того, LRCs образовывали сферы, дифференцировались во множественные типы клеток и экспрессировали нестин, маркер стволовых клеток. В последующем хорошо проведенном исследовании Оливер и его коллеги показали наличие LRC в верхнем сосочке с использованием трансгенных мышей h3B-GFP. 23 Эти LRC пролиферировали, мигрировали и внедрялись в почечные канальцы после повреждения почек.

Одно из наиболее многообещающих исследований, подтверждающих стволовость LRC, было проведено Maeshima и его коллегами. Эти исследователи идентифицировали LRC в почках крыс, преимущественно в проксимальных канальцах, пометив их BrdU в течение семи дней, после чего следовал более короткий период в две недели. 26 Интересно, что после ишемического повреждения пролиферация происходила преимущественно в LRC, которые были израсходованы в процессе восстановления.Более того, во время регенерации эти LRC делятся асимметрично, что является кардинальной характеристикой стволовых клеток, при этом одна из дочерних клеток последовательно приобретает мезенхимальный, за которым следует эпителиальный фенотип, в то время как другая остается недифференцированной. В последующей статье из той же лаборатории исследователи показали переход LRC из эпителия в мезенхиму и их участие в фиброзной реакции после односторонней обструкции мочеточника у крыс. 27

Другие методы идентификации.

Транспортеры АТФ-связывающей кассеты (АВС) представляют собой АТФ-зависимые мембранные белки, которые преимущественно экспрессируются в органах выделения, таких как почки, печень, кишечник и поджелудочная железа. 28 Семейство ABC-транспортеров человека состоит из 49 членов. Хотя транспортеры ABC широко изучены, функции многих членов семейства до сих пор неизвестны. Наиболее признанной функцией транспортеров ABC является вытеснение токсичных соединений из клеток. 29 , 30 Два транспортера ABC, P-гликопротеин (P-gp) и белок устойчивости к раку молочной железы (BCRP), участвуют в регенерации тканей и связаны со стволовыми клетками.Поскольку стволовые клетки вытесняют Родамин 123 и краситель Hoescht 33,342 через транспортеры ABC, они занимают уникальное место на графике рассеивания сортировки клеток с помощью флуоресценции и называются клетками «боковой популяции» (SP). Экспрессия P-gp и BCRP жестко регулируется, и уровень экспрессии определяет дифференцировку клеток SP в зрелые клетки, а потеря экспрессии ABC приводит к дифференцировке клеток.

В 1996 году выделение гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) было выполнено путем идентификации клеток с низкой флуоресценцией после окрашивания красителем Hoechst 33,342. 31 В экспериментах по конкурентной репопуляции эти клетки SP способствовали длительному приживлению трансплантата после удаления костного мозга. 31 Впоследствии клетки SP были выделены из других тканей, таких как печень, скелетные мышцы и сердце, и были вовлечены в регенерацию тканей. 32 В отличие от печени, скелетных мышц и сердца роль SP-клеток почек в регенерации неоднозначна.

Клетки SP были выделены из почек взрослых мышей, крыс и людей. 33 36 Было показано, что эти клетки составляют примерно 0,03–0,1% клеток почек. 34 Выделенные клетки представляют собой смешанные клеточные популяции, содержащие клетки костномозгового и почечного происхождения, и, используя эти непрямые методы, исследователи продемонстрировали интерстициальную и канальцевую нишу для SP-клеток. 33 , 35 Несколько исследований показали благотворное влияние SP-клеток на животных моделях заболеваний почек, таких как адриамициновая нефропатия, 35 цис-платин-индуцированное ОПП33 и хроническое заболевание почек. 37 Преимущества этих моделей для почки, вероятно, были связаны с паракринными эффектами клеток SP, поскольку было продемонстрировано незначительное прямое включение клеток SP в регенерирующую почку.

Из нескольких других предполагаемых маркеров стволовых клеток почек Sall1 является наиболее многообещающим. Sall1 является мышиным ортологом специфичного для региона гомеотического гена дрозофилы, spalt (sal) , эволюционно консервативного семейства генов, которое играет важную роль в развитии органов у дрозофилы. 38 Существует четыре известных гомолога гена Sall у мышей (Sall1-4) и у людей (SALL1-4) . Белок Sall1 представляет собой фактор транскрипции цинковых пальцев C 2 H 2 с пятью кластерами цинковых пальцев, распределенными по длине белка; 39 Белок Sall1 действует как репрессор транскрипции, связываясь с комплексом гистондеацетилазы, обильно экспрессируется в развивающихся почках и играет критическую роль в нефрогенезе млекопитающих. 39 Sall1 является фактором транскрипции, необходимым для развития почек, и может играть роль в пролиферации стволовых клеток. 40

Мыши с гомозиготной нулевой мутацией Sall1 погибают в ближайшем постнатальном периоде с тяжелой дисгенезией почек, включая агенезию. 41 Считается, что адекватная экспрессия Sall1 имеет решающее значение для нефрогенеза посредством инвазии зачатка мочеточника в метанефральную мезенхиму. Работа Nishinakamura et al. продемонстрировала потенциал дифференцировки Sall1-экспрессирующих клеток, присутствующих в почках эмбрионов мышей.Одна идентифицированная клетка формировала колонии, содержащие несколько типов зрелых клеток почки, таких как тубулярные и гломерулярные эпителиальные клетки. У людей мутации в SALL1 приводят к синдрому Таунса-Брокса, аутосомно-доминантному (AD) заболеванию, характеризующемуся аномалиями лица и конечностей и ассоциированному с аномалиями почек и сердца. 41 В зависимости от типа мутации от 20 до 60% пациентов с синдромом Таунса-Брокса имеют агенезию почек, гипоплазию, дисплазию или мультикистозную болезнь.

В развивающейся метанефральной мезенхиме от 20 до 30% всех клеток экспрессируют Sall1. 41 Кроме того, мы идентифицировали Sall1-экспрессирующие клетки в проксимальных канальцах почек взрослых крыс (не опубликовано). После ишемически-реперфузионного повреждения 90% Sall1-экспрессирующих клеток, присутствующих в почках взрослых крыс, пролиферировали, а 5% Sall1-позитивных клеток демонстрировали асимметричное клеточное деление, при этом одна из двух соседних Sall1-позитивных клеток включала хлордезоксиуридин. КлдУ).

Вклад в регенерацию

Хотя окончательной связи между стволовыми клетками и регенерацией почек до сих пор нет, имеется достаточно данных, чтобы предположить роль стволовых клеток в регенерации почек. Соответственно, в этом разделе мы обобщили убедительные доказательства, подтверждающие роль стволовых клеток в регенерации почек.

Наиболее убедительным доказательством, подтверждающим роль стволовых клеток в регенерации почек, является демонстрация (1) образования новых нефронов (неонефрогенеза) во взрослом возрасте и (2) прогрессирования клеточной линии стволовых клеток до зрелого почечного фенотипа.В отличие от низших позвоночных, в почках взрослых млекопитающих окончательно не продемонстрировано образование новых нефронов. Хотя некоторые из ранних исследований продемонстрировали увеличение общего числа клубочков у кроликов после односторонней нефрэктомии в раннем постнатальном периоде, другие не воспроизвели эти результаты. 8 Однако, в отличие от неонефрогенеза во взрослой жизни, имеется достаточно доказательств, подтверждающих прогрессирование клеточной линии стволовых клеток до зрелого почечного фенотипа.Первые доказательства получены в работе Maeshima et al., которые продемонстрировали асимметричное клеточное деление LRCs после повреждения почек, при этом одна из дочерних клеток последовательно приобретала зрелый почечный фенотип, в то время как другая оставалась недифференцированной. 26 Другое свидетельство получено из демонстрации прогрессирования клеточной линии клеток CD133 + CD24 + PDX , присутствующих на мочевом полюсе капсулы Боумена, до фенотипа зрелых подоцитов во время их миграции к сосудистому полюсу. 17

Самый сильный аргумент против роли стволовых клеток в регенерации почек исходит из работы Хамфриса и его коллег. Эти исследователи показали, используя трансгенный подход, основанный на экспрессии Six2 , что большинство регенерирующих тубулярных клеток происходят из выживших зрелых тубулярных клеток, которые образовались во время эмбрионального развития. 3 Хотя данные Humphreys et al. исключают образование de novo новых тубулярных клеток, они не исключают роли популяции тубулярных стволовых клеток со зрелым фенотипом, экспрессирующим Six2 во время эмбриогенеза.Эти стволовые клетки-кандидаты, расположенные между промежутками в почечных канальцах, были идентифицированы с использованием различных методов, таких как удержание метки и экспрессия Oct4 и Sall1. 26 , 42 Таким образом, стволовые клетки по-прежнему остаются потенциальным источником клеток для регенерации почек и требуют дальнейшего изучения.

Регенерация почек и роль стволовых клеток

Abstract

Из-за своей сложности, высокой метаболической активности и выделительной функции почки особенно восприимчивы к острым ишемическим и токсин-опосредованным повреждениям.Современные методы лечения не способствуют регенерации почек, и растет интерес к новым методам лечения, основанным на клеточных источниках регенерации почек, таких как терапия стволовыми клетками. Наше понимание клеточных источников для регенерации почек и стволовых клеток, присутствующих во взрослой почке, резко изменилось за последние годы. Здесь мы обсуждаем текущее понимание почечных стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых млекопитающих, и их роль в регенерации почек. Мы также обобщили наилучшие имеющиеся данные, подтверждающие роль стволовых клеток в регенерации почек.

Ключевые слова: регенерация почек, стволовые клетки, клетки-предшественники

Введение

Заболевания почек достигли масштабов эпидемии и привели к значительной заболеваемости и смертности. Согласно Национальному исследованию здоровья и питания (NHANES), в период с 1999 по 2004 год примерно 11% населения США в возрасте 20 лет и старше страдали заболеваниями почек. 1 Из-за своей сложной структуры, быстрого метаболизма и воздействия продуктов жизнедеятельности и токсинов почки особенно подвержены острым повреждениям.В настоящее время пациентам с повреждением почек проводят диализ в ожидании спонтанной регенерации, которая часто бывает неполной. Пациентам с необратимым повреждением почек требуется пожизненный диализ или трансплантация. Эти методы лечения несут значительные расходы для системы здравоохранения. В 2007 году стоимость лечения ESRD составляла примерно 35 миллиардов долларов. 2

Поскольку ни один из современных методов лечения не способствует регенерации почек, исследователи активно изучают новые методы лечения острого повреждения почек (ОПП), основанные на клеточных механизмах регенерации, такие как терапия на основе стволовых клеток.Регенерация почек может происходить за счет пролиферации выживших зрелых клеток, стволовых клеток, присутствующих в почках, или за счет стволовых клеток внепочечного происхождения. Роль внепочечных клеток в регенерации почек, хотя первоначально считалась важной, в настоящее время убедительными исследованиями показано, что она незначительна. 3 5 Считается, что один из механизмов регенерации почек включает дифференцировку, пролиферацию и редифференцировку выживших зрелых клеток. 5 Понимание стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых, и их возможного вклада в регенерацию почек быстро развивалось.Здесь мы обсуждаем роль стволовых клеток в регенерации органов и текущее понимание стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых млекопитающих.

Стволовые клетки и регенерация органов

Стволовые клетки представляют собой недифференцированные клетки, способные к самообновлению и дифференцировке. Стволовые клетки классифицируются как тотипотентные, плюрипотентные и мультипотентные в зависимости от их способности дифференцироваться в один или несколько типов зрелых клеток. Тотипотентные стволовые клетки могут давать как эмбриональные, так и внеэмбриональные клетки.Считается, что оплодотворенная яйцеклетка после первых нескольких клеточных делений является тотипотентной стволовой клеткой. 6 Напротив, плюрипотентные стволовые клетки могут образовывать клетки только эмбрионального, но не внеэмбрионального происхождения. Мультипотентные стволовые клетки могут продуцировать два или более зрелых типа клеток. 6 Термин «клетка-предшественник» часто используется в литературе по стволовым клеткам. В отличие от стволовых клеток клетки-предшественники обладают ограниченной способностью к самообновлению, и их потомство дает начало определенным типам зрелых клеток.Клетки-предшественники играют важную роль в регенерации тканей.

Способность к регенерации тканей различается у разных видов. Например, беспозвоночные, такие как планарии, могут полностью регенерировать из небольших сегментов тела. Напротив, низшие позвоночные обладают ограниченной регенеративной способностью и могут регенерировать только ампутированную часть тела в той или иной степени. Интересно, что эта способность к регенерации часто утрачивается на более поздних стадиях развития и во взрослой жизни. Примером этой переменной способности к регенерации являются головастики бесхвостых животных, которые могут регенерировать конечности только до метаморфоза, в то время как тритоны и аксолотли сохраняют способность к регенерации на протяжении всей личиночной и взрослой жизни. 7

Подобно конечностям, регенерация внутренних органов, таких как почки, у взрослых животных различна. Низшие животные, такие как хрящевые рыбы, могут образовывать новые нефроны после травмы, в то время как высшие животные просто демонстрируют компенсаторный рост оставшихся нефронов, а именно «регенеративную гипертрофию». 8 Способность образовывать новые нефроны после завершения нефрогенеза называется «неонефрогенезом». Пластиножаберные, такие как скаты и акулы, во взрослом возрасте демонстрируют неонефрогенез после частичной резекции почки. 9 Недавно в работе Diep et al. выявили неонефрогенез у взрослых рыбок данио. 10 В отличие от низших позвоночных млекопитающие обладают очень ограниченной регенеративной способностью почек. Постнатальная почка млекопитающих реагирует на частичную резекцию регенеративной гипертрофией без неонефрогенеза. 8 Однако у млекопитающих во внутриутробном периоде путем частичной нефрэктомии можно индуцировать образование новых нефронов. Например, число нефронов в контралатеральной почке увеличивается на 45% после односторонней нефрэктомии на 100-й день (срок 150 дней) беременности у нерожденной овцы. 11

Роль стволовых клеток лучше определена в органах с высоким клеточным оборотом, таких как костный мозг, кишечник и кожа. Однако их роль в органах с низким клеточным оборотом, таких как почки, плохо определена. Недавняя литература продемонстрировала способность почки к регенерации. Учитывая регенеративную способность взрослой почки, наличие стволовых клеток в эмбриональной почке, неонефрогенез во время пренатальной жизни у позвоночных и пре- и постнатальную жизнь у беспозвоночных, вполне вероятно, что почка взрослого млекопитающего имеет стволовые клетки, которые являются клеточными источниками регенерация почек.

Стволовые клетки почек

Исследователи использовали различные методы для идентификации стволовых клеток в почках взрослых. К ним относятся маркеры клеточной поверхности, экспрессируемые другими стволовыми клетками, удержание метки редко делящимися клетками, экспрессия факторов транскрипции, экспрессируемых во время нефрогенеза и экструзии флуоресцентных красителей, и условия культивирования клеток. Используя эти методы, потенциальные стволовые клетки были идентифицированы в капсуле Боумена, почечных канальцах и интерстиции почек взрослых млекопитающих.Несмотря на то, что было идентифицировано несколько многообещающих кандидатов в стволовые клетки почек и ниши, окончательные стволовые клетки взрослых почек и их идентификационные маркеры остаются неуловимыми.

Почка представляет собой сложный орган, который возникает в результате взаимодействия между двумя отдельными эмбриональными придатками и имеет более 24 различных зрелых клеток. Следовательно, почки взрослых млекопитающих, вероятно, имеют несколько стволовых клеток и ниш. Здесь мы обсудим некоторые из наиболее многообещающих кандидатов в стволовые клетки почек и доказательства, подтверждающие их роль в регенерации почек.Поскольку выделение стволовых клеток с использованием селективных условий культивирования имеет ряд ограничений, таких как заражение клетками крови и дедифференцировка зрелых клеток в условиях культивирования, мы не обсуждали этот метод в настоящем обзоре. Мы также не обсуждали роль экзогенного введения и паракринных эффектов стволовых клеток в регенерации почек.

CD133 (проминин-1).

CD133 представляет собой белок пентаспановой мембраны, присутствующий в выступах плазматической мембраны клеток.Эпитоп CD133 экспрессируется на нескольких стволовых клетках, таких как гемопоэтические, нейральные, эндотелиальные клетки-предшественники и раковые стволовые клетки. 12 Поскольку CD133 имеет несколько изоформ с экспрессией, зависящей от ткани и дифференцировки, зрелые клетки и стволовые клетки, вероятно, экспрессируют разные изоформы CD133. Это подтверждается идентификацией стволовых клеток моноклональными антителами только против эпитопов CD133/1 и CD133/2, а не другими антителами против CD133. 13 Почка имеет обильную экспрессию мРНК CD133, клетки 12 и CD133 + были идентифицированы в клубочках, канальцах и интерстиции взрослой почки.Хотя CD133 экспрессируется несколькими взрослыми стволовыми клетками, CD133 может быть недостаточно и могут потребоваться сопутствующие маркеры для идентификации стволовых клеток почек.

Убедительные доказательства в пользу CD133 как маркера почечных стволовых клеток получены в работе Сагринати и его коллег. Они показали наличие клеток CD133 + CD24 + PDX в мочевом полюсе капсулы Боумена. 14 PDX экспрессируется зрелыми подоцитами, тогда как CD24 экспрессируется в неофрогенной зоне развивающихся почек. 15 Эти клетки CD133 + CD24 + совместно экспрессировали факторы транскрипции стволовых клеток Oct4 и BmI-1 и были способны к самообновлению и дифференцировке в несколько линий в условиях культивирования. 14 Наиболее интересно, CD233 + CD24 + PDXCELLS, последовательно дифференцированные в CD133 + CD24 + PDX + и CD133 CD24 CD24 клетки PDX + , как они мигрировали из мочи к сосудистому полюсу капсулы Боумена. 16 , 17 Экзогенно введенные клетки CD133 + CD24 + PDX человека улучшали морфологическое и функциональное восстановление после острого повреждения почек (ОПП), вызванного рабдомиолизом, у мышей SCID. Кроме того, другие исследователи показали ускоренную дифференцировку CD133 + париетальных гломерулярных эпителиальных клеток в зрелые подоциты после потери подоцитов. 18 Способность стволовых клеток, присутствующих в мочевом полюсе капсулы Боумена, образовывать зрелые подоциты была показана несколькими исследователями с использованием различных методов идентификации, таких как иммуногистохимия, сохранение метки и трансгенный подход. 14

Bussolati и коллеги были одними из первых, кто идентифицировал стволовые клетки CD133 + в почках взрослого человека. С помощью иммуногистохимии авторы показали, что 1% интерстициальных клеток в корковом веществе почки человека представляют собой CD133/1 + . 19 В отличие от Sagrinati и коллег, они не обнаружили CD133 + клеток в клубочках. Это может быть результатом различий в исследованных образцах и методологии. Клетки CD133 + , присутствующие в почечном интерстиции, экспрессировали PAX-2 и не экспрессировали гемопоэтические маркеры.После выделения клетки CD133 + дифференцировались in vitro в эндотелий и эпителий и после субкапсулярной инъекции образовывали трубчатые структуры. Интересно, что после экзогенного введения в мышиную модель ОПП, вызванного рабдомиолизом, клетки CD133 + интегрировались в регенерирующие канальцы.

Ward и коллеги идентифицировали клетки CD133/1 + , интеркалированные между эпителиями в сосочковой части петли Генле. 20 Эти клетки совместно экспрессировали нестин, белок промежуточного филамента, экспрессируемый несколькими стволовыми клетками, эндотелиальными предшественниками, присутствующими в мезонефральной мезенхиме и зрелых подоцитах.Они также совместно экспрессировали несколько маркеров эмбриональных стволовых клеток, таких как SSEA4, Nanog, Sox2 и Oct4; однако они были отрицательными для CD24. Интересно, что эти клетки дифференцировались в эпителиальные и нейральные фенотипы, показали интеграцию в развивающиеся канальцы и ассоциировались с эпителием кортикальных канальцев в совместных культурах и в экспериментах с 3D-культивированием коллагенового геля.

Недавно Линдгрен и его коллеги идентифицировали клетки-предшественники в проксимальных канальцах человека на основании активности альдегиддегидрогеназы. 21 Эти клетки были рассеяны по проксимальным канальцам и экспрессировали CD133, CD24 и виментин. Интересно, что некоторые из регенерирующих канальцев были выстланы по всей окружности CD133- и экспрессирующими виментин клетками. Это исследование также поддерживает CD133 как потенциальный маркер почечных стволовых клеток. 21

Клетки с медленным циклом.

Одной из особенностей, отличающих стволовые клетки от дифференцированных клеток, является редкое деление клеток. Эти клетки с медленным циклом могут быть идентифицированы с помощью импульсного и чейзового метода мечения.В этом методе клетки метят маркерами, которые включаются во время клеточного деления, после чего следует длительный период поиска, когда метка теряется из делящихся клеток и сохраняется в редко делящихся клетках. Поэтому редко делящиеся клетки часто называют клетками, сохраняющими метку (LRC). Наиболее часто используемые метки представляют собой слитый белок 5-бром-2-дезоксиуридин (BrdU) и гистона 2B-зеленого флуоресцентного белка (h3B-GFP). BrdU является экзогенно вводимым аналогом нуклеотида, в то время как экспрессию h3B-GFP можно включать и выключать с помощью индуцибельного трансгенного подхода.h3B-GFP предлагает несколько преимуществ по сравнению с BrdU: (1) BrdU является митогеном, который потенциально может повреждать ДНК стволовых клеток; (2) Маркировка с помощью BrdU основана на предположении, что стволовые клетки асимметрично разделяют ДНК, при этом более старая цепь сохраняется стволовыми клетками, а новая цепь передается дочерним клеткам. Напротив, мечение с помощью h3B-GFP не зависит от асимметричного разделения нитей ДНК во время клеточного деления; (3) BrdU может метить клетки только в фазе S клеточного цикла, тогда как маркировка с помощью h3B-GFP не зависит от клеточного цикла; (4) Мечение с помощью h3B-GFP является более чувствительным методом обнаружения клеток с медленным циклом, чем BrdU, а стабильность h3B-GFP допускает более длительный период вымывания, и (5) h3B-GFP не требует жесткой обработки для обнаружения и, следовательно, может использовать для сортировки живых клеток.

Несмотря на то, что это многообещающий метод, удержание метки имеет следующие ограничения при идентификации стволовых клеток: (1) Каждая ткань имеет различный период мечения и поиска в зависимости от времени цикла стволовых и зрелых клеток, присутствующих в ткани. (2) Пул стволовых клеток может быть неоднородным в органе, при этом одни стволовые клетки имеют более длительное время цикла, чем другие. (3) Время цикла стволовых клеток зависит от потребности тканей в новых клетках. Он короче в тканях с высоким клеточным оборотом, таких как костный мозг, кожа и кишечник, и зависит от возраста организма и потребности в регенерации тканей.(4) Эти методы маркировки не могут отличить терминально дифференцированные стареющие клетки, которые перестали делиться, от покоящихся стволовых клеток, которые ждут продолжения клеточного цикла. Хотя этот метод был успешно использован для идентификации стволовых клеток в коже, кишечнике и легких, никогда не было показано, что удерживание метки избирательно идентифицирует популяции стволовых клеток. В хорошо проведенном исследовании Киля и его коллег удержание BrdU имело низкую чувствительность и специфичность при идентификации гемопоэтических стволовых клеток (HSC). 22 В этом исследовании менее 6% HSC сохраняли BrdU, и менее 0,5% всех BrdU-сохраняющих гемопоэтических клеток были HSC.

Хотя сохранение этикетки имеет несколько ограничений, в почках имеется достаточно данных для дальнейшего использования этого метода идентификации стволовых клеток. Некоторые из наиболее многообещающих доказательств, подтверждающих стволовость LRC, присутствующих в почках, получены в работах Oliver и коллег, а также Maeshima и коллег. 23 26 Oliver et al. показали наличие LRC в сосочках взрослых мышей и почек крыс при введении BrdU в постнатальном периоде с последующим длительным периодом поиска. 25 Эти клетки присутствовали в канальцах и интерстиции. После ишемии LRC пролиферировали и перемещались из сосочка. Когда эти клетки вводили в кору, многие из них включались в почечную паренхиму. Более того, LRCs образовывали сферы, дифференцировались во множественные типы клеток и экспрессировали нестин, маркер стволовых клеток. В последующем хорошо проведенном исследовании Оливер и его коллеги показали наличие LRC в верхнем сосочке с использованием трансгенных мышей h3B-GFP. 23 Эти LRC пролиферировали, мигрировали и внедрялись в почечные канальцы после повреждения почек.

Одно из наиболее многообещающих исследований, подтверждающих стволовость LRC, было проведено Maeshima и его коллегами. Эти исследователи идентифицировали LRC в почках крыс, преимущественно в проксимальных канальцах, пометив их BrdU в течение семи дней, после чего следовал более короткий период в две недели. 26 Интересно, что после ишемического повреждения пролиферация происходила преимущественно в LRC, которые были израсходованы в процессе восстановления.Более того, во время регенерации эти LRC делятся асимметрично, что является кардинальной характеристикой стволовых клеток, при этом одна из дочерних клеток последовательно приобретает мезенхимальный, за которым следует эпителиальный фенотип, в то время как другая остается недифференцированной. В последующей статье из той же лаборатории исследователи показали переход LRC из эпителия в мезенхиму и их участие в фиброзной реакции после односторонней обструкции мочеточника у крыс. 27

Другие методы идентификации.

Транспортеры АТФ-связывающей кассеты (АВС) представляют собой АТФ-зависимые мембранные белки, которые преимущественно экспрессируются в органах выделения, таких как почки, печень, кишечник и поджелудочная железа. 28 Семейство ABC-транспортеров человека состоит из 49 членов. Хотя транспортеры ABC широко изучены, функции многих членов семейства до сих пор неизвестны. Наиболее признанной функцией транспортеров ABC является вытеснение токсичных соединений из клеток. 29 , 30 Два транспортера ABC, P-гликопротеин (P-gp) и белок устойчивости к раку молочной железы (BCRP), участвуют в регенерации тканей и связаны со стволовыми клетками.Поскольку стволовые клетки вытесняют Родамин 123 и краситель Hoescht 33,342 через транспортеры ABC, они занимают уникальное место на графике рассеивания сортировки клеток с помощью флуоресценции и называются клетками «боковой популяции» (SP). Экспрессия P-gp и BCRP жестко регулируется, и уровень экспрессии определяет дифференцировку клеток SP в зрелые клетки, а потеря экспрессии ABC приводит к дифференцировке клеток.

В 1996 году выделение гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) было выполнено путем идентификации клеток с низкой флуоресценцией после окрашивания красителем Hoechst 33,342. 31 В экспериментах по конкурентной репопуляции эти клетки SP способствовали длительному приживлению трансплантата после удаления костного мозга. 31 Впоследствии клетки SP были выделены из других тканей, таких как печень, скелетные мышцы и сердце, и были вовлечены в регенерацию тканей. 32 В отличие от печени, скелетных мышц и сердца роль SP-клеток почек в регенерации неоднозначна.

Клетки SP были выделены из почек взрослых мышей, крыс и людей. 33 36 Было показано, что эти клетки составляют примерно 0,03–0,1% клеток почек. 34 Выделенные клетки представляют собой смешанные клеточные популяции, содержащие клетки костномозгового и почечного происхождения, и, используя эти непрямые методы, исследователи продемонстрировали интерстициальную и канальцевую нишу для SP-клеток. 33 , 35 Несколько исследований показали благотворное влияние SP-клеток на животных моделях заболеваний почек, таких как адриамициновая нефропатия, 35 цис-платин-индуцированное ОПП33 и хроническое заболевание почек. 37 Преимущества этих моделей для почки, вероятно, были связаны с паракринными эффектами клеток SP, поскольку было продемонстрировано незначительное прямое включение клеток SP в регенерирующую почку.

Из нескольких других предполагаемых маркеров стволовых клеток почек Sall1 является наиболее многообещающим. Sall1 является мышиным ортологом специфичного для региона гомеотического гена дрозофилы, spalt (sal) , эволюционно консервативного семейства генов, которое играет важную роль в развитии органов у дрозофилы. 38 Существует четыре известных гомолога гена Sall у мышей (Sall1-4) и у людей (SALL1-4) . Белок Sall1 представляет собой фактор транскрипции цинковых пальцев C 2 H 2 с пятью кластерами цинковых пальцев, распределенными по длине белка; 39 Белок Sall1 действует как репрессор транскрипции, связываясь с комплексом гистондеацетилазы, обильно экспрессируется в развивающихся почках и играет критическую роль в нефрогенезе млекопитающих. 39 Sall1 является фактором транскрипции, необходимым для развития почек, и может играть роль в пролиферации стволовых клеток. 40

Мыши с гомозиготной нулевой мутацией Sall1 погибают в ближайшем постнатальном периоде с тяжелой дисгенезией почек, включая агенезию. 41 Считается, что адекватная экспрессия Sall1 имеет решающее значение для нефрогенеза посредством инвазии зачатка мочеточника в метанефральную мезенхиму. Работа Nishinakamura et al. продемонстрировала потенциал дифференцировки Sall1-экспрессирующих клеток, присутствующих в почках эмбрионов мышей.Одна идентифицированная клетка формировала колонии, содержащие несколько типов зрелых клеток почки, таких как тубулярные и гломерулярные эпителиальные клетки. У людей мутации в SALL1 приводят к синдрому Таунса-Брокса, аутосомно-доминантному (AD) заболеванию, характеризующемуся аномалиями лица и конечностей и ассоциированному с аномалиями почек и сердца. 41 В зависимости от типа мутации от 20 до 60% пациентов с синдромом Таунса-Брокса имеют агенезию почек, гипоплазию, дисплазию или мультикистозную болезнь.

В развивающейся метанефральной мезенхиме от 20 до 30% всех клеток экспрессируют Sall1. 41 Кроме того, мы идентифицировали Sall1-экспрессирующие клетки в проксимальных канальцах почек взрослых крыс (не опубликовано). После ишемически-реперфузионного повреждения 90% Sall1-экспрессирующих клеток, присутствующих в почках взрослых крыс, пролиферировали, а 5% Sall1-позитивных клеток демонстрировали асимметричное клеточное деление, при этом одна из двух соседних Sall1-позитивных клеток включала хлордезоксиуридин. КлдУ).

Вклад в регенерацию

Хотя окончательной связи между стволовыми клетками и регенерацией почек до сих пор нет, имеется достаточно данных, чтобы предположить роль стволовых клеток в регенерации почек. Соответственно, в этом разделе мы обобщили убедительные доказательства, подтверждающие роль стволовых клеток в регенерации почек.

Наиболее убедительным доказательством, подтверждающим роль стволовых клеток в регенерации почек, является демонстрация (1) образования новых нефронов (неонефрогенеза) во взрослом возрасте и (2) прогрессирования клеточной линии стволовых клеток до зрелого почечного фенотипа.В отличие от низших позвоночных, в почках взрослых млекопитающих окончательно не продемонстрировано образование новых нефронов. Хотя некоторые из ранних исследований продемонстрировали увеличение общего числа клубочков у кроликов после односторонней нефрэктомии в раннем постнатальном периоде, другие не воспроизвели эти результаты. 8 Однако, в отличие от неонефрогенеза во взрослой жизни, имеется достаточно доказательств, подтверждающих прогрессирование клеточной линии стволовых клеток до зрелого почечного фенотипа.Первые доказательства получены в работе Maeshima et al., которые продемонстрировали асимметричное клеточное деление LRCs после повреждения почек, при этом одна из дочерних клеток последовательно приобретала зрелый почечный фенотип, в то время как другая оставалась недифференцированной. 26 Другое свидетельство получено из демонстрации прогрессирования клеточной линии клеток CD133 + CD24 + PDX , присутствующих на мочевом полюсе капсулы Боумена, до фенотипа зрелых подоцитов во время их миграции к сосудистому полюсу. 17

Самый сильный аргумент против роли стволовых клеток в регенерации почек исходит из работы Хамфриса и его коллег. Эти исследователи показали, используя трансгенный подход, основанный на экспрессии Six2 , что большинство регенерирующих тубулярных клеток происходят из выживших зрелых тубулярных клеток, которые образовались во время эмбрионального развития. 3 Хотя данные Humphreys et al. исключают образование de novo новых тубулярных клеток, они не исключают роли популяции тубулярных стволовых клеток со зрелым фенотипом, экспрессирующим Six2 во время эмбриогенеза.Эти стволовые клетки-кандидаты, расположенные между промежутками в почечных канальцах, были идентифицированы с использованием различных методов, таких как удержание метки и экспрессия Oct4 и Sall1. 26 , 42 Таким образом, стволовые клетки по-прежнему остаются потенциальным источником клеток для регенерации почек и требуют дальнейшего изучения.

Регенерация почек и роль стволовых клеток

Abstract

Из-за своей сложности, высокой метаболической активности и выделительной функции почки особенно восприимчивы к острым ишемическим и токсин-опосредованным повреждениям.Современные методы лечения не способствуют регенерации почек, и растет интерес к новым методам лечения, основанным на клеточных источниках регенерации почек, таких как терапия стволовыми клетками. Наше понимание клеточных источников для регенерации почек и стволовых клеток, присутствующих во взрослой почке, резко изменилось за последние годы. Здесь мы обсуждаем текущее понимание почечных стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых млекопитающих, и их роль в регенерации почек. Мы также обобщили наилучшие имеющиеся данные, подтверждающие роль стволовых клеток в регенерации почек.

Ключевые слова: регенерация почек, стволовые клетки, клетки-предшественники

Введение

Заболевания почек достигли масштабов эпидемии и привели к значительной заболеваемости и смертности. Согласно Национальному исследованию здоровья и питания (NHANES), в период с 1999 по 2004 год примерно 11% населения США в возрасте 20 лет и старше страдали заболеваниями почек. 1 Из-за своей сложной структуры, быстрого метаболизма и воздействия продуктов жизнедеятельности и токсинов почки особенно подвержены острым повреждениям.В настоящее время пациентам с повреждением почек проводят диализ в ожидании спонтанной регенерации, которая часто бывает неполной. Пациентам с необратимым повреждением почек требуется пожизненный диализ или трансплантация. Эти методы лечения несут значительные расходы для системы здравоохранения. В 2007 году стоимость лечения ESRD составляла примерно 35 миллиардов долларов. 2

Поскольку ни один из современных методов лечения не способствует регенерации почек, исследователи активно изучают новые методы лечения острого повреждения почек (ОПП), основанные на клеточных механизмах регенерации, такие как терапия на основе стволовых клеток.Регенерация почек может происходить за счет пролиферации выживших зрелых клеток, стволовых клеток, присутствующих в почках, или за счет стволовых клеток внепочечного происхождения. Роль внепочечных клеток в регенерации почек, хотя первоначально считалась важной, в настоящее время убедительными исследованиями показано, что она незначительна. 3 5 Считается, что один из механизмов регенерации почек включает дифференцировку, пролиферацию и редифференцировку выживших зрелых клеток. 5 Понимание стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых, и их возможного вклада в регенерацию почек быстро развивалось.Здесь мы обсуждаем роль стволовых клеток в регенерации органов и текущее понимание стволовых клеток, присутствующих в почках взрослых млекопитающих.

Стволовые клетки и регенерация органов

Стволовые клетки представляют собой недифференцированные клетки, способные к самообновлению и дифференцировке. Стволовые клетки классифицируются как тотипотентные, плюрипотентные и мультипотентные в зависимости от их способности дифференцироваться в один или несколько типов зрелых клеток. Тотипотентные стволовые клетки могут давать как эмбриональные, так и внеэмбриональные клетки.Считается, что оплодотворенная яйцеклетка после первых нескольких клеточных делений является тотипотентной стволовой клеткой. 6 Напротив, плюрипотентные стволовые клетки могут образовывать клетки только эмбрионального, но не внеэмбрионального происхождения. Мультипотентные стволовые клетки могут продуцировать два или более зрелых типа клеток. 6 Термин «клетка-предшественник» часто используется в литературе по стволовым клеткам. В отличие от стволовых клеток клетки-предшественники обладают ограниченной способностью к самообновлению, и их потомство дает начало определенным типам зрелых клеток.Клетки-предшественники играют важную роль в регенерации тканей.

Способность к регенерации тканей различается у разных видов. Например, беспозвоночные, такие как планарии, могут полностью регенерировать из небольших сегментов тела. Напротив, низшие позвоночные обладают ограниченной регенеративной способностью и могут регенерировать только ампутированную часть тела в той или иной степени. Интересно, что эта способность к регенерации часто утрачивается на более поздних стадиях развития и во взрослой жизни. Примером этой переменной способности к регенерации являются головастики бесхвостых животных, которые могут регенерировать конечности только до метаморфоза, в то время как тритоны и аксолотли сохраняют способность к регенерации на протяжении всей личиночной и взрослой жизни. 7

Подобно конечностям, регенерация внутренних органов, таких как почки, у взрослых животных различна. Низшие животные, такие как хрящевые рыбы, могут образовывать новые нефроны после травмы, в то время как высшие животные просто демонстрируют компенсаторный рост оставшихся нефронов, а именно «регенеративную гипертрофию». 8 Способность образовывать новые нефроны после завершения нефрогенеза называется «неонефрогенезом». Пластиножаберные, такие как скаты и акулы, во взрослом возрасте демонстрируют неонефрогенез после частичной резекции почки. 9 Недавно в работе Diep et al. выявили неонефрогенез у взрослых рыбок данио. 10 В отличие от низших позвоночных млекопитающие обладают очень ограниченной регенеративной способностью почек. Постнатальная почка млекопитающих реагирует на частичную резекцию регенеративной гипертрофией без неонефрогенеза. 8 Однако у млекопитающих во внутриутробном периоде путем частичной нефрэктомии можно индуцировать образование новых нефронов. Например, число нефронов в контралатеральной почке увеличивается на 45% после односторонней нефрэктомии на 100-й день (срок 150 дней) беременности у нерожденной овцы. 11

Роль стволовых клеток лучше определена в органах с высоким клеточным оборотом, таких как костный мозг, кишечник и кожа. Однако их роль в органах с низким клеточным оборотом, таких как почки, плохо определена. Недавняя литература продемонстрировала способность почки к регенерации. Учитывая регенеративную способность взрослой почки, наличие стволовых клеток в эмбриональной почке, неонефрогенез во время пренатальной жизни у позвоночных и пре- и постнатальную жизнь у беспозвоночных, вполне вероятно, что почка взрослого млекопитающего имеет стволовые клетки, которые являются клеточными источниками регенерация почек.

Стволовые клетки почек

Исследователи использовали различные методы для идентификации стволовых клеток в почках взрослых. К ним относятся маркеры клеточной поверхности, экспрессируемые другими стволовыми клетками, удержание метки редко делящимися клетками, экспрессия факторов транскрипции, экспрессируемых во время нефрогенеза и экструзии флуоресцентных красителей, и условия культивирования клеток. Используя эти методы, потенциальные стволовые клетки были идентифицированы в капсуле Боумена, почечных канальцах и интерстиции почек взрослых млекопитающих.Несмотря на то, что было идентифицировано несколько многообещающих кандидатов в стволовые клетки почек и ниши, окончательные стволовые клетки взрослых почек и их идентификационные маркеры остаются неуловимыми.

Почка представляет собой сложный орган, который возникает в результате взаимодействия между двумя отдельными эмбриональными придатками и имеет более 24 различных зрелых клеток. Следовательно, почки взрослых млекопитающих, вероятно, имеют несколько стволовых клеток и ниш. Здесь мы обсудим некоторые из наиболее многообещающих кандидатов в стволовые клетки почек и доказательства, подтверждающие их роль в регенерации почек.Поскольку выделение стволовых клеток с использованием селективных условий культивирования имеет ряд ограничений, таких как заражение клетками крови и дедифференцировка зрелых клеток в условиях культивирования, мы не обсуждали этот метод в настоящем обзоре. Мы также не обсуждали роль экзогенного введения и паракринных эффектов стволовых клеток в регенерации почек.

CD133 (проминин-1).

CD133 представляет собой белок пентаспановой мембраны, присутствующий в выступах плазматической мембраны клеток.Эпитоп CD133 экспрессируется на нескольких стволовых клетках, таких как гемопоэтические, нейральные, эндотелиальные клетки-предшественники и раковые стволовые клетки. 12 Поскольку CD133 имеет несколько изоформ с экспрессией, зависящей от ткани и дифференцировки, зрелые клетки и стволовые клетки, вероятно, экспрессируют разные изоформы CD133. Это подтверждается идентификацией стволовых клеток моноклональными антителами только против эпитопов CD133/1 и CD133/2, а не другими антителами против CD133. 13 Почка имеет обильную экспрессию мРНК CD133, клетки 12 и CD133 + были идентифицированы в клубочках, канальцах и интерстиции взрослой почки.Хотя CD133 экспрессируется несколькими взрослыми стволовыми клетками, CD133 может быть недостаточно и могут потребоваться сопутствующие маркеры для идентификации стволовых клеток почек.

Убедительные доказательства в пользу CD133 как маркера почечных стволовых клеток получены в работе Сагринати и его коллег. Они показали наличие клеток CD133 + CD24 + PDX в мочевом полюсе капсулы Боумена. 14 PDX экспрессируется зрелыми подоцитами, тогда как CD24 экспрессируется в неофрогенной зоне развивающихся почек. 15 Эти клетки CD133 + CD24 + совместно экспрессировали факторы транскрипции стволовых клеток Oct4 и BmI-1 и были способны к самообновлению и дифференцировке в несколько линий в условиях культивирования. 14 Наиболее интересно, CD233 + CD24 + PDXCELLS, последовательно дифференцированные в CD133 + CD24 + PDX + и CD133 CD24 CD24 клетки PDX + , как они мигрировали из мочи к сосудистому полюсу капсулы Боумена. 16 , 17 Экзогенно введенные клетки CD133 + CD24 + PDX человека улучшали морфологическое и функциональное восстановление после острого повреждения почек (ОПП), вызванного рабдомиолизом, у мышей SCID. Кроме того, другие исследователи показали ускоренную дифференцировку CD133 + париетальных гломерулярных эпителиальных клеток в зрелые подоциты после потери подоцитов. 18 Способность стволовых клеток, присутствующих в мочевом полюсе капсулы Боумена, образовывать зрелые подоциты была показана несколькими исследователями с использованием различных методов идентификации, таких как иммуногистохимия, сохранение метки и трансгенный подход. 14

Bussolati и коллеги были одними из первых, кто идентифицировал стволовые клетки CD133 + в почках взрослого человека. С помощью иммуногистохимии авторы показали, что 1% интерстициальных клеток в корковом веществе почки человека представляют собой CD133/1 + . 19 В отличие от Sagrinati и коллег, они не обнаружили CD133 + клеток в клубочках. Это может быть результатом различий в исследованных образцах и методологии. Клетки CD133 + , присутствующие в почечном интерстиции, экспрессировали PAX-2 и не экспрессировали гемопоэтические маркеры.После выделения клетки CD133 + дифференцировались in vitro в эндотелий и эпителий и после субкапсулярной инъекции образовывали трубчатые структуры. Интересно, что после экзогенного введения в мышиную модель ОПП, вызванного рабдомиолизом, клетки CD133 + интегрировались в регенерирующие канальцы.

Ward и коллеги идентифицировали клетки CD133/1 + , интеркалированные между эпителиями в сосочковой части петли Генле. 20 Эти клетки совместно экспрессировали нестин, белок промежуточного филамента, экспрессируемый несколькими стволовыми клетками, эндотелиальными предшественниками, присутствующими в мезонефральной мезенхиме и зрелых подоцитах.Они также совместно экспрессировали несколько маркеров эмбриональных стволовых клеток, таких как SSEA4, Nanog, Sox2 и Oct4; однако они были отрицательными для CD24. Интересно, что эти клетки дифференцировались в эпителиальные и нейральные фенотипы, показали интеграцию в развивающиеся канальцы и ассоциировались с эпителием кортикальных канальцев в совместных культурах и в экспериментах с 3D-культивированием коллагенового геля.

Недавно Линдгрен и его коллеги идентифицировали клетки-предшественники в проксимальных канальцах человека на основании активности альдегиддегидрогеназы. 21 Эти клетки были рассеяны по проксимальным канальцам и экспрессировали CD133, CD24 и виментин. Интересно, что некоторые из регенерирующих канальцев были выстланы по всей окружности CD133- и экспрессирующими виментин клетками. Это исследование также поддерживает CD133 как потенциальный маркер почечных стволовых клеток. 21

Клетки с медленным циклом.

Одной из особенностей, отличающих стволовые клетки от дифференцированных клеток, является редкое деление клеток. Эти клетки с медленным циклом могут быть идентифицированы с помощью импульсного и чейзового метода мечения.В этом методе клетки метят маркерами, которые включаются во время клеточного деления, после чего следует длительный период поиска, когда метка теряется из делящихся клеток и сохраняется в редко делящихся клетках. Поэтому редко делящиеся клетки часто называют клетками, сохраняющими метку (LRC). Наиболее часто используемые метки представляют собой слитый белок 5-бром-2-дезоксиуридин (BrdU) и гистона 2B-зеленого флуоресцентного белка (h3B-GFP). BrdU является экзогенно вводимым аналогом нуклеотида, в то время как экспрессию h3B-GFP можно включать и выключать с помощью индуцибельного трансгенного подхода.h3B-GFP предлагает несколько преимуществ по сравнению с BrdU: (1) BrdU является митогеном, который потенциально может повреждать ДНК стволовых клеток; (2) Маркировка с помощью BrdU основана на предположении, что стволовые клетки асимметрично разделяют ДНК, при этом более старая цепь сохраняется стволовыми клетками, а новая цепь передается дочерним клеткам. Напротив, мечение с помощью h3B-GFP не зависит от асимметричного разделения нитей ДНК во время клеточного деления; (3) BrdU может метить клетки только в фазе S клеточного цикла, тогда как маркировка с помощью h3B-GFP не зависит от клеточного цикла; (4) Мечение с помощью h3B-GFP является более чувствительным методом обнаружения клеток с медленным циклом, чем BrdU, а стабильность h3B-GFP допускает более длительный период вымывания, и (5) h3B-GFP не требует жесткой обработки для обнаружения и, следовательно, может использовать для сортировки живых клеток.

Несмотря на то, что это многообещающий метод, удержание метки имеет следующие ограничения при идентификации стволовых клеток: (1) Каждая ткань имеет различный период мечения и поиска в зависимости от времени цикла стволовых и зрелых клеток, присутствующих в ткани. (2) Пул стволовых клеток может быть неоднородным в органе, при этом одни стволовые клетки имеют более длительное время цикла, чем другие. (3) Время цикла стволовых клеток зависит от потребности тканей в новых клетках. Он короче в тканях с высоким клеточным оборотом, таких как костный мозг, кожа и кишечник, и зависит от возраста организма и потребности в регенерации тканей.(4) Эти методы маркировки не могут отличить терминально дифференцированные стареющие клетки, которые перестали делиться, от покоящихся стволовых клеток, которые ждут продолжения клеточного цикла. Хотя этот метод был успешно использован для идентификации стволовых клеток в коже, кишечнике и легких, никогда не было показано, что удерживание метки избирательно идентифицирует популяции стволовых клеток. В хорошо проведенном исследовании Киля и его коллег удержание BrdU имело низкую чувствительность и специфичность при идентификации гемопоэтических стволовых клеток (HSC). 22 В этом исследовании менее 6% HSC сохраняли BrdU, и менее 0,5% всех BrdU-сохраняющих гемопоэтических клеток были HSC.

Хотя сохранение этикетки имеет несколько ограничений, в почках имеется достаточно данных для дальнейшего использования этого метода идентификации стволовых клеток. Некоторые из наиболее многообещающих доказательств, подтверждающих стволовость LRC, присутствующих в почках, получены в работах Oliver и коллег, а также Maeshima и коллег. 23 26 Oliver et al. показали наличие LRC в сосочках взрослых мышей и почек крыс при введении BrdU в постнатальном периоде с последующим длительным периодом поиска. 25 Эти клетки присутствовали в канальцах и интерстиции. После ишемии LRC пролиферировали и перемещались из сосочка. Когда эти клетки вводили в кору, многие из них включались в почечную паренхиму. Более того, LRCs образовывали сферы, дифференцировались во множественные типы клеток и экспрессировали нестин, маркер стволовых клеток. В последующем хорошо проведенном исследовании Оливер и его коллеги показали наличие LRC в верхнем сосочке с использованием трансгенных мышей h3B-GFP. 23 Эти LRC пролиферировали, мигрировали и внедрялись в почечные канальцы после повреждения почек.

Одно из наиболее многообещающих исследований, подтверждающих стволовость LRC, было проведено Maeshima и его коллегами. Эти исследователи идентифицировали LRC в почках крыс, преимущественно в проксимальных канальцах, пометив их BrdU в течение семи дней, после чего следовал более короткий период в две недели. 26 Интересно, что после ишемического повреждения пролиферация происходила преимущественно в LRC, которые были израсходованы в процессе восстановления.Более того, во время регенерации эти LRC делятся асимметрично, что является кардинальной характеристикой стволовых клеток, при этом одна из дочерних клеток последовательно приобретает мезенхимальный, за которым следует эпителиальный фенотип, в то время как другая остается недифференцированной. В последующей статье из той же лаборатории исследователи показали переход LRC из эпителия в мезенхиму и их участие в фиброзной реакции после односторонней обструкции мочеточника у крыс. 27

Другие методы идентификации.

Транспортеры АТФ-связывающей кассеты (АВС) представляют собой АТФ-зависимые мембранные белки, которые преимущественно экспрессируются в органах выделения, таких как почки, печень, кишечник и поджелудочная железа. 28 Семейство ABC-транспортеров человека состоит из 49 членов. Хотя транспортеры ABC широко изучены, функции многих членов семейства до сих пор неизвестны. Наиболее признанной функцией транспортеров ABC является вытеснение токсичных соединений из клеток. 29 , 30 Два транспортера ABC, P-гликопротеин (P-gp) и белок устойчивости к раку молочной железы (BCRP), участвуют в регенерации тканей и связаны со стволовыми клетками.Поскольку стволовые клетки вытесняют Родамин 123 и краситель Hoescht 33,342 через транспортеры ABC, они занимают уникальное место на графике рассеивания сортировки клеток с помощью флуоресценции и называются клетками «боковой популяции» (SP). Экспрессия P-gp и BCRP жестко регулируется, и уровень экспрессии определяет дифференцировку клеток SP в зрелые клетки, а потеря экспрессии ABC приводит к дифференцировке клеток.

В 1996 году выделение гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) было выполнено путем идентификации клеток с низкой флуоресценцией после окрашивания красителем Hoechst 33,342. 31 В экспериментах по конкурентной репопуляции эти клетки SP способствовали длительному приживлению трансплантата после удаления костного мозга. 31 Впоследствии клетки SP были выделены из других тканей, таких как печень, скелетные мышцы и сердце, и были вовлечены в регенерацию тканей. 32 В отличие от печени, скелетных мышц и сердца роль SP-клеток почек в регенерации неоднозначна.

Клетки SP были выделены из почек взрослых мышей, крыс и людей. 33 36 Было показано, что эти клетки составляют примерно 0,03–0,1% клеток почек. 34 Выделенные клетки представляют собой смешанные клеточные популяции, содержащие клетки костномозгового и почечного происхождения, и, используя эти непрямые методы, исследователи продемонстрировали интерстициальную и канальцевую нишу для SP-клеток. 33 , 35 Несколько исследований показали благотворное влияние SP-клеток на животных моделях заболеваний почек, таких как адриамициновая нефропатия, 35 цис-платин-индуцированное ОПП33 и хроническое заболевание почек. 37 Преимущества этих моделей для почки, вероятно, были связаны с паракринными эффектами клеток SP, поскольку было продемонстрировано незначительное прямое включение клеток SP в регенерирующую почку.

Из нескольких других предполагаемых маркеров стволовых клеток почек Sall1 является наиболее многообещающим. Sall1 является мышиным ортологом специфичного для региона гомеотического гена дрозофилы, spalt (sal) , эволюционно консервативного семейства генов, которое играет важную роль в развитии органов у дрозофилы. 38 Существует четыре известных гомолога гена Sall у мышей (Sall1-4) и у людей (SALL1-4) . Белок Sall1 представляет собой фактор транскрипции цинковых пальцев C 2 H 2 с пятью кластерами цинковых пальцев, распределенными по длине белка; 39 Белок Sall1 действует как репрессор транскрипции, связываясь с комплексом гистондеацетилазы, обильно экспрессируется в развивающихся почках и играет критическую роль в нефрогенезе млекопитающих. 39 Sall1 является фактором транскрипции, необходимым для развития почек, и может играть роль в пролиферации стволовых клеток. 40

Мыши с гомозиготной нулевой мутацией Sall1 погибают в ближайшем постнатальном периоде с тяжелой дисгенезией почек, включая агенезию. 41 Считается, что адекватная экспрессия Sall1 имеет решающее значение для нефрогенеза посредством инвазии зачатка мочеточника в метанефральную мезенхиму. Работа Nishinakamura et al. продемонстрировала потенциал дифференцировки Sall1-экспрессирующих клеток, присутствующих в почках эмбрионов мышей.Одна идентифицированная клетка формировала колонии, содержащие несколько типов зрелых клеток почки, таких как тубулярные и гломерулярные эпителиальные клетки. У людей мутации в SALL1 приводят к синдрому Таунса-Брокса, аутосомно-доминантному (AD) заболеванию, характеризующемуся аномалиями лица и конечностей и ассоциированному с аномалиями почек и сердца. 41 В зависимости от типа мутации от 20 до 60% пациентов с синдромом Таунса-Брокса имеют агенезию почек, гипоплазию, дисплазию или мультикистозную болезнь.

В развивающейся метанефральной мезенхиме от 20 до 30% всех клеток экспрессируют Sall1. 41 Кроме того, мы идентифицировали Sall1-экспрессирующие клетки в проксимальных канальцах почек взрослых крыс (не опубликовано). После ишемически-реперфузионного повреждения 90% Sall1-экспрессирующих клеток, присутствующих в почках взрослых крыс, пролиферировали, а 5% Sall1-позитивных клеток демонстрировали асимметричное клеточное деление, при этом одна из двух соседних Sall1-позитивных клеток включала хлордезоксиуридин. КлдУ).

Вклад в регенерацию

Хотя окончательной связи между стволовыми клетками и регенерацией почек до сих пор нет, имеется достаточно данных, чтобы предположить роль стволовых клеток в регенерации почек. Соответственно, в этом разделе мы обобщили убедительные доказательства, подтверждающие роль стволовых клеток в регенерации почек.

Наиболее убедительным доказательством, подтверждающим роль стволовых клеток в регенерации почек, является демонстрация (1) образования новых нефронов (неонефрогенеза) во взрослом возрасте и (2) прогрессирования клеточной линии стволовых клеток до зрелого почечного фенотипа.В отличие от низших позвоночных, в почках взрослых млекопитающих окончательно не продемонстрировано образование новых нефронов. Хотя некоторые из ранних исследований продемонстрировали увеличение общего числа клубочков у кроликов после односторонней нефрэктомии в раннем постнатальном периоде, другие не воспроизвели эти результаты. 8 Однако, в отличие от неонефрогенеза во взрослой жизни, имеется достаточно доказательств, подтверждающих прогрессирование клеточной линии стволовых клеток до зрелого почечного фенотипа.Первые доказательства получены в работе Maeshima et al., которые продемонстрировали асимметричное клеточное деление LRCs после повреждения почек, при этом одна из дочерних клеток последовательно приобретала зрелый почечный фенотип, в то время как другая оставалась недифференцированной. 26 Другое свидетельство получено из демонстрации прогрессирования клеточной линии клеток CD133 + CD24 + PDX , присутствующих на мочевом полюсе капсулы Боумена, до фенотипа зрелых подоцитов во время их миграции к сосудистому полюсу. 17

Самый сильный аргумент против роли стволовых клеток в регенерации почек исходит из работы Хамфриса и его коллег. Эти исследователи показали, используя трансгенный подход, основанный на экспрессии Six2 , что большинство регенерирующих тубулярных клеток происходят из выживших зрелых тубулярных клеток, которые образовались во время эмбрионального развития. 3 Хотя данные Humphreys et al. исключают образование de novo новых тубулярных клеток, они не исключают роли популяции тубулярных стволовых клеток со зрелым фенотипом, экспрессирующим Six2 во время эмбриогенеза.Эти стволовые клетки-кандидаты, расположенные между промежутками в почечных канальцах, были идентифицированы с использованием различных методов, таких как удержание метки и экспрессия Oct4 и Sall1. 26 , 42 Таким образом, стволовые клетки по-прежнему остаются потенциальным источником клеток для регенерации почек и требуют дальнейшего изучения.

Регенерация почек с помощью стволовых клеток: обзор — Полный текст — Экспериментальная нефрология Nephron 2014, Vol. 126, No. 2

Справочная информация: Регенерации почек в настоящее время уделяется значительное внимание вместо почечного диализа как конечной терапевтической стратегии при почечной недостаточности.Однако из-за анатомических осложнений считается, что почки труднее всего регенерировать. Такой сложный орган практически невозможно представить полностью перестроенным de novo из стволовых клеток. Тем не менее, несколько исследовательских групп пытаются решить эту сложную задачу. Резюме: Существует 4 основных стратегии регенерации почек de novo из стволовых клеток. Эти стратегии включают использование: (i) децеллюляризованного трупного каркаса, (ii) декомплементации бластоцисты, (iii) нефрогенной ниши для выращивания ксеноэмбиро и (iv) потенциала самосборки.Все эти стратегии могут быть применимы в клинических условиях, но, по-видимому, требуется значительный подготовительный период. Ключевые сообщения: Несмотря на то, что в области регенерации почек остается много нерешенных проблем, включая этические вопросы и формирование химерных структур, испытания дают надежду диализным пациентам, и ожидается, что регенерация почек станет реальностью в будущем.

© 2014 S. Karger AG, Базель

Введение

Почка сохраняет способность к регенерации, если повреждение не слишком серьезное и структура почки остается неповрежденной.Однако в случаях необратимого повреждения почки, как это может произойти при длительном диализе, свойство самовосстановления полностью утрачивается. Следовательно, любое применение регенеративной медицины у диализных пациентов потребует развития de novo целостной функциональной почки.

Что касается функциональной целой почки, Chan et al. [1] сообщили о первой попытке разработать целостную функциональную почечную единицу путем формирования трансплантируемого пронефроса из анимальных шапочек у Xenopus . Трансплантация этой пронефросоподобной единицы, по крайней мере, частично устраняла отек у головастиков, подвергшихся двусторонней нефрэктомии, и они выживали до 1 месяца.Насколько нам известно, это исследование является единственным, в котором впервые была разработана трансплантируемая функциональная единица почки. Однако структура пронефроса, сформированная в этом исследовании, была слишком примитивной для любого клинического применения у людей. С тех пор во всем мире было предпринято много попыток регенерировать целые почки de novo (применимо у млекопитающих) из стволовых клеток.

Полная реконструкция почки с использованием децеллюляризованного трупного каркаса

Сообщалось, что децеллюляризованные трупные каркасы могут обеспечить нишу для стволовых клеток, позволяющих дифференцироваться в целые органы.Эта стратегия использовалась Ott et al. [2], чтобы успешно разработать функциональное искусственное сердце крысы. Каркас всего сердца с интактной трехмерной (3D) геометрией и сосудистой сетью был создан путем коронарной перфузии с детергентами в трупное сердце с последующей репопуляцией неонатальными сердечными клетками или эндотелиальными клетками аорты крысы [2]. Инъецированные неонатальные сердечные клетки формировали сократительный миокард, выполнявший ударную функцию. Эта стратегия также использовалась для разработки трансплантируемых печени и легких с использованием зрелых гепатоцитов и альвеолярных эпителиальных клеток соответственно [3,4].Было предпринято несколько попыток использовать этот метод для регенерации почек. Эти попытки показали, что введенные плюрипотентные стволовые клетки были локализованы в сосудистой сети и клубочках с последующей миграцией в канальцы, но было трудно приобрести почечную функцию [5,6]. Однако недавно та же группа, которая успешно использовала описанный выше метод для создания сердца и легких, сообщила об успешной регенерации целой почки, которая может продуцировать мочу после трансплантации [7]. Примечательно, что они использовали высокодифференцированные эндотелиальные клетки пупочной вены человека вместо плюрипотентных стволовых клеток, а использование только каркаса избирательно предоставило им нишу для дифференцированного отведения резидентных клеток почек и сосудов в нужную область.Хотя неясно, как введенные клетки дифференцируются и организуются в нефроны с сосудистой сетью для производства мочи, этот метод может быть решением проблемы нехватки донорских органов.

Комплементация бластоцисты

Инъекция нормальных эмбриональных стволовых (ЭС) клеток в бластоцисты мышей с дефицитом активирующего рекомбинацию гена 2, у которых нет зрелых В- или Т-лимфоцитов, создает соматические химеры со зрелыми В- и Т-клетками, происходящими из ЭС клеток [8]. Эта система «комплементации бластоцисты» недавно была применена для реконструкции всего органа.Кобаяши и др. [9] недавно сообщили об успешной регенерации поджелудочной железы крысы у мыши с помощью межвидовой инъекции бластоцисты индуцированных плюрипотентных стволовых (iPS) клеток. Они вводили iPS-клетки крысы в ​​бластоцисты Pdx-1-/- (панкреатогенеза) мыши и обнаружили, что новорожденные химеры крысы и мыши обрабатывали поджелудочную железу, почти полностью полученную из iPS. Этот успех доказывает, что, когда для органа предоставляется пустая онтогенетическая ниша, клеточное потомство, происходящее из iPS-клеток, может занимать эту нишу и компенсировать в процессе развития отсутствующее содержимое ниши.Это формирует сложный орган, состоящий почти полностью из клеток, полученных из донорских iPS-клеток, даже если комплементация бластоцитов включает разные виды. Эта исследовательская группа недавно создала Pdx-1-/- свинью, и с помощью этой техники удалось создать поджелудочную железу большего размера [8]. Эти успешные результаты показывают, что органы человеческого масштаба теоретически могут быть созданы de novo.

Этот метод был недавно применен для реконструкции всей почки [10]. После инъекции iPS-клеток мыши в бластоцисты Sall1-нулевых мышей, у которых отсутствуют обе почки, большая часть метанефролей состояла из дифференцированных клеток, происходящих из iPS-клеток.Тем не менее, они не смогли получить младенца в животноводстве после этой манипуляции по неизвестной причине [11], что позволяет предположить, что в этой системе регенерации почек необходимо решить еще одну проблему. Однако эти находки убедительно свидетельствуют о том, что комплементация бластоцисты является наиболее многообещающей стратегией регенерации почки. В настоящее время эти системы недоступны для клинического использования, поскольку невозможно создать сосудистую и нервную системы. Кроме того, остаются нерешенными важные этические вопросы манипуляций с бластоцистами с иПС-клетками [12,13].Тем не менее, этот успех подчеркивает обоснование того, что возможное клиническое применение регенерации почки должно зависеть от программирования развития.

Использование нефрогенной ниши для выращивания ксеноэмбрионов (метод органогенной ниши)

Была предпринята попытка регенерации целой функциональной почки с использованием развивающегося гетерозойного эмбриона в качестве «фабрики органов». Это основано на концепции «заимствования» программы развития растущего ксеноэмбриона путем применения стволовых клеток в нише органогенеза.Во время развития метанефроса метанефрическая мезенхима первоначально формируется из каудальной части нефрогенного тяжа и секретирует нейротрофический фактор глиальной клеточной линии (GDNF). Этот процесс побуждает близлежащий вольфов проток к образованию зачатка мочеточника. После этого процесса исследователи микроинъецировали GDNF-экспрессирующие мезенхимальные стволовые клетки человека (hMSC) в место почкования [14]. Эмбрион-реципиент выращивали в системе культивирования целых эмбрионов, а сформированный метанефрос развивали в культуре органов.Безвирусные манипуляции также можно проводить с использованием термообратимого полимера GDNF [15]. В результате донорские чМСК интегрировались в рудиментарный метанефрос и морфологически дифференцировались в эпителиальные клетки канальцев, интерстициальные клетки и клетки гломерулярного эпителия [14]. Затем исследователи пересадили развитый метанефрос в сальник, чтобы обеспечить интеграцию сосудов реципиента с образованием функционального нефрона. В результате была создана «неопочка», полученная из чМСК, которая содержала человеческий нефрон и сосудистую сеть хозяина [16].Кроме того, неопочки продуцировали мочу, которая показала более высокие концентрации азота мочевины и креатинина, чем сыворотка реципиента. Это открытие свидетельствует о том, что неопочка, развившаяся в сальнике, способна производить мочу путем фильтрации крови реципиента [16]. Кроме того, неопочки, полученные из чМСК, секретировали человеческий эритропоэтин, и его продукция стимулировалась индукцией анемии у животного-хозяина [17]. Это открытие показало, что эта система сохраняет нормальную физиологическую регуляцию уровней эритропоэтина.Однако существующая система не может реконструировать производные зачатка мочеточника. Следовательно, чтобы определить, могут ли МСК дифференцироваться в предшественник зачатка мочеточника с использованием куриных эмбрионов, hMSC, экспрессирующие Pax2, вводили в область предшественника зачатка мочеточника цыпленка [18]. В результате они мигрировали каудально вместе с удлиняющимся вольфовым протоком и интегрировались в эпителий вольфова протока, а затем экспрессировали LIM1. Это открытие показало, что они могут дифференцироваться в клетки вольфова протока под влиянием локальных ксеносигналов [18].Эти результаты позволяют предположить, что целая почка может быть перестроена путем трансплантации hMSCs в подходящее время и в подходящее место для регенерации производных метанефральной мезенхимы и зачатка мочеточника.

Основываясь на наших успешных результатах, мы в настоящее время изучаем возможность проведения экспериментов на более крупных животных (то есть на свиньях), поскольку свиная почка имеет почти такой же объем, как и человеческая почка. Окончательный размер развитого метанефроса, по-видимому, запечатлевается на ранних стадиях развития эмбриона-хозяина.Эта возможность подтверждается тем фактом, что метанефросы более крупных животных, трансплантированные в сальник более мелких хозяев, развиваются в органы большего объема (диаметра и веса) по сравнению с нормальной почкой хозяина [19]. Будем надеяться, что эта система будет способствовать развитию более крупных органов, более подходящих для использования у людей (рис. 1).

Рис. 1

Блок-схема методов комплементации бластоцисты и органогенных ниш.

Потенциал самосборки стволовых клеток

Некоторые исследователи предположили, что плюрипотентные стволовые клетки могут дифференцироваться в зрелые клетки и самособираться в ткани или органы, и они провели исследования с использованием плюрипотентных стволовых клеток для образования зрелых клеток в витро.Продемонстрировано автономное формирование 3D-ткани, аналогичной структурам аденогипофиза [20], зрительного колпачка [21] и ткани кишечника [22] с использованием системы культивирования 3D-ЭС клеток из ЭС клеток. Этот подход может существенно снизить сложность органогенеза для терапевтической регенерации. Чтобы регенерировать почечные клетки с использованием такого подхода, ES или iPS клетки должны дифференцироваться сначала в промежуточную мезодерму, а затем в почечные предшественники, за которыми следуют несколько типов почечных клеток.Что касается регенерации почек, Osafune et al. [23] продемонстрировали, что одна мультипотентная клетка-предшественник из почки эмбриона мыши, которая в высокой степени экспрессирует Sall1, может дифференцироваться в несколько типов почечных клеток, включая гломерулярные подоциты и эпителий почечных канальцев, и в конечном итоге реконструировать трехмерную структуру почки. В другом недавнем исследовании сообщалось о реагрегации суспензий одиночных клеток эмбриональной почки с образованием органотипических почечных структур [24]. Во время развития почка происходит из промежуточной мезодермы, одного из ранних зародышевых листков.Промежуточные клетки мезодермы затем дифференцируются в почечные предшественники, за которыми следуют несколько типов почечных клеток. Следовательно, если ES или iPS клетки могут сначала дифференцироваться в промежуточную мезодерму, а затем в почечные предшественники, возможно, что все типы почечных клеток могут быть получены с использованием плюрипотентных стволовых клеток. Осафунэ и др. [23] разработали методы дифференцировки ИПСК человека в промежуточные клетки мезодермы с использованием комбинированной обработки факторами роста [25]. Эти клетки экспрессируют маркерные гены промежуточной мезодермы и могут созревать во множественные типы клеток, включая обнаруженные в производных промежуточной мезодермы органах, таких как почки, гонады и кора надпочечников.Эти исследования показывают, что если эти промежуточные клетки мезодермы могут дифференцироваться в почечные клетки-предшественники, то трехмерная структура почки может быть сконструирована из плюрипотентных стволовых клеток. Способы успешной регенерации функциональной сосудистой системы между регенерированной почкой и реципиентом остаются неизвестными. Кроме того, функция регенерированной почки in vivo неясна. Тем не менее, дальнейшие достижения в области биологии развития могут решить эти проблемы и обеспечить регенерацию целой почки in vitro.

Заключение

В этой статье обобщаются последние исследования по использованию стволовых клеток для регенерации функционально целой почки de novo. Несмотря на многие биологические и технические достижения в области регенерации почек, реконструкция полностью функциональной почки остается недостижимой, и многие проблемы до сих пор не решены. Использование гетерологичных тканей, таких как ксенометанефроиды и ксенобластоцисты, поднимает этические проблемы, в то время как методы надежной дифференциации ЭСК/ИПСК в почки in vitro полностью не установлены.Методы обеспечения функции регенерированной почечной ткани по выработке мочи и эритропоэтина еще нуждаются в разработке. Тем не менее, мы надеемся, что продолжающиеся усилия в области стволовых клеток и биологии развития решат эти проблемы, что приведет к разработке новых стратегий лечения для восстановления целой почки с адекватной почечной функцией. Мы верим, что такие усилия увенчаются успехом, и в будущем можно будет регенерировать функциональную почку.

Авторское право: Все права защищены.Никакая часть данной публикации не может быть переведена на другие языки, воспроизведена или использована в любой форме и любыми средствами, электронными или механическими, включая фотокопирование, запись, микрокопирование или любую систему хранения и поиска информации, без письменного разрешения издателя. .
Дозировка препарата: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор препарата и дозировка, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Тем не менее, в связи с продолжающимися исследованиями, изменениями в правительственных постановлениях и постоянным потоком информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на лекарства, читателю настоятельно рекомендуется проверять вкладыш в упаковке для каждого лекарства на предмет любых изменений в показаниях и дозировке, а также для дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендуемый агент является новым и/или редко используемым лекарственным средством.
Отказ от ответственности: заявления, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и участникам, а не издателям и редакторам.Появление рекламы и/или ссылок на продукты в публикации не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор(ы) отказываются от ответственности за любой ущерб, нанесенный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в содержании или рекламе.

Преодоление проблем органоидов почек для регенеративной медицины

Благодаря впечатляющему прогрессу, достигнутому в направлении дифференцировки hPSCs к почечным конечным точкам, заместительная терапия для регенеративной медицины может стать реальностью.Это удовлетворит острую потребность в альтернативном лечении, поскольку в настоящее время диализ связан с высокой заболеваемостью, а трансплантация почки сталкивается с нехваткой донорских трансплантатов. Но прежде чем почечные органоиды будут пригодны для заместительной терапии, необходимо решить ряд проблем (рис. 3). Благодаря сочетанию наших растущих знаний в области клеточной биологии и внедрению технологий из дисциплины тканевой инженерии мы предполагаем, что эти проблемы могут быть преодолены.

Рис.3: Проблемы почечных органоидов, с которыми сегодня сталкиваются в области регенеративной медицины.

В настоящее время наблюдается отсутствие полного созревания, хорошо развитая васкуляризация и ограничение масштабируемости и воспроизводимости. Кроме того, имеется не почечная нецелевая популяция. Эти ограничения необходимо устранить, прежде чем почечные органоиды можно будет успешно применять в качестве заместительной терапии у пациентов с заболеваниями почек.

Сокращение нецелевых популяций

Транскриптомика одиночных клеток почечных органоидов, полученная по двум установленным протоколам, выявила, что до 20% клеточной популяции являются непочечными 22,23 .Эти нецелевые клетки включают популяции нейронов, мышц и клеток меланомы, распространенность которых увеличивается, когда органоидные культуры стареют и замещают популяции почечных клеток. Более ранние исследования также сообщали о наличии фиброзных участков и появлении хрящей 7,24 . Генерация этих нецелевых популяций может быть объяснена тем, как эти протоколы направляют незафиксированные мезодермальные клетки к специфическим клеточным судьбам. Применяя только одну направленную метку, которая представляет собой мезодермальный паттерн примитивной полоски, разнообразие мезодермальных конечных точек очень вероятно 25 .Наличие этих различных конечных точек было оценено по количеству и распределению различных типов клеток в органоидах почек при использовании различных протоколов. Понимание наследственных отношений и взаимосвязанности сигнальных сетей во время дифференциации необходимо для внесения значительных улучшений в текущие протоколы. Анализ факторов транскрипции и сигнальных сетей до и после каждой точки ветвления позволит нам лучше контролировать судьбу органоидных клеток. Помимо понимания биохимических сигналов, также важно лучше понять взаимодействие клеток и внеклеточного матрикса (ECM) для дальнейшего создания пространственной организации.Ясно, что необходимо контролировать самоорганизацию, чтобы улучшить специфичность популяций почечных клеток в современных культурах почечных органоидов.

Несмотря на то, что самоорганизация является основной движущей силой эмбриогенеза, оказывается сложной задачей для реализации в органоидном поле 26 . Включение некоторых инновационных инструментов, доступных в настоящее время для предоставления ячейкам конкретных управляющих сигналов для управления их организацией, может улучшить это. Например, судьбой клеток и образованием органоидов можно управлять с помощью синтетических гидрогелей, способных модулировать ключевые параметры 27 .Эти сигналы двояки: они биохимические и биофизические. Включение гидрогеля с направляющими молекулами, основанное на знаниях клеточной биологии, или путем изменения его жесткости или способности к деградации, может обеспечить более направленный контроль над самоорганизацией органоидов 27 . Например, использование мягких гидрогелей для дифференцировки hPSCs в почечные предшественники оказалось значительным улучшением протокола 16 . Дальнейшая тонкая настройка органоидного микроокружения путем применения физических сигналов привела к образованию более крупных канальцев 28 .Кроме того, синтетические гидрогели обладают способностью контролируемо высвобождать терапевтические агенты, такие как низкомолекулярные и макромолекулярные препараты 29 . Формируя физическое взаимодействие с полимером, можно определить время и место высвобождения путем настройки его физических свойств, таких как биоразлагаемость, или с помощью гидрогелей, которые реагируют на клеточные сигналы 29 . Ожидается, что благодаря более глубокому пониманию физических и химических свойств материалов и лучшему пониманию этиологии нецелевых популяций в ближайшие годы в этой области будет полезно использование биоматериалов для контроля судьбы клеток.

Содействие созреванию и васкуляризации

При существующих протоколах получения органоидов почек in vitro, основанных на имитации эмбриогенеза человека, неудивительно, что полученные структуры являются моделями развивающейся почки, а не зрелого органа. Например, ни один почечный органоид на сегодняшний день не показывает установленный эпителий мочеточника или открытую сосудистую сеть. Для регенеративной медицины получение зрелого органоида будет иметь решающее значение для достижения васкуляризации и минимизации вероятности нежелательных процессов дифференцировки после трансплантации и для функции ткани.

Глобальное профилирование экспрессии органоидов выявило наибольшее сходство с человеческими почками первого и второго триместра 5,16 . Дополнительным подтверждением этого открытия стала недавняя работа, которая показала транскрипционное перекрытие между органоидами и почками плода человека для ключевых маркеров нефронов, эндотелиальных и стромальных клеток 22 . Интересно, что транскрипционная изменчивость, оцененная между экспериментальными партиями, особенно наблюдалась в генах, обычно экспрессируемых в более старых органоидах 30 .Это может указывать на то, что отсутствие созревания связано с различиями в профилях экспрессии генов различных клеточных популяций.

Функциональные почки зависят от регулируемого снабжения и утилизации биомолекул и нуждаются в постоянной фильтрации крови для поддержания гомеостаза жидкости в организме. Это зависит от высокоразвитой сосудистой сети, окружающей тубулярные компартменты и перфузирующей клубочки кровеносными капиллярами. Иммуногистохимия и профилирование экспрессии генов сделали очевидным, что генерируемые в настоящее время почечные органоиды не способны воспроизводить сосудистую сеть 5 .Это в первую очередь вызвано отсутствием установленной популяции эндотелиальных клеток и вспомогательных сигналов, направляющих и поддерживающих их в сложной тканевой структуре. Недавние исследования одиночных клеток показали, что органоиды, генерируемые Takasato и Morizane, содержат только от 0,1 до 0,2% эндотелиальных клеток 23 . Органоиды, полученные с помощью протокола Takasato, продуцировали эндогенный VEGF, вероятно, не из небольшого количества эндотелиальных клеток, поскольку известно, что подоциты являются основными производителями этого цитокина 31,32 .Трансплантация под почечную капсулу мыши привела к значительному улучшению гломерулярных и канальцевых структур и образованию эндотелиальных сетей 33 . Это указывает на то, что по крайней мере часть сосудистой сети хозяина соединяется с органоидом, чтобы присоединиться к резидентным эндотелиальным предшественникам. Bantounas и коллеги применили аналогичный подход, подкожно имплантировав почечные предшественники мышам с ослабленным иммунитетом 24 . В соответствии с van den Berg и коллегами, это приживление показало признаки васкуляризации от хозяина и улучшенное созревание гломерулярных структур 24 .Совсем недавно был разработан другой метод трансплантации с использованием куриной хориоаллантоисной мембраны. Его мягкая микросреда поддерживала рост органоидов и способствовала образованию сосудистого компонента 16 . Хотя обеспечение органоидов кровообращением хозяина способствует созреванию, имплантаты по-прежнему напоминают человеческие почки первого и второго триместра 31 . Это подразумевает, что васкуляризация имеет решающее значение, но недостаточно для стимуляции созревания органоидов. Зависимость от животных-хозяев для улучшения васкуляризации и созревания органоидов ограничивает как масштабируемость, так и потенциал для терапевтического применения.Чтобы противодействовать этим недостаткам, существует очевидная необходимость васкуляризации in vitro, по крайней мере, частично.

Первый скачок вперед был достигнут благодаря использованию микрофлюидики для создания потока над верхней поверхностью почечных органоидов. Путем оптимизации условий потока пул эндотелиальных предшественников был расширен, и были созданы сосудистые сети, содержащие просветы 34 . Более сложный микрожидкостный подход основан на формировании искусственных капиллярных сетей в биоматериалах и гидрогелях.Такие каналы могут быть покрыты эндотелиальными клетками, образуя васкуляризированные сети, способные снабжать кислородом и питательными веществами 35 . Гидрогели привлекают все больше внимания для создания микрожидкостных каналов, поскольку они обладают важными преимуществами, такими как свойства, подобные внеклеточному матриксу, повышенная биосовместимость и свободная диффузия малых молекул 36 . Несмотря на недавние достижения, микрожидкостные подходы все еще сталкиваются с ограничениями, чтобы точно имитировать физиологические округлые сосуды и создавать достаточно маленькие каналы 37,38 .Объединение знаний, полученных в исследованиях трансплантации in vivo, с микрофлюидикой будет необходимо, чтобы проложить путь к созданию васкуляризированных органоидов.

В свете этих ограничений многообещающей альтернативой может стать 3D-биопечать биоинженерной почки. Было показано, что печать небольших округлых каналов с высокой пространственной гибкостью возможна для создания преваскуляризированных тканевых конструкций 39,40 . Но однажды представленный как очень многообещающий метод, его полный потенциал так и не был полностью реализован.Это может быть объяснено суровыми условиями, которым подвергаются отдельные клетки во время печати, ограничениями печатаемых размеров и отсутствием в настоящее время печатаемых матриц, которые удовлетворительно отражают биофизические и биохимические условия.

Хотя микрофлюидика и трехмерная биопечать требуют дополнительной доработки, они кажутся многообещающими стратегиями для достижения васкуляризации тканей, что, возможно, является одной из самых больших проблем в регенеративной медицине на данный момент. Однажды установившись в почечных органоидах, васкуляризация, несомненно, улучшит структурное созревание всего органоида, тем самым открывая новые возможности для регенерации почек.

Повышение воспроизводимости и масштабирование

Человеческое тело зависит от пары почек, каждая из которых содержит в среднем от 900 000 до миллиона нефронов, для фильтрации уремических токсинов и поддержания гомеостаза жидкости в организме 41 . В зависимости от возраста и состояния здоровья это число может варьироваться, но большая часть вариаций определяется развитием. То же самое верно и для размера почки, который может варьироваться от 134 до 146 см 3 ` 25 . Значения этих параметров, полученные из выращенных в настоящее время почечных структур, на несколько величин меньше.В настоящее время почечные органоиды, созданные по протоколу Такасато, имеют диаметр ~ 7 мм и содержат 50–100 нефронов. Существует также вероятность того, что они различаются по клеточному составу из-за нецелевых популяций. До сих пор это формирование паттерна не контролируется и варьируется между партиями органоидов и донорскими hPSC. Эта ограниченная масштабируемость и плохая воспроизводимость представляют собой критические проблемы, которые необходимо решить, прежде чем почечные органоиды смогут выполнить свое назначение в регенеративной медицине.

В первой попытке решить некоторые из этих проблем Чернецки и его коллеги разработали высокопроизводительную платформу для создания органоидов почек человека.Все этапы работы с жидкостями протокола Freedman выполнялись автоматически на роботизированной платформе, совместимой с 96- и 384-луночными планшетами. Эта система с микролунками, первоначально использовавшаяся для культивирования, также совместима с анализом изображений с высоким содержанием для тщательного наблюдения за поколением органоидов 42 . Точно так же Хиггинс и его коллеги использовали 3D-биопринтер для создания хорошо воспроизводимых органоидов, подходящих для скрининга соединений с высоким содержанием 43 . Два других недавних подхода к высококлассным органоидным культурам появились благодаря недавно разработанному биореактору и созданию микроорганоидов на встряхиваемой культуральной платформе 44,45 .Хотя не каждый органоидный протокол подходит для суспензионных культур, он предлагает большой потенциал для выращивания органоидов в больших количествах и снижает затраты на культивирование. Увеличение производства органоидов из ограниченного исходного материала требует тщательного мониторинга накопления мутаций во время клеточной экспансии. Наряду с необходимостью контроля терминальной дифференциации некоторые важные темы для обсуждения остаются без внимания.

Стволовые клетки: потенциальный вариант лечения заболеваний почек | Исследования и терапия стволовых клеток

  • Jager KJ, Fraser SDS.Восходящее место хронической болезни почек в исследовании глобального бремени болезней. Трансплантация нефролового циферблата. 2017;32:ii121–8.

    ПабМед Google ученый

  • Леви А.С., Кореш Дж. Хроническая болезнь почек. Ланцет (Лондон, Англия). 2012; 379: 165–80.

    Google ученый

  • Couser WG, Remuzzi G, Mendis S, Tonelli M. Вклад хронической болезни почек в глобальное бремя основных неинфекционных заболеваний.почки инт. 2011;80:1258–70.

    ПабМед Google ученый

  • Абекассис М., Бартлетт С.Т., Коллинз А.Дж., Дэвис К.Л., Дельмонико Ф.Л., Фридевальд Д.Дж., Хейс Р., Ховард А., Джонс Э., Лейхтман А.Б., Мерион Р.М., Мецгер Р.А., Прадель Ф., Швейцер Э.Дж., Велес Р.Л., Гастон РС. Трансплантация почки как первичная терапия терминальной стадии почечной недостаточности: конференция Национального почечного фонда/Инициативы по качеству результатов заболеваний почек (NKF/KDOQITM). Clin J Am Soc Нефрол.2008; 3: 471–80.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Вулф Р.А., Эшби В.Б., Милфорд Э.Л., Оджо А.О., Эттенгер Р.Е., Агодоа Л.И., Хелд П.Дж., Порт Ф.К. Сравнение смертности у всех пациентов на диализе, пациентов на диализе, ожидающих трансплантации, и реципиентов первого трупного трансплантата. N Engl J Med. 1999; 341:1725–30.

    КАС пабмед Google ученый

  • Илич Д., Огилви К.Краткий обзор: эмбриональные стволовые клетки человека — что мы сделали? Что мы делаем? куда мы идем? Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2017;35:17–25.

    КАС Google ученый

  • Уччелли А., Моретта Л., Пистойя В. Мезенхимальные стволовые клетки в норме и при патологии. Нат Рев Иммунол. 2008; 8: 726–36.

    КАС пабмед Google ученый

  • Эррера М.Б., Буссолати Б., Бруно С., Фонсато В., Романацци Г.М., Камюсси Г.Мезенхимальные стволовые клетки участвуют в восстановлении почек после острого повреждения канальцевого эпителия. Int J Mol Med. 2004; 14:1035–41.

    ПабМед Google ученый

  • Ferreira JR, Teixeira GQ, Santos SG, Barbosa MA, Almeida-Porada G, Goncalves RM. Секретом мезенхимальных стромальных клеток: влияние на терапевтический потенциал путем предварительного кондиционирования клеток. Фронт Иммунол. 2018;9:2837.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Имберти Б., Мориги М., Томасони С., Рота С., Корна Д., Лонгаретти Л., Роттоли Д., Вальсекки Ф., Бениньи А., Ван Дж., Аббате М., Зоя С., Ремуцци Г.Инсулиноподобный фактор роста-1 поддерживает восстановление почек, опосредованное стволовыми клетками. J Am Soc Нефрол. 2007;18:2921–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Ким Ю.К., Нам С.А., Ян К.В. Применение почечных органоидов, полученных из плюрипотентных стволовых клеток человека. Корейский J Intern Med. 2018; 33: 649–59.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ишиучи Т., Торрес-Падилья МЭ.К пониманию регуляторных механизмов тотипотентности. Curr Opin Genet Dev. 2013;23:512–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Балакьер Х., Педерсен Р.А. Распределение клеток по внутренней клеточной массе и линиям трофэктодермы у преимплантационных эмбрионов мыши. Дев биол. 1982; 90: 352–62.

    КАС пабмед Google ученый

  • Вейга А., Кальдерон Г., Барри П.Н., Королеу Б.Беременность после замены замороженного-размороженного эмбриона с менее чем 50% интактными бластомерами. Hum Reprod (Оксфорд, Англия). 1987; 2: 321–3.

    КАС Google ученый

  • Van de Velde H, Cauffman G, Tournaye H, Devroey P, Liebaers I. Четыре бластомера человеческого эмбриона на 4-клеточной стадии способны индивидуально развиваться в бластоцисты с внутренней клеточной массой и трофэктодермой. Hum Reprod (Оксфорд, Англия). 2008; 23:1742–7.

    Google ученый

  • Татибана М., Амато П., Спарман М., Гутьеррес Н.М., Типпнер-Хеджес Р., Ма Х., Канг Э., Фулати А., Ли Х.С., Шританаудомчай Х., Мастерсон К., Ларсон Дж., Итон Д., Сэдлер-Фредд К., Батталья Д., Ли Д., Ву Д., Дженсен Дж., Паттон П., Гокхале С., Стоуффер Р.Л., Вольф Д., Миталипов С.Эмбриональные стволовые клетки человека, полученные путем переноса ядер соматических клеток. Клетка. 2013; 153:1228–38.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Чжоу Л.К., Дин Дж. Перепрограммирование генома на тотипотентность у эмбрионов мышей. Тенденции клеточной биологии. 2015;25:82–91.

    КАС пабмед Google ученый

  • Томсон Дж.А., Ицковиц-Элдор Дж., Шапиро С.С., Вакниц М.А., Свергель Дж.Дж., Маршалл В.С., Джонс Дж.М.Линии эмбриональных стволовых клеток, полученные из бластоцисты человека. Science (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк). 1998; 282:1145–7.

    КАС Google ученый

  • Мартин Г.Р. Выделение плюрипотентной клеточной линии из ранних эмбрионов мышей, культивируемых в среде, кондиционированной стволовыми клетками тератокарциномы. Proc Natl Acad Sci U S A. 1981;78:7634–8.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Бигас А., Васков К.Стволовые клетки крови: от начала до конца. Девелопмент (Кембридж, Англия). 2016; 143:3429–33.

    КАС Google ученый

  • Питтенгер М.Ф., Маккей А.М., Бек С.К., Джайсвал Р.К., Дуглас Р., Моска Д.Д., Мурман М.А., Симонетти Д.В., Крейг С., Маршак Д.Р. Многолинейный потенциал мезенхимальных стволовых клеток взрослого человека. Science (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк). 1999; 284:143–7.

    КАС Google ученый

  • Massirer KB, Carromeu C, Griesi-Oliveira K, Muotri AR.Поддержание и дифференцировка нервных стволовых клеток, междисциплинарные обзоры Wiley. Сист биол мед. 2011;3:107–14.

    КАС Google ученый

  • Штанге, Германия. Стволовые клетки кишечника. Dig Dis (Базель, Швейцария). 2013; 31: 293–8.

    Google ученый

  • Hu H, Zou C. Мезенхимальные стволовые клетки при ишемически-реперфузионном повреждении почек: биологические и терапевтические перспективы.Curr Stem Cell Res Ther. 2017;12:183–187.

    КАС пабмед Google ученый

  • Oliveira-Sales EB, Boim MA. Мезенхимальные стволовые клетки и хронический стеноз почечных артерий. Am J Physiol Renal Physiol. 2016;310:F6–9.

    КАС пабмед Google ученый

  • Цзян Ю., Вассен Б., Ленвик Т., Блэкстад М., Рейес М., Верфейли К.М. Мультипотентные клетки-предшественники могут быть выделены из постнатального костного мозга, мышц и мозга мышей.эксп Гематол. 2002; 30: 896–904.

    КАС пабмед Google ученый

  • Цуй С., Чан П.Ю. Современные представления о стволовых клетках кишечника. Мир J Гастроэнтерол. 2016;22:7099–110.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сагринати К., Нетти Г.С., Маззинги Б., Лаццери Э., Лиотта Ф., Фросали Ф., Ронкони Э., Мейни К., Гаччи М., Скекко Р., Карини М., Джезуальдо Л., Франчини Ф., Магги Э., Аннунциато Ф., Лазаньи Л, Серио М, Романьяни С, Романьяни П.Выделение и характеристика мультипотентных клеток-предшественников из капсулы Боумена почек взрослого человека. J Am Soc Нефрол. 2006; 17: 2443–56.

    КАС пабмед Google ученый

  • Линдгрен Д., Бостром А.К., Нильссон К., Ханссон Дж., Сьолунд Дж., Моллер С., Джирстром К., Нильссон Э., Ландберг Г., Аксельсон Х., Йоханссон М.Э. Выделение и характеристика клеток-предшественников из проксимальных канальцев почек человека. Ам Джей Патол. 2011; 178:828–37.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Bussolati B, Bruno S, Grange C, Buttiglieri S, Deregibus MC, Cantino D, Camussi G. Выделение почечных клеток-предшественников из почки взрослого человека. Ам Джей Патол. 2005; 166: 545–55.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Анджелотти М.Л., Ронкони Э., Баллерини Л., Пейред А., Маззинги Б., Сагринати К., Паренте Э., Гаччи М., Карини М., Ротонди М., Фого А.Б., Лаццери Э., Лазаньи Л., Романьяни П.Характеристика почечных предшественников, направленных к канальцевому происхождению, и их регенеративный потенциал при повреждении почечных канальцев. Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2012;30:1714–25.

    КАС Google ученый

  • Гупта С., Верфайли С., Хмелевски Д., Крен С., Эйдман К., Коннейр Дж., Хереманс Ю., Лунд Т., Блэкстад М., Цзян И., Луттун А., Розенберг М.Э. Выделение и характеристика стволовых клеток почечного происхождения. J Am Soc Нефрол. 2006;17:3028–40.

    КАС пабмед Google ученый

  • Нараянан К., Шумахер К.М., Тасним Ф., Кандасами К., Шумахер А., Ни М., Гао С., Гопалан Б., Цинк Д., Ин Дж.Ю. Эмбриональные стволовые клетки человека дифференцируются в функциональные клетки, подобные проксимальным почечным канальцам. почки инт. 2013; 83: 593–603.

    КАС пабмед Google ученый

  • Takahashi K, Yamanaka S. Индукция плюрипотентных стволовых клеток из культур эмбриональных и взрослых фибробластов мыши с помощью определенных факторов.Клетка. 2006; 126: 663–76.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Такасато М., Эр П.С., Бекрофт М., Вансламбрук Дж.М., Стэнли Э.Г., Элефанти А.Г., Литтл М.Х. Направление дифференцировки эмбриональных стволовых клеток человека в сторону почечной линии приводит к самоорганизующейся почке. Nat Cell Biol. 2014;16:118–26.

    КАС пабмед Google ученый

  • Гэн С.Д., Чжэн В., Ву К.М., Ван С.К., Хун К., Цай Г.И., Чен С.М., Ву Д.Нагруженные эмбриональными стволовыми клетками желатиновые микрокриогели замедляют прогрессирование хронического заболевания почек. Chin Med J. 2016;129:392–8.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Васкес-Запиен Г.Дж., Мартинес-Куазитль А., Рангель-Кова Л.С., Камачо-Ибарра А., Мата-Миранда М.М. Биохимические и гистологические эффекты эмбриональных стволовых клеток в мышиной модели почечной недостаточности. Ром Джей Морфол Эмбриол. 2019;60:189–94.

    ПабМед Google ученый

  • Мата-Миранда М.М., Берналь-Баркеро К.Э., Мартинес-Куазитль А., Герреро-Роблес К.И., Санчес-Монрой В., Рохас-Лопес М., Васкес-Запиен Г.Дж.Нефропротекторный эффект эмбриональных стволовых клеток, снижающих перекисное окисление липидов при повреждении почек, вызванном цисплатином. Оксидативный Мед Селл Лонгев. 2019;2019:5420624.

    Google ученый

  • Гарсия Г.Г., Харден П., Чепмен Дж. Глобальная роль трансплантации почки. Curr Opin Nephrol Hypertens. 2012;21:229–34.

    ПабМед Google ученый

  • Моризан Р., Лам А.К., Фридман Б.С., Киши С., Валериус М.Т., Бонвентре СП.Органоиды нефрона, полученные из плюрипотентных стволовых клеток человека, моделируют развитие и повреждение почек. Нац биотехнолог. 2015;33:1193–200.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Такасато М., Маленький М.Х. Стратегия создания почечных органоидов: повторение развития плюрипотентных стволовых клеток человека. Дев биол. 2016; 420:210–20.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Бантунас И., Ранжзад П., Тенгку Ф., Силайджич Э., Форстер Д., Асселин М.С., Льюис П., Леннон Р., Плагге А., Ван К., Вульф А.С., Кимбер С.Дж.Генерация функционирующих нефронов путем имплантации человеческих плюрипотентных стволовых клеток-предшественников почки. Stem Cell Rep. 2018; 10:766–79.

    Google ученый

  • Тан З., Рак-Рашевска А., Сковородкин И., Вайнио С.Ю. Прогениторы зачатка мочеточника, происходящие из эмбриональных стволовых клеток мыши, индуцируют нефрогенез. Клетки. 2020;9(2):329.

  • Климанская И., Чанг Ю., Беккер С., Лу С.Дж., Ланца Р. Линии эмбриональных стволовых клеток человека, полученные из одиночных бластомеров.Природа. 2006; 444:481–5.

    КАС пабмед Google ученый

  • Yamamoto M, Cui L, Johkura K, Asanuma K, Okouchi Y, Ogiwara N, Sasaki K. Ветвящиеся протоки, похожие на мезонефральные протоки или зачатки мочеточников в тератомах, происходящих из эмбриональных стволовых клеток мыши. Am J Physiol Renal Physiol. 2006; 290:F52–60.

    КАС пабмед Google ученый

  • Такахаши К., Танабэ К., Охнуки М., Нарита М., Ичисака Т., Томода К., Яманака С.Индукция плюрипотентных стволовых клеток из фибробластов взрослого человека определенными факторами. Клетка. 2007; 131:861–72.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Yang YH, Zhang RZ, Cheng S, Xu B, Tian T, Shi HX, Xiao L, Chen RH. Получение из эпидермальных кератиноцитов человека. Перепрограммирование клеток. 2018;20:356–64.

    КАС пабмед Google ученый

  • Spitalieri P, Talarico RV, Botta A, Murdocca M, D’Apice MR, Orlandi A, Giardina E, Santoro M, Brancati F, Novelli G, Sangiuolo F.Получение индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток из экстраэмбриональных тканей плодов, пораженных моногенными заболеваниями. Перепрограммирование клеток. 2015;17:275–87.

    КАС пабмед Google ученый

  • Nishishita N, Takenaka C, Fusaki N, Kawamata S. Получение индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток из клеток пуповинной крови. J Стволовые клетки. 2011;6:101–8.

    ПабМед Google ученый

  • Gu H, Huang X, Xu J, Song L, Liu S, Zhang XB, Yuan W, Li Y.Оптимизация метода получения индуцированных без интеграции плюрипотентных стволовых клеток из периферической крови человека. Стволовые клетки Res Ther. 2018;9:163.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Aoi T, Yae K, Nakagawa M, Ichisaka T, Okita K, Takahashi K, Chiba T, Yamanaka S. Создание плюрипотентных стволовых клеток из клеток печени и желудка взрослых мышей. Science (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк). 2008; 321: 699–702.

    КАС Google ученый

  • Кавано Э., Ториуми Т., Игучи С., Сузуки Д., Сато С., Хонда М.Индукция клеток нервного гребня из плюрипотентных стволовых клеток, полученных из пульпы зуба человека. Biomed Res (Токио, Япония). 2017;38:135–47.

    КАС Google ученый

  • Нагано С., Маэда Т., Ичисе Х., Кашима С., Охтака М., Наканиши М., Китаваки Т., Кадоваки Н., Такаори-Кондо А., Масуда К., Кавамото Х. Высокочастотное производство клонов ИПСК Т-клеток, способных образования мощных цитотоксических Т-клеток. Mol Ther Methods Clin Dev. 2020;16:126–35.

    КАС пабмед Google ученый

  • Сонг Б., Никлис Дж. К., Алихан М. А., Саккал С., Сильвен А., Керр П. Г., Ласлетт А. Л., Бернард К. А., Рикардо С. Д. Получение индуцированных плюрипотентных стволовых клеток из мезангиальных клеток почек человека. J Am Soc Нефрол. 2011;22:1213–20.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Монтсеррат Н., Рамирес-Бахо М.Дж., Ся И., Санчо-Мартинес И., Мойя-Рулл Д., Микель-Серра Л., Ян С., Нивет Э., Кортина С., Гонсалес Ф., Изписуа Бельмонте Х.С., Кампистол Х.М.Генерация индуцированных плюрипотентных стволовых клеток из клеток проксимальных канальцев почек человека только с двумя факторами транскрипции, OCT4 и SOX2. Дж. Биол. Хим. 2012; 287:24131–8.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Boonkaew B, Thummavichit W, Netsrithong R, Vatanashvanopakorn C, Pattanapanyasat K, Wattanapanitch M. Создание линии индуцированных плюрипотентных стволовых клеток без интеграции (MUSIi005-A) из эксфолиированных клеток почечного эпителия.Стволовые клетки Res. 2018;30:34–7.

    КАС пабмед Google ученый

  • Zhou T, Benda C, Duzinger S, Huang Y, Li X, Li Y, Guo X, Cao G, Chen S, Hao L, Chan YC, Ng KM, Ho JC, Wieser M, Wu J, Redl H, Tse HF, Grillari J, Grillari-Voglauer R, Pei D, Esteban MA. Получение индуцированных плюрипотентных стволовых клеток из мочи. J Am Soc Нефрол. 2011;22:1221–8.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Чен В., Хуан Дж., Юй С., Линь С., Дай Ю.Генерация индуцированных плюрипотентных стволовых клеток из клеток почечных канальцев пациента с синдромом Альпорта. Int J Нефрол Ренов Дис. 2015;8:101–9.

    КАС Google ученый

  • Тарнг Д.С., Ценг В.К., Ли П.Ю., Чиу С.Х., Се С.Л. Кондиционированная среда, полученная из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, ослабляет острое повреждение почек путем подавления связанного с окислительным стрессом пути у крыс с ишемией-реперфузией. Трансплантация клеток. 2016;25:517–30.

    ПабМед Google ученый

  • Коллино Ф., Лопес Дж. А., Таппаро М. и др. Внеклеточные везикулы, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, способствуют ренопротекции в модели острого повреждения почек. Клетки. 2020;9(2):453.

  • Lee PY, Chien Y, Chiou GY, Lin CH, Chiou CH, Tarng DC. Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки без c-Myc ослабляют острую почечную недостаточность за счет подавления передачи сигналов окислительного стресса и воспаления у крыс с ишемией-реперфузией.Трансплантация клеток. 2012;21:2569–85.

    ПабМед Google ученый

  • Caldas HC, Lojudice FH, Dias C, Fernandes-Charpiot IMM, Baptista M, Kawasaki-Oyama RS, Sogayar MC, Takiya CM, Abbud-Filho M. Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки снижают прогрессирование экспериментального хронического заболевания почек, но развивают Опухоли Вильмса. Стволовые клетки 2017;2017:7428316.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Имберти Б., Томасони С., Чампи О., Пеццотта А., Деросас М., Ксинарис С., Риццо П., Пападиму Э., Новелли Р., Бениньи А., Ремуцци Г., Мориджи М.Почечные предшественники, полученные из ИПСК человека, приживаются и восстанавливают функцию в мышиной модели острого повреждения почек. Научный доклад 2015; 5:8826.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Yuan X, Li D, Chen X, Han C, Xu L, Huang T, Dong Z, Zhang M. Внеклеточные везикулы из индуцированных человеком плюрипотентных стволовых мезенхимальных стромальных клеток (hiPSC-MSC) защищают от почечных ишемия/реперфузионное повреждение за счет доставки белка специфичности (SP1) и активации транскрипции сфингозинкиназы 1 и ингибирования некроптоза.Клеточная смерть Дис. 2017;8:3200.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Huang X, Wang H, Xu Y. Индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (ИПСК), полученные из мезенхимальных стволовых клеток (МСК), показали сопоставимые эффекты в восстановлении острого повреждения почек по сравнению со взрослыми МСК. Урол Дж. 2020; 17: 204–9.

    ПабМед Google ученый

  • Sheu JJ, Sung PH, Wallace CG, Yang CC, Chen KH, Shao PL, Chu YC, Huang CR, Chen YL, Ko SF, Lee MS, Yip HK.Внутривенное введение iPS-MSC (SPIONs), мобилизованных в паренхиму CKD, эффективно сохраняло остаточную функцию почек у крыс с CKD. J Cell Mol Med. 2020;24:3593–610.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Becherucci F, Mazzinghi B, Allinovi M, Angelotti ML, Romagnani P. Регенерация почки с использованием человеческих плюрипотентных стволовых клеток и почечных предшественников. Мнение Эксперта Биол Тер. 2018;18:795–806.

    КАС пабмед Google ученый

  • Тагучи А., Нишинакамура Р.Восстановление нефрона из плюрипотентных стволовых клеток. почки инт. 2015; 87: 894–900.

    КАС пабмед Google ученый

  • Такасато М., Эр П.С., Чиу Х.С., Литтл М.Х. Генерация почечных органоидов из плюрипотентных стволовых клеток человека. Нат Проток. 2016; 11:1681–92.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Такасато М., Эр П.С., Чиу Х.С., Майер Б., Бэйли Г.Дж., Фергюсон С., Партон Р.Г., Волветанг Э.Дж., Руст М.С., Лопес С.М., Литтл М.Х.Органоиды почек из iPS-клеток человека содержат несколько клонов и моделируют нефрогенез человека. Природа. 2016; 536:238.

    КАС пабмед Google ученый

  • Такасато М., Маленький М.Х. Создание органоида почки с помощью направленной дифференцировки плюрипотентных стволовых клеток человека. Методы Mol Biol (Клифтон, Нью-Джерси). 2017;1597:195–206.

    КАС Google ученый

  • Lam AQ, Freedman BS, Morizane R, Lerou PH, Valerius MT, Bonventre JV.Быстрая и эффективная дифференцировка плюрипотентных стволовых клеток человека в промежуточную мезодерму, которая образует канальцы, экспрессирующие маркеры проксимальных канальцев почек. J Am Soc Нефрол. 2014;25:1211–25.

    КАС пабмед Google ученый

  • Mae SI, Ryosaka M, Toyoda T, Matsuse K, Oshima Y, Tsujimoto H, Okumura S, Shibasaki A, Osafune K. Создание ветвящихся тканей зачатка мочеточника из плюрипотентных стволовых клеток человека. Biochem Biophys Res Commun.2018; 495:954–61.

    КАС пабмед Google ученый

  • Танигава С., Ислам М., Шармин С., Наганума Х., Йошимура Й., Хак Ф., Эра Т., Наказато Х., Наканиши К., Сакума Т., Ямамото Т., Курихара Х., Тагучи А., Нишинакамура Р. Органоиды нефротического заболевания полученные ИПСК выявляют нарушение локализации NEPHRIN и образование щелевой диафрагмы в подоцитах почек. Представитель стволовых клеток 2018; 11: 727–40.

    КАС Google ученый

  • Xia Y, Nivet E, Sancho-Martinez I, Gallegos T, Suzuki K, Okamura D, Wu MZ, Dubova I, Esteban CR, Montserrat N, Campistol JM, Izpisua Belmonte JC.Направленная дифференцировка плюрипотентных клеток человека в клетки-предшественники зачатка мочеточника. Nat Cell Biol. 2013;15:1507–15.

    КАС пабмед Google ученый

  • Taguchi A, Kaku Y, Ohmori T, Sharmin S, Ogawa M, Sasaki H, Nishinakamura R. Новое определение in vivo происхождения метанефрических нефронов-предшественников позволяет создавать сложные почечные структуры из плюрипотентных стволовых клеток. Клеточная стволовая клетка. 2014; 14:53–67.

    КАС Google ученый

  • Монтсеррат Н., Гаррета Э., Изписуа Бельмонте Х.С.Регенеративные стратегии почечной инженерии. FEBS J. 2016; 283:3303–24.

    КАС пабмед Google ученый

  • Хусейн К.Х., Парк К.М., Канг К.С., Ву Х.М. Оценка биосовместимости тканеинженерных децеллюляризованных каркасов для биомедицинского применения. Магистр инженерных наук. 2016;67:766–78 C, Материалы для биологических приложений.

    КАС Google ученый

  • Рана Д., Зрейкат Х., Бенкиране-Джессел Н., Рамакришна С., Рамалингам М.Разработка децеллюляризованных каркасов для тканевой инженерии, управляемой стволовыми клетками. J Tissue Eng Regen Med. 2017; 11: 942–65.

    КАС пабмед Google ученый

  • Хусейн К.Х., Салех Т., Ахмед Э., Квак Х.Х., Парк К.М., Ян С.Р., Канг Б.Дж., Чой К.И., Канг К.С., Ву Х.М. Биосовместимость и гемосовместимость цельной эффективно децеллюляризованной почки свиньи для тканевой инженерии. J Biomed Mater Res A. 2018;106:2034–47.

    КАС пабмед Google ученый

  • Салливан Д.С., Мирмалек-Сани С.Х., Диган Д.Б., Баптиста П.М., Абушвареб Т., Атала А., Ю Дж.Дж.Методы децеллюляризации свиных почек для инженерии целых органов с использованием высокопроизводительной системы. Биоматериалы. 2012; 33:7756–64.

    КАС пабмед Google ученый

  • Ю. Л., Шао Ю. К., Дин Ю. К., Лин К. З., Чен Б., Чжан Х. З., Чжао Л. Н., Ван З. Б., Чжан Д. С., Тан М. Л., Мэй Дж. Регенерация почек, опосредованная децеллюляризованным почечным каркасом. Биоматериалы. 2014; 35:6822–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Джин М., Ялин Ю., Жибин В., Цзянсе З.Децеллюляризация почек крыс для получения каркасов внеклеточного матрикса. Методы Mol Biol (Клифтон, Нью-Джерси). 2016;1397:53–63.

    КАС Google ученый

  • Леунинг Д.Г., Витяс Ф.М.Р., Маанауи М., де Грааф А.М., Ливерс Э., Гойенс Т., Аврамут К.М., Вирсма Л.Е., ван ден Берг К.В., Соль В., де Бур Х., Ван Г., ЛаПойнте VLS, ван дер Влаг Дж., ван Кутен С., ван ден Берг Б.М., Литтл М.Х., Энгельс М.А., Рабелинк Т.Дж. Сосудистая биоинженерия каркасов, полученных из выброшенных трансплантированных почек человека, с использованием эндотелия, полученного из плюрипотентных стволовых клеток человека.Ам Джей Трансплант. 2019;19:1328–43.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сюэ А., Ню Г., Чен И., Ли К., Сяо З., Луань И., Сунь С., Се Х., Чжан Д., Ду Х., Конг Ф., Го И., Чжан Х., Ченг Г., Синь Ц., Гуань Y, Zhao S. Рецеллюляризация хорошо сохранившегося децеллюляризованного каркаса почки с использованием стволовых клеток, полученных из жировой ткани. J Biomed Mater Res A. 2018;106:805–14.

    КАС пабмед Google ученый

  • Бонандрини Б., Фигльуцци М., Пападиму Э., Мориджи М., Перико Н., Казираги Ф., дипломированный специалист С., Сангалли Ф., Конти С., Бениньи А., Ремуцци А., Ремуцци Г.Рецеллюляризация хорошо сохранившегося бесклеточного каркаса почки с использованием эмбриональных стволовых клеток. Tissue Eng A. 2014; 20: 1486–98.

    КАС Google ученый

  • Росс Э.А., Уильямс М.Дж., Хамазаки Т., Терада Н., Клапп В.Л., Адин С., Эллисон Г.В., Йоргенсен М., Батич К.Д. Эмбриональные стволовые клетки пролиферируют и дифференцируются при посеве в каркасы почек. J Am Soc Нефрол. 2009;20:2338–47.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ду К., Нараянан К., Леонг М.Ф., Ибрагим М.С., Чуа Ю.П., Кху В.М., Ван А.С.Функциональная биоинженерия почек с использованием плюрипотентных почечных клеток-предшественников, полученных из стволовых клеток, и децеллюляризованных каркасов почек. Adv Healthc Mater. 2016;5:2080–91.

    КАС пабмед Google ученый

  • Чампи О., Бонандрини Б., Деросас М., Конти С., Риццо П., Бенедетти В., Фиглиуцци М., Ремуцци А., Бениньи А., Ремуцци Г., Томасони С. Разработка сосудистой системы децеллюляризованных каркасов почек крыс с использованием индуцированного человеком плюрипотентного ствола эндотелиальные клетки клеточного происхождения.Научный доклад 2019; 9:8001.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Musah S, Dimitrakakis N, Camacho DM, Church GM, Ingber DE. Направленная дифференцировка индуцированных человеком плюрипотентных стволовых клеток в зрелые подоциты почек и создание гломерулового чипа. Нат Проток. 2018;13:1662–85.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Musah S, Mammoto A, Ferrante TC, et al.Зрелые подоциты человека, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, восстанавливают функцию гломерулярно-капиллярной стенки почек на чипе. Нат Биомед Инж. 2017;1:0069.

  • Kuebler B, Aran B, Miquel-Serra L, Munoz Y, Ars E, Bullich G, Furlano M, Torra R, Marti M, Veiga A, Raya A. Индуцированные без интеграции плюрипотентные стволовые клетки, полученные от пациента с аутосомно-рецессивным синдромом Альпорта (АРАС). Стволовые клетки Res. 2017;25:1–5.

    КАС пабмед Google ученый

  • Huang CY, Ho MC, Lee JJ, Hwang DY, Ko HW, Cheng YC, Hsu YH, Lu HE, Chen HC, Hsieh PCH.Генерация индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, полученных от пациента с аутосомно-доминантным поликистозом почек с мутацией p.Ser1457fs в PKD1. Стволовые клетки Res. 2017;24:139–43.

    КАС пабмед Google ученый

  • Фридман Б.С., Лам А.К., Сундсбак Дж.Л., Ятрино Р., Су Х., Кун С.Дж., Ву М., Дахерон Л., Харрис П.С., Чжоу Дж., Бонвентре Дж.В. Снижение цилиарного полицистина-2 в индуцированных плюрипотентных стволовых клетках у пациентов с поликистозной болезнью почек с мутациями PKD1.J Am Soc Нефрол. 2013; 24:1571–86.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сон М.Ю., Ли М.О., Чон Х., Соль Б., Ким Дж.Х., Чанг Дж.С., Чо Й.С. Создание и характеристика индуцированных без интеграции плюрипотентных стволовых клеток от пациентов с аутоиммунным заболеванием. Эксп Мол Мед. 2016;48:e232.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Кюблер Б., Аран Б., Микель-Серра Л., Муньос Ю., Арс Э., Буллич Г., Фурлано М., Торра Р., Марти М., Вейга А., Рая А.Создание индуцированных без интеграции линий плюрипотентных стволовых клеток, полученных от двух пациентов с синдромом Альпорта, сцепленным с Х-хромосомой (XLAS). Стволовые клетки Res. 2017;25:291–5.

    КАС пабмед Google ученый

  • Trionfini P, Ciampi O, Romano E, Benigni A, Tomasoni S. Создание двух изогенных нокаутных PKD2 клеточных линий iPS, IRFMNi003-A-1 и IRFMNi003-A-2, с использованием технологии CRISPR/Cas9. Стволовые клетки Res. 2020;42:101667.

    КАС пабмед Google ученый

  • Линдстром Н.О., Тран Т., Го Дж., Ратледж Э., Парвез Р.К., Торнтон М.Е., Граббс Б., МакМахон Дж.А., МакМахон А.П.Консервативные и дивергентные молекулярные и анатомические особенности формирования нефрона человека и мыши. J Am Soc Нефрол. 2018;29:825–40.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Линдстром Н.О., Го Дж., Ким А.Д., Тран Т., Го К., Де Сена Брандин Г., Рансик А., Парвез Р.К., Торнтон М.Е., Баскин Л., Граббс Б., МакМахон Дж.А., Смит А.Д., МакМахон А.П. Консервативные и дивергентные особенности типов мезенхимальных клеток-предшественников в кортикальной нефрогенной нише почек человека и мыши.J Am Soc Нефрол. 2018;29:806–24.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Герцог В. М., Уинъярд П. Дж., Торогуд П., Сутхилл П., Булу П. М., Вульф А. С. KAL, ген, мутировавший при синдроме Каллмана, экспрессируется в первом триместре развития человека. Мол Селл Эндокринол. 1995; 110:73–79.

    КАС пабмед Google ученый

  • Ву Г., Тиан Х., Нишимура С., Марковиц Г.С., Д’Агати В., Парк Дж. Х., Яо Л., Ли Л., Гэн Л., Чжао Х., Эдельманн В., Сомло С.Трансгетерозиготные мутации Pkd1 и Pkd2 изменяют экспрессию поликистоза почек. Хум Мол Жене. 2002; 11:1845–54.

    КАС пабмед Google ученый

  • Мочизуки Т., Ву Г., Хаяши Т., Ксенофонтос С.Л., Вельдхуйзен Б., Сарис Дж.Дж., Рейнольдс Д.М., Кай Ю., Габоу П.А., Пьеридес А., Кимберлинг В.Дж., Бреунинг М.Х., Дельтас К.С., Петерс Д.Дж., Сомло С. PKD2 , ген поликистоза почек, кодирующий интегральный мембранный белок. Наука (Нью-Йорк, Н.Ю.). 1996; 272:1339–42.

    КАС Google ученый

  • Trionfini P, Ciampi O, Todeschini M, Ascanelli C, Longaretti L, Perico L, Remuzzi G, Benigni A, Tomasoni S. Опосредованная CRISPR-Cas9 коррекция мутации G189R-PAX2 в индуцированных плюрипотентных стволовых клетках из пациент с фокально-сегментарным гломерулосклерозом. CRISPR J. 2019;2:108–20.

    КАС пабмед Google ученый

  • Forbes TA, Howden SE, Lawlor K, Phipson B, Maximovic J, Hale L, Wilson S, Quinlan C, Ho G, Holman K, Bennetts B, Crawford J, Trnka P, Oshlack A, Patel C, Mallett А, Саймонс С, Литтл М.Х.Органоиды почек, полученные из ИПСК пациента, демонстрируют функциональное подтверждение цилиопатического почечного фенотипа и раскрывают основные патогенетические механизмы. Am J Hum Genet. 2018; 102: 816–31.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Horwitz EM, Gordon PL, Koo WK, Marx JC, Neel MD, McNall RY, Muul L, Hofmann T. Изолированные аллогенные мезенхимальные клетки костного мозга приживаются и стимулируют рост у детей с несовершенным остеогенезом: значение для клеточной терапии кости.Proc Natl Acad Sci U S A. 2002;99:8932–7.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Карп Дж.М., Ленг Тео Г.С. Самонаведение мезенхимальных стволовых клеток: дьявол кроется в деталях. Клеточная стволовая клетка. 2009; 4: 206–16.

    КАС пабмед Google ученый

  • Sohni A, Verfaillie CM. Поиск и отслеживание миграции мезенхимальных стволовых клеток. Стволовые клетки 2013;2013:130763.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Де Беккер А., Риет И.В. Хоуминг и миграция мезенхимальных стромальных клеток: как повысить эффективность клеточной терапии? Стволовые клетки мира J. 2016; 8: 73–87.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Эррера М.Б., Буссолати Б., Бруно С., Морандо Л., Мауриелло-Романацци Г., Санавио Ф., Стаменкович И., Бьянконе Л., Камюсси Г.Экзогенные мезенхимальные стволовые клетки локализуются в почках с помощью CD44 после острого повреждения канальцев. почки инт. 2007; 72: 430–41.

    КАС пабмед Google ученый

  • Liu N, Tian J, Cheng J, Zhang J. Миграция мезенхимальных стволовых клеток костного мозга с модифицированным геном CXCR4 в остро поврежденную почку. Джей Селл Биохим. 2013; 114:2677–89.

    КАС пабмед Google ученый

  • Bian XH, Zhou GY, Wang LN, Ma JF, Fan QL, Liu N, Bai Y, Guo W, Wang YQ, Sun GP, ​​He P, Yang X, Su XS, Du F, Zhao GF, Miao JN, Ma L, Zheng LQ, Li DT, Feng JM.Роль взаимодействия CD44-гиалуроновой кислоты в экзогенных мезенхимальных стволовых клетках, направляющихся к остатку почки крысы. Почечный пресс крови Res. 2013; 38:11–20.

    КАС пабмед Google ученый

  • Масуд М.С., Анвар С.С., Афзал М.З., Мехмуд А., Хан С.Н., Риазуддин С. Предварительно кондиционированные мезенхимальные стволовые клетки облегчают ишемическое повреждение почек у крыс за счет увеличения выживаемости и приживления. J Transl Med. 2012;10:243.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сабери К., Пасбахш П., Омиди А., Борхани-Хагиги М., Некунам С., Омиди Н., Гасеми С., Кашани И.Р.Предварительное кондиционирование мелатонином мезенхимальных стволовых клеток, полученных из костного мозга, способствует их приживлению и улучшает регенерацию почек в крысиной модели хронического заболевания почек. Дж. Мол. Хистол. 2019;50:129–40.

    КАС пабмед Google ученый

  • Si X, Liu X, Li J, Wu X. Трансформирующий фактор роста-бета1 способствует возвращению мезенхимальных стволовых клеток костного мозга при почечной ишемии-реперфузии. Int J Clin Exp Pathol. 2015;8:12368–78.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Liu P, Feng Y, Dong C, Yang D, Li B, Chen X, Zhang Z, Wang Y, Zhou Y, Zhao L. Введение СККМ с мусконом крысам с индуцированным гентамицином ОПП повышает их терапевтическую эффективность . ПЛОС Один. 2014;9:e97123.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Лю Н, Тянь Дж, Ченг Дж, Чжан Дж.Влияние эритропоэтина на миграцию мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в микросреду острого повреждения почек. Разрешение ячейки опыта. 2013;319:2019–27.

    КАС пабмед Google ученый

  • Yu X, Lu C, Liu H, Rao S, Cai J, Liu S, Kriegel AJ, Greene AS, Liang M, Ding X. Гипоксическое прекондиционирование кобальтом мезенхимальных стволовых клеток костного мозга улучшает миграцию клеток и усиливает терапию для лечения острого ишемического повреждения почек.ПЛОС Один. 2013;8:e62703.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Liu N, Patzak A, Zhang J. CXCR4-гиперэкспрессирующие мезенхимальные стволовые клетки костного мозга улучшают восстановление острого повреждения почек. Am J Physiol Renal Physiol. 2013; 305:F1064–73.

    КАС пабмед Google ученый

  • Ван Г., Чжан Ц., Чжо З., Ву С., Сюй Ю., Цзоу Л., Ган Л., Тан К., Ся Х., Лю З., Гао Ю.Улучшенное возвращение мезенхимальных стволовых клеток костного мозга, модифицированных CXCR-4, к тканям острого повреждения почек с помощью ультразвукового воздействия, опосредованного микропузырьками. Ультразвук Медицина Биол. 2016; 42: 539–48.

    КАС пабмед Google ученый

  • Burks SR, Nagle ME, Bresler MN, Kim SJ, Star RA, Frank JA. Потенциал мезенхимальных стромальных клеток для лечения острого повреждения почек повышается за счет активируемой ультразвуком оси интерферон-гамма/интерлейкин-10. J Cell Mol Med.2018;22:6015–25.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Burks SR, Nguyen BA, Tebebi PA, Kim SJ, Bresler MN, Ziadloo A, Street JM, Yuen PS, Star RA, Frank JA. Предварительная обработка импульсным сфокусированным ультразвуком повышает эффективность мезенхимальных стромальных клеток в предотвращении и восстановлении установленного острого повреждения почек у мышей. Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2015; 33:1241–53.

    Google ученый

  • Зиадлоо А., Беркс С.Р., Голд Э.М., Льюис Б.К., Чаудхри А., Мерино М.Дж., Френкель В., Франк Дж.А.Повышенная проницаемость самонаведения и удержание стромальных клеток костного мозга с помощью неинвазивного импульсного сфокусированного ультразвука. Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2012;30:1216–27.

    КАС Google ученый

  • Гупта С., Верфайи С., Хмелевски Д., Ким Ю., Розенберг М.Э. Роль внепочечных клеток в регенерации после острой почечной недостаточности. почки инт. 2002;62:1285–90.

    ПабМед Google ученый

  • Поулсом Р., Форбс С.Дж., Ходивала-Дилке К., Райан Э., Уайлс С., Наваратнарасах С., Джеффри Р., Хант Т., Элисон М., Кук Т., Пьюзи С., Райт Н.А.Костный мозг участвует в обмене и регенерации почечной паренхимы. Джей Патол. 2001; 195: 229–35.

    КАС пабмед Google ученый

  • Broekema M, Harmsen MC, Koerts JA, Petersen AH, van Luyn MJ, Navis G, Popa ER. Детерминанты приживления трубчатых клеток костного мозга после почечной ишемии/реперфузии у крыс. почки инт. 2005; 68: 2572–81.

    ПабМед Google ученый

  • Кале С., Карихало А., Кларк П.Р., Кашгарян М., Краузе Д.С., Кэнтли Л.Г.Стволовые клетки костного мозга способствуют восстановлению ихимически поврежденных почечных канальцев. Джей Клин Инвест. 2003; 112:42–9.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Togel F, Hu Z, Weiss K, Isaac J, Lange C, Westenfelder C. Вводимые мезенхимальные стволовые клетки защищают от ишемической острой почечной недостаточности посредством независимых от дифференцировки механизмов. Am J Physiol Renal Physiol. 2005; 289: F31–42.

    ПабМед Google ученый

  • Би Б., Шмитт Р., Исраилова М., Нишио Х., Кэнтли Л.Г.Стромальные клетки защищают от острого повреждения канальцев за счет эндокринного эффекта. J Am Soc Нефрол. 2007; 18: 2486–96.

    ПабМед Google ученый

  • Eliopoulos N, Zhao J, Bouchentouf M, Forner K, Birman E, Yuan S, Boivin MN, Martineau D. Мезенхимальные стромальные клетки костного мозга человека снижают ренотоксичность цисплатина in vitro и in vivo и повышают выживаемость мышей после внутрибрюшинная инъекция. Am J Physiol Renal Physiol. 2010; 299:F1288–98.

    КАС пабмед Google ученый

  • Busletta C, Novo E, Valfre Di Bonzo L, Povero D, Paternostro C, Ievolella M, Mareschi K, Ferrero I, Cannito S, Compagnone A, Bandino A, Colombatto S, Fagioli F, Parola M. Препарирование двухфазный характер индуцированного гипоксией мотогенного действия в мезенхимальных стволовых клетках человека, полученных из костного мозга. Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2011;29:952–63.

    КАС Google ученый

  • Тогель Ф., Вайс К., Ян Ю., Ху З., Чжан П., Вестенфельдер К.Васкулотропное, паракринное действие инфузированных мезенхимальных стволовых клеток важно для восстановления после острого повреждения почек. Am J Physiol Renal Physiol. 2007; 292:F1626–35.

    КАС пабмед Google ученый

  • Liang X, Ding Y, Zhang Y, Tse HF, Lian Q. Паракринные механизмы терапии на основе мезенхимальных стволовых клеток: текущее состояние и перспективы. Трансплантация клеток. 2014;23:1045–59.

    ПабМед Google ученый

  • Гнекки М., Даниэли П., Мальпассо Г., Чиффреда М.С.Паракринные механизмы мезенхимальных стволовых клеток в репарации тканей. Методы Mol Biol (Клифтон, Нью-Джерси). 2016;1416:123–46.

    КАС Google ученый

  • Четинкая Б., Унек Г., Кипмен-Коргун Д., Коксой С., Коргун Э.Т. Влияние мезенхимальных стволовых клеток, полученных из плацентарного амниона человека, на механизмы пролиферации и апоптоза при хронической болезни почек у крыс. Стволовые клетки IntJ. 2019;12(1):151-61.

  • Эйрин А., Чжу Сюй, Пураник А.С., Тан Х., МакГуррен К.А., ван Вийнен А.Дж., Лерман А., Лерман Л.О.Внеклеточные везикулы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток, ослабляют воспаление почек. почки инт. 2017;92:114–24.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Togel F, Zhang P, Hu Z, Westenfelder C. VEGF является медиатором ренопротекторных эффектов мультипотентных стромальных клеток костного мозга при остром повреждении почек. J Cell Mol Med. 2009;13:2109–14.

    ПабМед Google ученый

  • Бариле Л., Вассалли Г.Экзосомы: средства доставки терапии и биомаркеры заболеваний. Фармакол Тер. 2017; 174:63–78.

    КАС пабмед Google ученый

  • Zhang W, Zhou X, Zhang H, Yao Q, Liu Y, Dong Z. Внеклеточные везикулы в диагностике и терапии заболеваний почек. Am J Physiol Renal Physiol. 2016;311:F844–f851.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Коломбо М., Рапозо Г., Тери К.Биогенез, секреция и межклеточные взаимодействия экзосом и других внеклеточных везикул. Annu Rev Cell Dev Biol. 2014;30:255–89.

    КАС пабмед Google ученый

  • Бургер Д., Шок С., Томпсон К.С., Монтезано А.С., Хаким А.М., Тойз Р.М. Микрочастицы: биомаркеры и не только. Clin Sci (Лондон, Англия: 1979). 2013; 124:423–41.

    КАС Google ученый

  • Бруно С., Гранж С., Дерегибус М.С., Калоджеро Р.А., Савиоцци С., Коллино Ф., Морандо Л., Буска А., Фалда М., Буссолати Б., Тетта С., Камюсси Г.Микровезикулы, происходящие из мезенхимальных стволовых клеток, защищают от острого повреждения канальцев. J Am Soc Нефрол. 2009;20:1053–67.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Gatti S, Bruno S, Deregibus MC, Sordi A, Cantaluppi V, Tetta C, Camussi G. Микровезикулы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток взрослого человека, защищают от острого и хронического повреждения почек, вызванного ишемией-реперфузией. Трансплантация нефролового циферблата. 2011; 26:1474–83.

    КАС пабмед Google ученый

  • Zou X, Gu D, Xing X, Cheng Z, Gong D, Zhang G, Zhu Y. Внеклеточные везикулы, полученные из мезенхимальных стромальных клеток человека, облегчают ишемическое реперфузионное повреждение почек и усиливают ангиогенез у крыс. Am J Transl Res. 2016; 8: 4289–99.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Хэ Дж., Ван И, Сун С, Ю М, Ван С, Пэй Х, Чжу Б, Ву Дж, Чжао В.Микровезикулы, полученные из стволовых клеток костного мозга, защищают от повреждения почек в модели остаточной почки мыши. Нефрология (Карлтон, Виктория). 2012; 17: 493–500.

    Google ученый

  • He J, Wang Y, Lu X, Zhu B, Pei X, Wu J, Zhao W. Микровезикулы, полученные из стволовых клеток костного мозга, защищают почки как in vivo, так и in vitro за счет микроРНК-зависимого восстановления. Нефрология (Карлтон, Виктория). 2015; 20: 591–600.

    КАС Google ученый

  • Чой Х.И., Ли Х.Г., Ким Б.С., Ан С.Х., Юнг А., Ли М., Ли Дж.Е., Ким Х.Дж., Ха С.К., Пак Х.К.Микрочастицы, полученные из мезенхимальных стволовых клеток, улучшают разрежение перитубулярных капилляров за счет ингибирования эндотелиально-мезенхимального перехода и уменьшают тубулоинтерстициальный фиброз при односторонней обструкции мочеточника. Стволовые клетки Res Ther. 2015;6:18.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Гранж С., Тритта С., Таппаро М., Чедрино М., Тетта С., Камюсси Г., Бриззи М.Ф. Внеклеточные везикулы, полученные из стволовых клеток, ингибируют и останавливают прогрессирование фиброза в мышиной модели диабетической нефропатии.Научный доклад 2019; 9: 4468.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Кусума Г.Д., Картью Дж., Лим Р., Фрит Дж.Э. Влияние микроокружения на паракринную передачу сигналов мезенхимальными стволовыми клетками: возможности для создания терапевтического эффекта. Стволовые клетки Dev. 2017;26:617–31.

    КАС пабмед Google ученый

  • Финни Д.Г., Питтенгер М.Ф. Краткий обзор: экзосомы, полученные из МСК, для бесклеточной терапии.Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2017; 35:851–8.

    КАС Google ученый

  • Leuning DG, Beijer NRM, du Fossé NA, Vermeulen S, Lievers E, van Kooten C, Rabelink TJ, Boer J. Профиль секреции цитокинов мезенхимальными стромальными клетками определяется структурой поверхности микроокружения. Научный доклад 2018; 8: 7716.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Миас С., Труш Э., Сегелас М.Х., Кальканьо Ф., Дигнат-Джордж Ф., Сабатье Ф., Пьерчекки-Марти М.Д., Даниэль Л., Бьянки П., Кализ Д., Бурин П., Парини А., Кюссак Д.Предварительная обработка ex vivo мелатонином улучшает выживаемость, проангиогенную/митогенную активность и эффективность мезенхимальных стволовых клеток, введенных в ишемизированную почку. Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2008; 26: 1749–57.

    КАС Google ученый

  • Фонтейн М.Дж., Ши Х., Шафер Р., Питтенгер М.Ф. Раскрытие паракринных иммуномодулирующих эффектов мезенхимальных стромальных клеток. Transfus Med Rev. 2016; 30:37–43.

    ПабМед Google ученый

  • Ю П., Ван З., Лю И., Сяо З., Го И., Ли М., Чжао М.Мезенхимальные стволовые клетки костного мозга эффективно уменьшают гистологические изменения в крысиной модели хронического отторжения почечного аллотрансплантата. Пересадка Proc. 2017;49:2194–203.

    КАС пабмед Google ученый

  • He Y, Zhou S, Liu H, Shen B, Zhao H, Peng K, Wu X. Мезенхимальные стволовые клетки, трансфицированные индоламин 2,3-диоксгеназой, индуцируют толерантность к почечному аллотрансплантату за счет увеличения продукции и функции регуляторных Т-клеток. Трансплантация.2015; 99: 1829–38.

    КАС пабмед Google ученый

  • Sun L, Akiyama K, Zhang H, Yamaza T, Hou Y, Zhao S, Xu T, Le A, Shi S. Трансплантация мезенхимальных стволовых клеток устраняет полиорганную дисфункцию у мышей и людей с системной красной волчанкой. Стволовые клетки (Дейтон, Огайо). 2009; 27:1421–32.

    КАС Google ученый

  • Jang E, Jeong M, Kim S, Jang K, Kang BK, Lee DY, Bae SC, Kim KS, Youn J.Инфузия мезенхимальных стволовых клеток, полученных из костного мозга человека, облегчает течение аутоиммунного нефрита на модели волчанки путем подавления развития фолликулярных хелперных Т-клеток. Трансплантация клеток. 2016; 25:1–15.

    ПабМед Google ученый

  • Tang X, Li W, Wen X, Zhang Z, Chen W, Yao G, Chen H, Wang D, Shi S, Sun L. Трансплантация мезенхимальных стволовых клеток, полученных из зубной ткани, облегчает течение нефрита у мышей с волчанкой. Энн Трансл Мед. 2019;7:132.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Тани С., Ваньяни С., Карли Л., Кверчи Ф., Кюль А.А., Шпикерманн С., Силуч С.П., Пачини С., Фацци Р., Моска М. Лечение аллогенными мезенхимальными стромальными клетками в мышиной модели системной красной волчанки. Международный журнал стволовых клеток. 2017;10(2):160–8.

  • Squillaro T, Peluso G, Galderisi U. Клинические испытания мезенхимальных стволовых клеток: обновление.Трансплантация клеток. 2016;25:829–48.

    ПабМед Google ученый

  • Tögel FE, Westenfelder C. Защита почек и регенерация после острой травмы: прогресс в терапии стволовыми клетками. Am J почек Dis. 2012;60:1012–22.

    ПабМед Google ученый

  • Сваминатан М., Стаффорд-Смит М., Чертоу Г.М., Уорнок Д.Г., Парагамиан В., Бреннер Р.М., Лелуш Ф., Фокс-Робишо А., Атта М.Г., Мелби С., Мехта Р.Л., Уолд Р., Верма С., Мазер К.Д.Аллогенные мезенхимальные стволовые клетки для лечения ОПП после операций на сердце. J Am Soc Нефрол. 2018;29:260–7.

    ПабМед Google ученый

  • Nassar W, El-Ansary M, Sabry D, Mostafa MA, Fayad T, Kotb E, Temraz M, Saad AN, Essa W, Adel H. Мезенхимальные стволовые клетки пуповины, полученные из внеклеточных везикул, могут безопасно улучшить прогрессирование хронические заболевания почек. Биоматериалы рез. 2016;20:21.

    Google ученый

  • Packham DK, Fraser IR, Kerr PG, Segal KR.Аллогенные мезенхимальные клетки-предшественники (MPC) при диабетической нефропатии: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование с повышением дозы. ЭБиоМедицина. 2016;12:263–9.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Вильянуэва С., Гонсалес Ф., Лорка Э., Тапиа А., Лопес В.Г., Стродтхофф Р., Файре Ф., Карреньо Х.Е., Вальяло Р., Вергара С., Леканда М., Бартолуччи Дж., Фигероа Ф.Е., Хури М. Полученные из жировой ткани мезенхимальные стромальные клетки для лечения хронического заболевания почек: пилотное исследование по оценке безопасности и клинической осуществимости.Клиническая клиника почек. 2019;38:176–85.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Махлоу А., Шекарчян С., Могадасали Р., Эйноллахи Б., Дастгейб М., Джанбабаи Г., Хоссейни С.Е., Фалах Н., Аббаси Ф., Бахарванд Х., Агдами Н. Инфузия костномозгово-мезенхимальных стромальных клеток у пациентов с хронической болезнью почек : исследование безопасности с последующим наблюдением в течение 18 месяцев. Цитотерапия. 2018;20:660–9.

    ПабМед Google ученый

  • Саад А., Дитц А.Б., Херрманн С.М., Хиксон Л.Дж., Глокнер Дж.Ф., МакКьюсик М.А., Мисра С., Бьярнасон Х., Армстронг А.С., Гастино Д.А., Лерман Л.О., Текстор СК.Аутологичные мезенхимальные стволовые клетки увеличивают перфузию коры при реноваскулярных заболеваниях. J Am Soc Нефрол. 2017;28:2777–85.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Махлоу А., Шекарчян С., Могадасали Р., Эйноллахи Б., Хоссейни С.Е., Джаруги Н., Болурие Т., Бахарванд Х., Агдами Н. Безопасность и переносимость аутологичных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга у пациентов с АДПБП. Стволовые клетки Res Ther. 2017;8:116.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Wang D, Li J, Zhang Y, Zhang M, Chen J, Li X, Hu X, Jiang S, Shi S, Sun L. Трансплантация мезенхимальных стволовых клеток пуповины при активной и рефрактерной системной красной волчанке: мультицентр клиническое исследование. Артрит Res Ther. 2014;16:R79.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сунь Л, Ван Д, Лян Дж, Чжан Х, Фэн Х, Ван Х, Хуа Б, Лю Б, Е С, Ху Х, Сюй В, Цзэн Х, Хоу И, Гилкесон Г.С., Сильвер РМ, Лу Л, Ши С.Трансплантация мезенхимальных стволовых клеток пуповины при тяжелой и рефрактерной системной красной волчанке. Ревмирующий артрит. 2010;62:2467–75.

    КАС пабмед Google ученый

  • Wang D, Zhang H, Liang J, Li X, Feng X, Wang H, Hua B, Liu B, Lu L, Gilkeson GS, Silver RM, Chen W, Shi S, Sun L. Аллогенные мезенхимальные стволовые клетки трансплантология при тяжелой и рефрактерной системной красной волчанке: 4-летний опыт. Трансплантация клеток.2013;22:2267–77.

    ПабМед Google ученый

  • Liang J, Zhang H, Hua B, Wang H, Lu L, Shi S, Hou Y, Zeng X, Gilkeson GS, Sun L. Трансплантация аллогенных мезенхимальных стволовых клеток при рефрактерной системной красной волчанке: экспериментальное клиническое исследование. Энн Реум Дис. 2010;69:1423–9.

    ПабМед Google ученый

  • Гу Ф., Ван Д., Чжан Х., Фэн С., Гилкесон Г.С., Ши С., Сун Л.Аллогенная трансплантация мезенхимальных стволовых клеток у пациентов с волчаночным нефритом, рефрактерным к традиционной терапии. Клин Ревматол. 2014; 33:1611–9.

    ПабМед Google ученый

  • Барбадо Дж., Табера С., Санчес А., Гарсия-Санчо Дж. Терапевтический потенциал трансплантации аллогенных мезенхимальных стромальных клеток при волчаночном нефрите. волчанка. 2018;27:2161–5.

    КАС пабмед Google ученый

  • Дэн Д., Чжан П., Го И., Лим Т.О.Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование аллогенных мезенхимальных стволовых клеток, полученных из пуповины, для лечения волчаночного нефрита. Энн Реум Дис. 2017;76:1436–9.

    КАС пабмед Google ученый

  • Перико Н., Казираги Ф., Интрона М., Готти Э., Тодескини М., Кавинато Р.А., Капелли С., Рамбальди А., Кассис П., Риццо П., Кортиновис М., Мараса М., Голей Дж., Норис М., Ремуцци Г. Аутологичный мезенхимальные стромальные клетки и трансплантация почки: пилотное исследование безопасности и клинической осуществимости.Clin J Am Soc Нефрол. 2011;6:412–22.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Casiraghi F, Azzollini N, Todeschini M, Cavinato RA, Cassis P, Solini S, Rota C, Morigi M, Introna M, Maranta R, Perico N, Remuzzi G, Noris M. Локализация мезенхимальных стромальных клеток определяет их иммунные или провоспалительные эффекты при трансплантации почки. Am J Transplant Off J Am Soc Transplant Am Soc Transplant Surg. 2012;12:2373–83.

    КАС Google ученый

  • Perico N, Casiraghi F, Gotti E, Introna M, Todeschini M, Cavinato RA, Capelli C, Rambaldi A, Cassis P, Rizzo P, Cortinovis M, Noris M, Remuzzi G. Мезенхимальные стромальные клетки и трансплантация почки: инфузия перед трансплантацией защищает от дисфункции трансплантата, одновременно способствуя иммунорегуляции. Трансплантация Интерн. 2013;26:867–78.

    КАС Google ученый

  • Перико Н., Казираги Ф., Тодескини М., Кортиновис М., Готти Э., Порталупи В., Мистер М., Гаспари Ф., Вилла А., Фиори С., Интрона М., Лонги Э., Ремуцци Г.Долгосрочный клинический и иммунологический профиль пациентов с трансплантацией почки, получающих иммунотерапию мезенхимальными стромальными клетками. Фронт Иммунол. 2018;9:1359.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Erpicum P, Weekers L, Detry O, Bonvoisin C, Delbouille MH, Gregoire C, Baudoux E, Briquet A, Lechanteur C, Maggipinto G, Somja J, Pottel H, Baron F, Jouret F, Beguin Y. Infusion сторонних мезенхимальных стромальных клеток после трансплантации почки: фаза I-II, открытое, клиническое исследование.почки инт. 2019;95:693–707.

    КАС пабмед Google ученый

  • Mudrabettu C, Kumar V, Rakha A, Yadav AK, Ramachandran R, Kanwar DB, Nada R, Minz M, Sakhuja V, Marwaha N, Jha V. Безопасность и эффективность трансплантации аутологичных мезенхимальных стромальных клеток у пациентов, перенесших жизнь трансплантация донорской почки: пилотное исследование. Нефрология (Карлтон, Виктория). 2015;20:25–33.

    КАС Google ученый

  • Reinders ME, de Fijter JW, Roelofs H, Bajema IM, de Vries DK, Schaapherder AF, Claas FH, van Miert PP, Roelen DL, van Kooten C, Fibbe WE, Rabelink TJ.Аутологичные мезенхимальные стромальные клетки, полученные из костного мозга, для лечения отторжения аллотрансплантата после трансплантации почки: результаты исследования I фазы. Стволовые клетки Transl Med. 2013;2:107–11.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Pan GH, Chen Z, Xu L, Zhu JH, Xiang P, Ma JJ, Peng YW, Li GH, Chen XY, Fang JL, Guo YH, Zhang L, Liu LS. Низкие дозы такролимуса в сочетании с донорскими мезенхимальными стволовыми клетками после трансплантации почки: проспективное нерандомизированное исследование.Онкотаргет. 2016;7:12089–101.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Tan J, Wu W, Xu X, Liao L, Zheng F, Messinger S, Sun X, Chen J, Yang S, Cai J, Gao X, Pileggi A, Ricordi C. Индукционная терапия аутологичными мезенхимальными стволовыми клетками при трансплантации почки, связанной с живыми людьми: рандомизированное контролируемое исследование. ДЖАМА. 2012; 307:1169–77.

    КАС пабмед Google ученый

  • McMahon AP.Развитие почки млекопитающих. Curr Top Dev Biol. 2016; 117:31–64.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Рангараджан С., Сунил Б., Фань С., Ван П.С., Каттер Г., Сандерс П.В., Кертис Л.М. Отдельные популяции сохраняющих метку клеток во взрослой почке определяются во времени и демонстрируют расходящиеся региональные распределения. Am J Physiol Renal Physiol. 2014; 307:F1274–82.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Оливер Дж.А., Мааруф О., Чима Ф.Х., Мартенс Т.П., Аль-Аукати К.Почечный сосочек представляет собой нишу для стволовых клеток взрослых почек. Джей Клин Инвест. 2004; 114: 795–804.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Маэсима А., Сакураи Х., Нигам СК. Популяция клеток канальцев почек взрослого человека демонстрирует фенотипическую пластичность, тубулогенную способность и способность к интеграции в развивающуюся почку. J Am Soc Нефрол. 2006; 17: 188–98.

    КАС пабмед Google ученый

  • Humphreys BD, Bonventre JV.Вклад взрослых стволовых клеток в восстановление почек. Нефрол Тер. 2007; 3:3–10.

    КАС пабмед Google ученый

  • Aggarwal S, Grange C, Iampietro C, Camussi G, Bussolati B. Почечные клетки-предшественники CD133(+) человека индуцируют выработку эритропоэтина и ограничивают фиброз после острого повреждения канальцев. Научный доклад 2016; 6: 37270.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Grange C, Moggio A, Tapparo M, Porta S, Camussi G, Bussolati B.Защитный эффект и локализация с помощью оптической визуализации клеток-предшественников CD133+ почек человека в модели острого повреждения почек. Physiol Rep. 2014;2:e12009.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Romagnani P, Remuzzi G. Почечные стволовые клетки CD133+ всегда коэкспрессируют CD24 в ткани почек взрослого человека. Стволовые клетки Res. 2014;12:828–9.

    КАС пабмед Google ученый

  • Шреста С., Сомджи С., Сенс Д.А., Слуссер-Нор А., Патель Д.Х., Сэвидж Э., Гарретт С.Х.Клетки почечных канальцев человека содержат популяции клеток-предшественников CD24/CD133: последствия для регенерации канальцев после повреждения, вызванного токсикантом, с использованием кадмия в качестве модели. Toxicol Appl Pharmacol. 2017; 331:116–29.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ронкони Э., Сагринати К., Анджелотти М.Л., Лаццери Э., Маззинги Б., Баллерини Л., Паренте Э., Бехеруччи Ф., Гаччи М., Карини М., Магги Э., Серио М., Ваннелли Г.Б., Лазаньи Л., Романьяни С., Романьяни П.Регенерация гломерулярных подоцитов почечными предшественниками человека. J Am Soc Нефрол. 2009; 20: 322–32.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Цзян З.З., Лю Ю.М., Ню С., Инь Цз.Ю., Ху Б., Го С.К., Фан И., Ван И., Ван Н.С. Экзосомы, секретируемые стволовыми клетками, полученными из мочи человека, могут предотвратить почечные осложнения диабета I типа у крыс. Стволовые клетки Res Ther. 2016;7:24.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Бехеруччи Ф., Лаццери Э., Лазаньи Л., Романьяни П.Почечные предшественники и детство: от развития к нарушениям. Pediatr Nephrol (Берлин, Германия). 2014;29:711–9.

    Google ученый

  • Чемберс Б.Е., Вингерт Р.А. Почечные предшественники: роль в заболевании почек и регенерации. Стволовые клетки мира J. 2016; 8: 367–75.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Хишикава К., Марумо Т., Миура С., Наканиши А., Мацудзаки Ю., Сибата К., Кохике Х., Комори Т., Хаяси М., Накаки Т., Накаучи Х., Окано Х., Фудзита Т.Leukemia inhibitory factor induces multi-lineage differentiation of adult stem-like cells in kidney via kidney-specific cadherin 16. Biochem Biophys Res Commun. 2005;328:288–91.

    CAS  PubMed  Google Scholar 

  • Hishikawa K, Marumo T, Miura S, Nakanishi A, Matsuzaki Y, Shibata K, Ichiyanagi T, Kohike H, Komori T, Takahashi I, Takase O, Imai N, Yoshikawa M, Inowa T, Hayashi M, Nakaki T, Nakauchi H, Okano H, Fujita T.Musculin/MyoR экспрессируется в популяционных клетках почки и может регулировать их функцию. Джей Селл Биол. 2005; 169: 921–8.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Чаллен Г.А., Бертончелло И., Дин Дж.А., Рикардо С.Д., Литтл М.Х. Популяция со стороны почек демонстрирует многолинейный потенциал и почечную функциональную способность, а также клеточную гетерогенность. J Am Soc Нефрол. 2006; 17: 1896–912.

    КАС пабмед Google ученый

  • Гуделл М.А., Броз К., Паради Г., Коннер А.С., Маллиган Р.С.Выделение и функциональные свойства мышиных гемопоэтических стволовых клеток, реплицирующихся in vivo. J Эксперт Мед. 1996; 183:1797–806.

    КАС пабмед Google ученый

  • Oliver JA, Klinakis A, Cheema FH, Friedlander J, Sampogna RV, Martens TP, Liu C, Efstratiadis A, Al-Awqati Q. Пролиферация и миграция сохраняющих метку клеток почечного сосочка. J Am Soc Нефрол. 2009;20:2315–27.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Маэсима А., Ямасита С., Нодзима Ю.Выявление почечных прогенитороподобных тубулярных клеток, которые участвуют в процессах регенерации почки. J Am Soc Нефрол. 2003; 14:3138–46.

    ПабМед Google ученый

  • Бруно С., Буссолати Б., Гранж С., Коллино Ф., ди Кантоньо Л.В., Эррера М.Б., Бьянконе Л., Тетта С., Сеголони Г., Камусси Г. Выделение и характеристика резидентных мезенхимальных стволовых клеток в клубочках человека. Стволовые клетки Dev. 2009; 18:867–80.

    КАС пабмед Google ученый

  • Буссолати Б., Коллино Ф., Камюсси Г.Клетки CD133+ как терапевтическая мишень при заболеваниях почек. Экспертное мнение по этим целям. 2012;16:157–65.

    КАС пабмед Google ученый

  • Shen WC, Chou YH, Huang HP, Sheen JF, Hung SC, Chen HF. Индуцированные плюрипотентные эндотелиальные клетки-предшественники стволовых клеток ослабляют острое ишемическое повреждение почек и сердечную дисфункцию. Стволовые клетки Res Ther. 2018;9:344.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Иватани Х., Ито Т., Имаи Э., Мацудзаки Ю., Судзуки А., Ямато М., Окабе М., Хори М.Гематопоэтический и негематопоэтический потенциал клеток Hoechst (низкий)/боковой популяции, выделенных из почек взрослых крыс. почки инт. 2004; 65: 1604–14.

    ПабМед Google ученый

  • Ranghino A, Bruno S, Bussolati B, Moggio A, Dimuccio V, Tapparo M, Biancone L, Gontero P, Frea B, Camussi G. Влияние гломерулярных и канальцевых почечных предшественников и производных внеклеточных везикул на восстановление после острого поражение почек. Стволовые клетки Res Ther.2017;8:24.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Рабб Х. Паракринные и дифференцировочные механизмы, лежащие в основе терапии стволовыми клетками поврежденной почки. Am J Physiol Renal Physiol. 2005; 289:F29–30.

    КАС пабмед Google ученый

  • Bussolati B, Lauritano C, Moggio A, Collino F, Mazzone M, Camussi G. Почечные клетки-предшественники CD133(+)/CD73(+) продуцируют эритропоэтин в условиях гипоксии и ингибирования пролилгидроксилазы.J Am Soc Нефрол. 2013; 24:1234–41.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Саллустио Ф., Курчи К., Алоизи А., Тома К.С., Марулли Э., Серино Г., Кокс С.Н., Де Пальма Г., Стази А., Дивелла К., Ринальди Р., Шена Ф.П. Ингибин-А и декорин, секретируемые почечными стволовыми/прогениторными клетками взрослого человека посредством взаимодействия с TLR2, индуцируют регенерацию клеток почечных канальцев. Научный доклад 2017; 7:8225.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Смитс Б., Анджелотти М.Л., Риццо П., Дейкман Х., Лаццери Э., Мурен Ф., Баллерини Л., Паренте Э., Сагринати К., Маззинги Б., Ронкони Э., Бехеруччи Ф., Бениньи А., Стенберген Э., Лазагни Л., Ремуцци Г., Ветцелс Дж., Романьяни П.Почечные клетки-предшественники способствуют гиперпластическим поражениям подоцитопатий и серповидному гломерулонефриту. J Am Soc Нефрол. 2009;20:2593–603.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Кусаба Т., Лалли М., Краманн Р., Кобаяши А., Хамфрис Б.Д. Дифференцированные эпителиальные клетки почек восстанавливают поврежденные проксимальные канальцы. Proc Natl Acad Sci U S A. 2014;111:1527–32.

    КАС пабмед Google ученый

  • Бергер К., Банген Дж.М., Хаммерих Л., Лидтке С., Флоге Дж., Смитс Б., Меллер М.Дж.Происхождение регенерирующих клеток канальцев после острой почечной недостаточности. Proc Natl Acad Sci U S A. 2014;111:1533–8.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Абад М., Мостейро Л., Пантоха С., Каньямеро М., Район Т., Орс И., Гранья О., Мегиас Д., Домингес О., Мартинес Д., Мансанарес М., Ортега С., Серрано М. Перепрограммирование in vivo вызывает тератомы и иПС клетки с признаками тотипотентности. Природа. 2013;502:340–5.

    КАС пабмед Google ученый

  • Тейлор С.Дж., Пикок С., Чаудри А.Н., Брэдли Дж.А., Болтон Э.М.Создание банка ИПСК для HLA-совместимой трансплантации тканей на основе известных типов HLA донора и реципиента. Клеточная стволовая клетка. 2012; 11: 147–52.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Hou P, Li Y, Zhang X, Liu C, Guan J, Li H, Zhao T, Ye J, Yang W, Liu K, Ge J, Xu J, Zhang Q, Zhao Y, Deng H. Pluripotent стволовые клетки, индуцированные из соматических клеток мыши низкомолекулярными соединениями. Science (Нью-Йорк, штат Нью-Йорк). 2013; 341: 651–4.

    КАС Google ученый

  • Wang Y, He J, Pei X, Zhao W. Систематический обзор и метаанализ терапии мезенхимальными стволовыми/стромальными клетками при нарушении функции почек на моделях мелких животных. Нефрология (Карлтон, Виктория). 2013;18:201–8.

    Google ученый

  • Liu X, Cai J, Jiao X, Yu X, Ding X. Терапевтический потенциал мезенхимальных стволовых клеток при остром повреждении почек зависит от времени введения.Акта Биохим Биофиз Син. 2017;49:338–48.

    КАС пабмед Google ученый

  • Бернардо М.Е., Фиббе В.Е. Мезенхимальные стромальные клетки: сенсоры и переключатели воспаления. Клеточная стволовая клетка. 2013;13:392–402.

    КАС пабмед Google ученый

  • Jin X, Lin T, Xu Y. Терапия стволовыми клетками и иммунологическое отторжение на животных моделях. Курр Мол Фармакол. 2016; 9: 284–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Ле Блан К., Таммик С., Розендаль К., Зеттерберг Э., Рингден О. Экспрессия HLA и иммунологические свойства дифференцированных и недифференцированных мезенхимальных стволовых клеток. эксп Гематол. 2003; 31:890–6.

    ПабМед Google ученый

  • Ferreri AJ, Illerhaus G, Zucca E, Cavalli F. Потоки и дефекты при первичной лимфоме центральной нервной системы.Nat Rev Clin Oncol. 2010;7 https://doi.org/10.1038/nrclinonc.2010.1039-c1031; ответ автора https://doi.org/1010:1038/nrclinonc.2010.1039-c1032.

  • Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


    Настройка браузера на прием файлов cookie

    Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

    • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
    • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
    • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
    • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
    • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

    Почему этому сайту требуются файлы cookie?

    Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


    Что сохраняется в файле cookie?

    Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

    Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.