Канцерогенные свойства: Что нужно знать о канцерогенах

Содержание

Что нужно знать о канцерогенах

Природа, или, как часто говорят, «тайна» рака, до конца не раскрыта.

Сложность задач, стоящих перед онкологией и трагичность многих жизненных ситуаций заставляет онкологов, вирусологов, эпидемиологов, специалистов в области молекулярной биологии и других дисциплин активизировать свои усилия, которые бы дали возможность не только обнаружить неизвестные ранее причины возникновения опухолей, но и, зная эти причины, разработать способы их профилактики.

Рак – многопричинное заболевание, при котором масса факторов приводят к единому результату – злокачественному превращению клетки. Ученые заглянули во многие тайны опухолевого роста, они узнали и описали многие свойства раковых клеток, но основная причина перерождения здоровой клетки в злокачественную до сих пор остается невыясненной. Вопрос о причинах возникновения опухоли – один из наиболее острых и спорных в современной медицинской науке. Действие внешней среды на человека, а также внутренние нарушения функций организма создают условия для опухолевого роста. Влияние окружающей среды на человека, как правило, комплексное и, тем не менее, среди большого количества факторов должны быть выделены ведущие и второстепенные. Общепризнано, что 80-90% случаев онкологических заболеваний человека обусловлено действием факторов окружающей среды и особенностями образа жизни. Выявление, уменьшение и, по возможности, прекращение воздействия таких факторов на человека непременно приведет к снижению риска развития опухолей.

Установлено, что рак возникает под влиянием: 1) химических веществ; 2) ионизирующей радиации и ультрафиолетового облучения; 4) вирусов; 5) механических травм и многих других причин. Все эти факторы были названы канцерогенами. Вероятность развития рака определяют не только время и интенсивность действия канцерогенного агента, но и состояние организма.

Канцерогены подстерегают нас в пище и воде, канцерогенным может быть воздух нашего жилища или производственного помещения. Канцерогенные вещества, способные озлокачествить здоровые клетки организма, могут находиться в бытовой химии и парфюмерии. Они могут быть жидкими, газообразными, действовать на нас совершенно невидимыми, определяемыми только специальной аппаратурой излучениями и полями (ионизирующие излучения, электромагнитные поля). Удивительно, но канцерогенное влияние могут оказать даже солнечные лучи, без которых невозможна жизнь на Земле.

Вряд ли в нашей повседневной жизни удастся полностью исключить контакт с канцерогенными веществами, но свести к минимуму их пагубное воздействие в наших силах. Для этого надо лишь иметь представление о том, какие факторы являются опасными и как избежать их воздействия.

Химические канцерогены

То, что некоторые химические вещества способны инициировать возникновение опухоли, известно давно. История изучения влияния некоторых химических веществ на возникновение злокачественных опухолей насчитывает более 200 лет.

Пока до конца неизвестно, каким образом канцерогены заставляют нормальную клетку приобрести свойства, характерные для злокачественного роста, каков тот первый стимул, начальное воздействие, которое делает клетку измененной, еще не опухолевой, но уже «не нормальной». Ответить на этот вопрос, значит, понять природу рака. За последние годы исследователи приблизились к решению этой задачи, раскрыв некоторые механизмы химического канцерогенеза.

Химические канцерогены представляют собой различные по структуре органические и неорганические соединения. Они присутствуют в окружающей среде, являются продуктами жизнедеятельности организма или метаболитами живых клеток.

Некоторые из канцерогенов обладают местным действием, другие оказывают влияние на чувствительные к ним органы независимо от места введения. Существуют канцерогены, активные сами по себе (прямые канцерогены), но большинство нуждается в предварительной активации (непрямые канцерогены). Имеются вещества, которые усиливают воздействие канцерогенов. Воздействие химических канцерогенов на живой организм чрезвычайно разнообразно.

Еще в 1775 году в Англии описаны случаи рака кожи у трубочистов. В то время для чистки дымоходов использовали мальчиков 7 – 8 лет, так как их размеры позволяли пробраться внутрь трубы. Мальчики годами залезали в дымоходы и очищали их от сажи. А в 20-25 лет у многих из них возникал рак кожи мошонки. Затем обратили внимание на рак кожи у дорожных рабочих, рак легких у рабочих газовой промышленности, цветной металлургии, асбестовых предприятий, на опухоли мочевого пузыря у рабочих анилинового производства. Все эти наблюдения заставляли задуматься над тем, почему у представителей различных профессий возникают некоторые формы злокачественных опухолей, какие вещества вызывают рак, почему опухоли возникают после длительного воздействия?

Значительно позже английским исследователям удалось выделить из каменноугольной смолы новое соединение, относящееся к полициклическим ароматическим углеводорода — 3,4-бензпирен, при нанесении на кожу которого, развивается хроническое воспаление с переходом в рак. Это был первый канцероген, структура которого была установлена. Бензпирен считается одним из самых активных и опасных канцерогенов.

Полициклические ароматические углеводороды образуются при сгорании органических веществ в условиях высокой температуры и являются весьма распространенными загрязнителями внешней среды. Они присутствуют в воздухе, в воде загрязненных водоемов, в саже, дегте, минеральных маслах, жирах, фруктах, овощах и злаках.

Канцерогенным действием обладают нитрозамины, ароматические амины и амиды, некоторые металлы, асбест, винилхлорид, афлатоксины и другие химические вещества.

Нитрозамины токсичны, обладают мутагенным и тератогенным воздействием, более 300 из нескольких сотен исследованных вызывают канцерогенный эффект. Во внешней среде нитрозамины в небольших количествах находятся в пищевых продуктах, травах, пестицидах, кормовых добавках, загрязненной воде и воздухе. Кроме этого, они поступают в организм с табаком, косметикой и лекарствами. В готовом виде из внешней среды человек поглощает незначительное количество нитрозаминов. Значительно большее количество нитрозаминов, синтезируется в организме из нитритов и нитратов в желудке, кишках, мочевом пузыре.

Нитриты и нитраты содержатся в злаках, корнеплодах, безалкогольных напитках, добавляются как консерванты в сыры, мясо и рыбу. В последние годы содержание их резко (в 5-10 раз) повысилось в картофеле.

Ароматические амины и амиды находят широкое применение в производстве анилиновых красителей, фармацевтических препаратов, пестицидов. Они приводят к возникновению рака мочевого пузыря. Одно из этих соединений использовалось длительное время в некоторых зарубежных странах как пищевой краситель. Его добавляли к маргарину и сливочному маслу, чтобы они имели свежий летний вид. После установления канцерогенных свойств у этого красителя его запретили.

Асбест – волокнистый силикат, используемый в строительстве. Опасны свободные волокна асбеста. Их обнаруживают в воздухе жилых помещений. Устойчивость к кислотам позволяет использовать асбест при изготовлении виниловых обоев, изделий из бумаги, текстиля, а также напольных покрытий, труб, шпаклевки, замазки. Специалисты считают, что рабочий на асбестовом производстве через 20 лет может заболеть раком легкого. У работающих с асбестом наблюдается повышенная частота рака легкого, гортани, плевры, брюшины, изредка – злокачественных опухолей желудочно-кишечного тракта.

Винилхлорид входит в состав распространенных сортов пластмасс, используемых в медицине, строительстве и при изготовлении товаров широкого потребления. Среди лиц, занятых на производстве винилхлорида, повышена заболеваемость печени, опухолями легкого, лейкозами.

Бензол и его производные

также обладают канцерогенными свойствами. Продолжительный контакт с бензолом способствует возникновению лейкозов.

Канцерогенны — соединения мышьяка, никеля, хрома, кадмия. Длительная работа с этими металлами может привести к возникновению рака верхних дыхательных путей и легких. Мышьяк, кроме этого, вызывает рак кожи, а кадмий, хром и их соединения – рак предстательной железы и мочеполовых органов. Тяжелые металлы поступают в окружающую среду с производственными выбросами и сточными водами промышленных предприятий. Источником их является и автотранспорт. Установлено, что при хранении картофеля в гараже (достаточно частое явление) в корнеплодах увеличивается содержание тяжелых металлов, в частности свинца. Отмечены случаи развития рака анального канала и промежности при употреблении газет в качестве туалетной бумаги. Канцерогенным эффектом обладает свинец, входящий в состав типографской краски.

Опасным канцерогеном является

афлатоксин — токсин плесневого грибка. Это гриб распространен повсеместно, но в условиях жаркого климата в больших количествах выделяет ядовитые вещества. Афлатоксины в больших дозах ядовиты и вызывают гибель животных, а в малых — опухоли печени. Этот грибок может поражать злаки, отруби, муку, орехи. Главная опасность состоит в том, что при термической обработке продуктов, пораженных этим грибком, токсин, который он выделяет в продукт, не разрушается. Заподозрить наличие афлатоксина в продуктах можно по горькому вкусу. Например, орехи начинают горчить.

Развитие науки и производства постоянно приводит к появлению новых химических соединений, обладающих канцерогенными свойствами. Особенно важно знание тех соединений, с которыми приходится сталкиваться человеку.

В этом смысле большой интерес вызывает химический состав пищевых продуктов и соединений, получаемых при различной кулинарной обработке продуктов питания. С характером питания прямо или косвенно связано возникновение рака пищевода, желудка, кишечника, печени, поджелудочной, молочной и предстательной желез, тела матки, яичников и легкого. В пище содержится более 700 соединений, в том числе около 200 полициклических ароматических углеводородов, аминоазосоединения, нитрозамины, афлатоксины и др. Каналы заражения продуктов питания химическими канцерогенами бесконечны. Они могут попасть в пищу из синтетической упаковки, внутренней поверхности консервных банок, с этикеток, на которые расходуется типографская краска. «Нечаянное» заражение возможно на складе или во время транспортировки. Канцерогены могут образовываться во время неправильного хранения и кулинарной обработки продуктов. Содержание канцерогенов в пище повышается при неумеренном использовании азотосодержащих минеральных удобрений и пестицидов, а также при загрязнении ими атмосферного воздуха и питьевой воды.

Наибольшее значение для человека имеет загрязнение пищи полициклическими ароматическими углеводородами, нитрозаминами и их предшественниками (нитритами и нитратами), пестицидами, а на отдельных территориях – афлатоксинами.

Химические канцерогены в организме животных подвергаются интенсивным метаболическим процессам и быстро распадаются, поэтому в свежих мясных и молочных продуктах содержание их невелико. В значительно большем количестве они образуются при кулинарной обработке пищи.

Бензпирен обнаруживают при пережаривании и перегревании жиров, в мясных и рыбных консервах, в копченостях после обработки пищи коптильным дымом.

В одной из сельских зон Польши отмечалась высокая заболеваемость раком желудка. Специалисты заинтересовались обычаями приготовления пищи в этом регионе. Оказалось, что хозяйки растапливают на вместительной сковородке свиное сало, а затем в течение недели или дольше неоднократно подогревают остатки жира и жарят на нем мясо и овощи. При частом нагревании до больших температур на чугунной сковороде свиной жир изменяет свою структуру, образуются вещества, которые обладают канцерогенной активностью и в основном — бензпирен.

Нитрозамины в небольшом количествах содержатся во многих продуктах: копченом, вяленом и консервированном мясе и рыбе, темном пиве, некоторых сортах колбас, сухой и соленой рыбе, маринованных и соленых овощах, пряностях, отдельных молочных продуктах. Обработка коптильным дымом, пережаривание жиров, засолка и консервирование ускоряют образование нитрозаминов. В противоположность этому хранение продуктов при низкой температуре резко замедляет их образование.

Нитриты и нитраты содержатся в продуктах в значительно большем количестве. Пища является основным источником их поступления в организм.

В сельском хозяйстве используются азотсодержащие, калийные и фосфорсодержащие минеральные удобрения. Калийные и фосфорные удобрения не представляют канцерогенной опасности. Опасны азотсодержашие удобрения, которые в организме трансформируются в нитраты, нитриты, а затем в нитрозамины.

Канцерогенным действием обладают также многие пестициды. Большинство пестицидов являются химически стойкими соединениями, хорошо растворимыми в жирах. Благодаря этому они накапливаются в растениях, тканях животных и человека. Применение пестицидов с высоким содержанием нитрозаминов создает определенную опасность для работников сельского хозяйства.

Какие еще факторы могут представлять опасность для человека? Это, в первую очередь пыль, загрязняющая жилье.

Многочисленные исследования показали, что копоть и пыль помещений являются носителями канцерогенных веществ, а пыль, собранная на улице, вызывает злокачественные опухоли у лабораторных животных. Вот почему необходима влажная тщательная уборка помещений. Особую опасность в быту представляет газовая плита. Продукты неполного сгорания газа при отсутствии хорошей вентиляции загрязняют воздух помещений, происходит накопление смолистых продуктов, содержащих все тот же бензпирен.

Канцерогенные соединения, попадая в окружающую среду, вступают в круговорот сложных и многообразных превращений. Они поглощаются и нейтрализуются некоторыми видами бактерий, имеющимися в воздухе, воде, почве, разрушаются под действием ультрафиолетового излучения. Клетки печени человека также могут разрушать канцерогенные вещества, что в значительной степени зависит от особенностей организма и характере питания.

Но для уменьшения степени опасности не следует полагаться на благоприятное стечение естественных факторов, а лучше разрушать канцерогенные вещества и не допускать их выхода во внешнюю среду.

Эндогенные канцерогены

Следует отметить, что помимо канцерогенов, которые поступают в организм человека с воздухом, водой, продуктами питания, существуют вещества, которые образуются в самом организме и обладают высокой канцерогенностью. Это, так называемые, эндогенные канцерогены. В настоящее время уже можно говорить о существовании нескольких классов эндогенных канцерогенов. К ним относятся, в частности, продукты распада и превращения желчных кислот, нарушенного метаболизма тирозина и триптофана. Изучены условия, способствующие образованию этих соединений. Особую роль в этом процессе играют гиповитаминозы, сезонный недостаток аскорбиновой кислоты (витамин С), гормональный дисбаланс, наследственные нарушения аминокислотного обмена. При этом следует принимать во внимание только длительные нарушения метаболизма.

Физические канцерогены

К физическим канцерогенным факторам относятся альфа-, бета-, гамма — и рентгеновское излучения, потоки протонов и нейтронов, ультрафиолетовое излучение, радон, механические травмы.

Ионизирующая радиация обладает универсальным канцерогенным действием, но в патологии человека значение ее немного меньше, чем химических канцерогенов. Основными источниками излучения для населения являются естественный фон, как земной, так и космический, искусственные источники, такие как ядерные испытания в атмосфере, ядерные аварии, ядерные производства, облучение при диагностическом обследовании и лечении.

Не только прямое действие лучей является канцерогенным, но не менее опасным является попадание в организм радиоактивных изотопов. Попав в организм, радий во многом ведет себя подобно кальцию: он проникает в кости и прочно там оседает. Однако, в отличие от кальция разрушает костную ткань. Постепенно накапливаются изменения, ведущие к развитию злокачественной опухоли.

Многочисленные исследования доказали безоговорочное канцерогенное начало ионизирующего излучения. Ионизирующее излучение в высоких дозах вызывает рак у людей, лишь несколько видов опухолей никогда не связывали с ионизирующим излучением. Частота таких злокачественных опухолей возрастает по мере повышения дозы облучения. Действие высокодозного излучения может вести к повреждению клеток и ДНК с последующей гибелью клетки, а низкие дозы могут приводить к мутациям, увеличивающим риск рака. Вполне вероятно, что под удар попадает не только наследственный аппарат клетки, но и обмен веществ, и тогда опухолевая трансформация возникает как бы вторично.

Вызывают определенное беспокойство и дозы излучения, получаемые населением при прохождении различных диагностических процедур. К таким обследованиям относятся проведение маммографии на предмет выявления опухолей молочной железы, компьютерной томографии, радиоизотопных исследований. Надо отметить, что суммарная доза при диагностических исследованиях мала по сравнению с естественным излучением, а преимущества несомненны.

Установлено, что вдыхание воздуха, содержащего радон и его продукты, приводит к воздействию радиоактивного излучения, в основном на клетки бронхиального эпителия. Радон является второй наиболее важной причиной развития рака легкого после курения. В основном, воздействие радона на человека происходит в домах, особенно в пыльных помещениях, где радон оседает на частицы пыли. Повышенный радиационный фон в жилищах особенно опасен для курильщиков; у них вероятность развития опухоли возрастает более чем в 25 раз. Главными источниками радона являются почва, строительные материалы, грунтовые воды.

Старайтесь проверить свое жилье с помощью специалистов на наличие радона в помещениях, где вы живете, и по возможности обезопасить себя.

Теперь обратимся к другому виду радиации — солнечным лучам. Мысль о том, что они могут вызывать рак, кажется кощунственной. Солнце – источник жизни на Земле, а коричневый загар миллионов отдыхающих издавна рассматривался как признак здоровья.

Солнечные лучи — мощный источник различных излучений, среди которых важную роль играет ультрафиолет. В малых дозах ультрафиолет необходим для человеческого организма, но в больших может вызвать серьезные заболевания и даже послужить причиной рака. Накопилось сотни наблюдений, свидетельствующих о том, что солнечная радиация способна вызывать рак кожи у человека. Сейчас можно считать установленной связь между распространением рака кожи, интенсивностью и длительностью воздействия солнечных лучей.

Обычно опухоли возникают на частях тела, незащищенных одеждой, у людей, длительное время находящихся на открытом воздухе, в тех районах и странах, где солнце светит долго и сильно. Опухоли чаще всего развиваются на коже лица, носа, реже на кистях рук. Особо нужно подчеркнуть, что дети, у которых кожа особенно уязвима, подвергаются гораздо большей опасности, чем взрослые.

Для предотвращения развития рака кожи необходимо стараться уменьшить общее воздействие солнца в течение всей жизни, особенно чрезмерное солнечное воздействие и солнечные ожоги.

Необходимо отметить, что неграмотное использование соляриев небезопасно, так как в них человек подвергается УФ излучению, подобному солнечному.

Все сказанное не означает, что нужно отказаться от поездок на юг, от купания в море, пребывания на пляже, просто от солнечных ванн. Подобные запреты не нужны. Нужно разумное, можно сказать, уважительное отношение к солнцу. Наслаждаясь солнышком, теплом, давайте помнить не только о полезном, оздоравливающем действии солнечных лучей, но и о тех неприятностях, которые могут возникнуть в случае злоупотребления ими. Онкологическим больным и лицам, прошедшим лечение по поводу онкологического заболевания, категорически не рекомендуется длительное пребывание на солнце.

Многочисленные электромагнитные поля, возникающие в наших квартирах при работе бытовой техники, компьютеров, радиотелефонов и буквально пронизывающие наше жилище, также небезопасны. Поэтому, чем больше техники в доме, тем выше риск, особенно при непродуманном расположении приборов. По данным ряда американских исследований у детей, проживающих в домах вблизи линий электропередачи, в 2,5 раза выше риск развития лейкемии. Для взрослого населения такой закономерности не выявлено.

Сотовые телефоны и пульты дистанционного управления генерируют электромагнитные поля. Использование мобильной связи и ее возможное отрицательное влияние на здоровье привлекают все большее внимание общественности. Сообщения об увеличении частоты возникновения опухолей головного мозга среди пользователей мобильных телефонов, описание подобных случаев в прессе позволили предположить возможность наличия определенной стимуляции опухолевого роста. Этот факт наряду с возросшим стремлением населения стать абонентами сотовой связи усиливает обеспокоенность среди населения. Излучение от мобильных телефонов не является ионизирующим. Многочисленные эпидемиологические исследования показали отсутствие значительной взаимосвязи между развитием опухолей головного мозга и использованием мобильных телефонов, независимо от длительности пользования и типа телефона.

Несколько слов о травме — грубом механическом повреждении — как одном из способов физического воздействия, который при определенных условиях может приводить к образованию опухолей. Опухоль возникает в зонах, подвергающихся постоянной травматизации, на ожоговых рубцах, рубцующихся хронических язвах. Во всех этих случаях происходит хроническое раздражение, которое считается общим свойством всех видов канцерогенеза.

Риск развития рака многократно возрастает у лиц с грубыми деформирующими ожоговыми и травматическими рубцами на коже и хроническими остеомиелитическими свищами, рак слизистой полости рта – при хронической травме ее кариозными зубами и протезами и др.

Полностью отрицать роль травмы в возникновении злокачественных опухолей нельзя. Просто травма значительно реже вызывает опухоли, чем другие канцерогенные воздействия.

Биологические канцерогены

Вирусы, являющиеся биологическими канцерогенами, так же как химические и физические могут служить внешними сигналами, влияющими на внутренние закономерности и процессы, контролирующие деление клеток в организме.

Всех волнует вопрос, не являются ли опухоли инфекционным заболеванием в полном смысле этого слова? Французский онколог Шарль Оберлинг писал: если бы рак был действительно заразной болезнью, то следовало бы ожидать, что им в первую очередь должны болеть медики – врачи, хирурги, медсёстры, то есть все те, кто постоянно соприкасается с раковыми больными, не принимая каких-либо мер предосторожности. Но рак встречается среди медиков не реже и не чаще, чем среди представителей любой другой профессии. Более того, в отличие от туберкулёза и других заразных болезней он не передаётся членам семьи заболевшего.

Существует группа вирусов (онковирусов), которые долго находятся в латентном состоянии и активируются под воздействием различных факторов, как физических, так и химических. Они заставляют здоровую клетку работать по собственному сценарию. Клетка «забывает» о своих функциях и начинает бешено размножаться.

Сегодня эпидемиологическими исследованиями установлена связь некоторых форм рака у человека с определенной вирусной инфекцией.

Некоторые предраковые процессы, в частности доброкачественные опухоли, возникают под действием вирусов. Кандилома – остроконечная бородавчатая опухоль, располагающаяся на наружных половых органах или вблизи них, представляет собой несомненное вирусное заболевание. Такие заболевание гортани как папилломы, также возникают под действием вируса. Контагиозный моллюск – это опухоли, иногда одиночные, но чаще множественные, располагающиеся на коже, чаще у детей и учащихся. Это серьезное заболевание требует немедленного лечения, так как при длительном существовании может перейти в рак. Заболевание это, бесспорно, вирусного происхождения.

Эти предраковые заболевания, если их предоставить самим себе, не лечить, могут через некоторый промежуток времени стать почвой для возникновения рака.

Определено несколько вирусов, ассоциируемых с опухолями человека.

Это вирусы гепатита В и С, вирус Эпштейн-Барр, вирус герпеса и папилломавирус. Вирус иммунодефицита человека инфицирует и убивает Т-лимфоциты, снижая таким образом, активность иммунной системы. ВИЧ не трансформирует клетки, однако его наличие увеличивает риск развития саркомы Капоши, Неходжкинской лимфомы, и, возможно рака у молодых людей.

Люди, носители этих вирусов, имеют в три, десять раз больше шансов заболеть раком, чем все остальные.

Мы надеемся, что после знакомства с этой брошюрой читатель разделит мнение авторов о том, что присутствие канцерогенов в окружающей среде не свидетельствует о неизбежности возникновения рака. Множество людей живут спокойно, избегая злокачественных опухолей, хотя обитают в том же «море канцерогенов». Несомненно, существует принципиальная возможность предупредить рак. Обнаружить канцерогены — это значит начать борьбу с ними. Канцерогены могут действовать на организм человека в любой период его жизни. Поэтому выявление и устранение возможного воздействия на организм человека различных канцерогенных факторов на протяжении всей его жизни является непременной составляющей профилактики рака.

Бычкова Г.Ю., Трич М.В.

ПРОДУКТЫ, КОТОРЫЕ ПРОВОЦИРУЮТ РАК

О продуктах, которые провоцируют образование раковых клеток и продуктах, обладающих свойством предупреждать перерождение здоровых клеток в злокачественные.

Продукты, которые провоцируют рак:

1. Пищевые добавки «Е», многие из которых обладают сильными канцерогенными свойствами (вызывают рак органов ЖКТ и кожи). Наиболее опасны: Е102, Е123, Е127, Е284, Е 285, Е512, Е574, Е999, Е1200.

2. Нитратные продукты. Нитраты, попадая в организм с ранними овощами-фруктами, проходят через фильтр — печень. Если просто объесться таким салатом, то печень не справится и это приведет к острому отравлению. Если же злоупотреблять нитратами постоянно, то яды будут накапливаться в печени и могут спровоцировать ее рак.

3. Пища, приготовленная на многократно использованном масле, при приготовлении которой образуется один из самых сильных канцерогенов — бензпирен. В первую очередь он пагубно влияет на печень и костный мозг (вызывает лейкемию). Причем бензпирен представляет угрозу для здоровья в любом количестве.

4. Маргарин и майонез из-за их опасных наполнителей (трансжиров). Если употребление этих продуктов превысит 1/4-1/5 всего пищевого рациона, то резко возрастает риск возникновения рака кишечника, молочных желез и простаты.

5. Заплесневелый хлеб, т.к. в нем образуются высокотоксичные яды — афлатоксины, сильные канцерогены, которые, в первую очередь, «бьют» по печени.

6. Колбаса и копчености, т.к. они содержат нитриты, нитрозамины и ряд пищевых добавок, в т.ч. «Е», являющихся канцерогенами. Они могут вызывать опухоли ЖКТ.

7. Печень и жирное мясо, в связи с тем, что именно там накапливается большинство токсинов. Поэтому рекомендуется употреблять такие продукты не более 3-х раз в неделю.

8. Многократно кипяченая вода. В воде, прокипяченной более 4-5 раз, возрастает содержание канцерогенных веществ — диоксинов, которые могут привести к раку груди.

9. Кофе повышает риск возникновения рака мочевого пузыря и поджелудочной железы при ежедневном употреблении более 5-6 чашек (50 г).

10. Алкоголь. Канцерогенные вещества, содержащиеся в алкогольных напитках «бьют» по печени, поджелудочной железе, горлу, глотке и пищеводу.

Перечень продуктов, обладающих свойством предупреждать перерождение здоровых клеток в злокачественные (в порядке уменьшения их эффективности):

1. Морковь и тыква. Содержат бета-каротин, обладающий свойством предупреждать перерождение здоровых клеток в злокачественные (особенно в простате, легких, шейке матки, молочных железах, поджелудочной железе и толстом кишечнике). Ежедневная доза — около 50 г моркови и 200 г тыквы.

2. Зеленый чай и шиповник. Содержат вещество галлат эпигаллокатехина, которое «программирует» гибель раковых клеток. Ежедневная доза — 3-4 чашки зеленого чая или 4-5 чашек запаренного шиповника.

3. Грецкие орехи. Оказывают противораковое действие за счет влияния провитамина А и витамина Е — антиоксиданта, который нейтрализует свободные радикалы кислорода, часто вызывающие рак (профилактическая доза — около 50 г в день).

4. Отруби. Содержат балластные вещества, которые связывают канцерогены в кишечнике и предупреждают возникновение рака кишечника. Ежедневная доза — 35 г.

5. Чеснок. Богат селеном — микроэлементом, который защищает от канцерогенов желудок, толстую кишку, пищевод, ротоглотку, молочные железы и кожу. Ежедневная доза — 1-2 зубчика в день.

6. Красное сухое вино. Обладает противораковым эффектом (прежде всего для почек) за счет большого содержания кверцетина, росверартрола — биофлавоноидов, защищающих клетки от перерождения. Профилактическая доза — 150-200 г в день.

7. Лук. Содержит кверцетин, который подавляет образование злокачественных клеток в молочных железах, предстательной железе, яичниках. Ежедневная доза — 40-50 г.

8. Ярко-красные помидоры. Содержат ликопин — мощный антиоксидант, нейтрализующий свободные радикалы кислорода, часто вызывающие рак. Доза — 2-3 штуки в день.

9. Редис, сельдерей, хрен. Содержат индолы и изотиоцианаты — сильные антиканцерогенные вещества. Доза — 50-60 г этих продуктов.

10. Тунец, лосось, сардины. Богаты витамином D, который подавляет образование сосудов, питающих опухоль, и омега-3 жирными кислотами, которые повышают противоопухолевый иммунитет. Ежедневная доза — 150 г.

Способы выведения канцерогенных веществ из организма.

Накопившиеся в организме канцерогены можно вывести, если активировать работу печени. Для этого нужно перейти на дробное питание (4-5 раз в день). Основа рациона — термически обработанные овощи, фрукты и отруби, которые выполняют роль энтеросорбента.

Еще один простой сорбент — измельченный лист подорожника большого (лучше сухого), который необходимо смешать с медом либо с вареньем (3:1) и принимать по 1 ст. л. 3-4 раза в день между приемами пищи (принимать 2 недели, потом сделать 2-недельный перерыв и повторить).

Можно использовать и яблоки. Вынуть сердцевину с семечками, освободившееся место заполнить смесью отрубей и сахара (2:1) и запечь. Есть такой десерт несколько раз в сутки (можно на протяжении всей жизни).

Нужно помнить, что канцерогены, в основном, накапливаются в жировой ткани. И пока не начнет уменьшаться объем жировой ткани, выведение провокаторов рака невозможно. Поэтому нельзя переедать и необходимо тщательно следить за лишним весом!

У сотен распространенных химических веществ обнаружили канцерогенные свойства — Наука

ТАСС, 21 июля. Медики обнаружили, что около трехсот широко применяемых соединений провоцируют клетки молочных желез женщин вырабатывать больше эстрогена. Это увеличивает риск рака груди, пишут исследователи в научном журнале Environmental Health Perspectives.

«Наше исследование показало, что на концентрацию гормонов в организме женщин могут влиять сотни химикатов, широко применяемых в быту и промышленности. Это же может увеличивать вероятность развития рака. Особенные опасения вызывает множество открытых нами веществ, которые увеличивают концентрацию прогестерона», – рассказала Сью Фентон, один из авторов исследования и научный сотрудник Национального института окружающей среды (США).

Рак груди по числу злокачественных новообразовний у женщин занимает первое место. Каждый год он поражает примерно 2,1 млн женщин и уносит жизни около 627 тыс. пациенток. Почти во всех случаях опухоль начинает расти, когда в организме женщины накапливается много эстрогена, прогестрона и других половых гормонов. Поэтому после операции по удалению новообразований многие пациентки принимают лекарства, которые подавляют выработку этих веществ.

За последние годы стало известно, что определенные вещества из гигиенических и пищевых продуктов, а также промышленных химикатов могут влиять на выработку эстрогена в организме людей и животных. Это, в свою очередь, может повышать вероятность рака груди или повторного появления опухоли.

Руководствуясь подобными соображениями, ученые проследили, как культуры клеток человека реагировали на действие двух тысяч потенциально опасных и токсичных химикатов, внесенных в базу данных американского Агентства по охране окружающей среды (EPA). В результате исследователи выделили те соединения, которые меняли работу генов, связанных с производством эстрогена и других половых гормонов.

Всего ученые нашли 296 таких соединений. Все они широко используются в быту и промышленности. Когда они накапливаются в организме, увеличивается и концентрация эстрогена или прогестерона. Последний – это еще один половой гормон, он способствует развитию рака груди и часто вызывает его повторное появление.

Эти соединения есть в самых разных продуктах, начиная с красок для волос и пестицидов и заканчивая пламегасящими присадками в набивке мебели и различными пищевыми добавками. Фентон и ее коллеги надеются, что дальнейшее изучение этих соединений поможет понять, как именно они помогают выработке эстрогена и прогестерона. Эти сведения, в свою очередь, помогут защитить женщин от повторного появления опухолей, а также снизить вероятность возникновения рака у здоровых пациенток, подытожили ученые.

оценка канцерогенных свойств лекарственных средств

Исследование препаратов на канцерогенность

Вопрос о возможности перехода к клиническим испытаниям фармакологических средств (ФС) с точки зрения его канцерогенной безопасности может решаться на основании краткосрочных скрининговых тестов (КСТ), а не после получения результатов 2-3летних экспериментов по индукции опухолей у животных, которые в случае недостаточной эффективности ФС в клинике могут оказаться излишними.

При отрицательных результатах в КСТ дополнительная оценка на канцерогенность для млекопитающих традиционным методом необходима для лекарств, имеющих структурное сходство с известными канцерогенами или при получении неопределенных или противоречивых результатов. Новые фиксированные комбинации фармакологических средств, планируемые для широкого клинического применения, при структурном сходстве любого из компонентов комбинации с известными канцерогенами, мутагенами или их метаболитами также подвергаются испытанию на млекопитающих.

Канцерогенность: основные положения исследования

КСТ для выявления потенциальной канцерогенности основаны на современных данных о механизмах химического канцерогенеза. Полный объем понятия «канцерогенные соединения» включает в себя все вещества, способные увеличивать в популяции количество опухолей различных локализаций по сравнению с соответствующим контролем. Сюда входят не только полные канцерогены, способные вызывать опухоли без дополнительных воздействий, но также инициирующие агенты, промоторы и коканцерогены.

Процесс химического канцерогенеза в настоящее время условно подразделяют на две стадии: инициацию и промоцию. На первой в генетическом аппарате клетки возникают стойкие изменения; во второй, в основном за счет эпигенетических эффектов, создаются условия для преимущественной пролиферации трансформированных клеток.

На стадии инициации наиболее существенным событием является повреждение ДНК высокореактивными метаболитами канцерогенов, которое приводит к возникновению точечных мутаций, перестановке блоков генов и т.д. Предполагается, что в тех случаях, когда эти события затрагивают протоонкогенные участки, последние могут активироваться и инициировать злокачественную трансформацию клетки. К такому же результату приводит инактивация генов-супрессоров (ангионкогенов). Высокая степень причинной связи между мутагенезом и канцерогенезом, а также высокая частота совпадения канцерогенных и мутагенных свойств среди различных химических соединений привели к созданию многочисленных тестов, в которых показателем предполагаемой бластомогенной активности служит способность вызывать повреждения ДНК, генные и хромосомные мутации.

Промоторы в биологически активных концентрациях не повреждают ДНК, а оказывают плейотропное действие на клетки, изменяя, в частности, структуру и функции клеточных мембран, нарушая проницаемость межклеточных контактов. Соответственно, имеются КСТ предназначеные для выявления этих особенностей.

Одним из интегральных показателей канцерогенной активности агента может служить его способность озлокачествлять клетки в культуре, что используется в ряде КСТ.

Оценку канцерогенных свойств лекарственных средств проводят в соответствии с Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств под редакцией А.Н. Миронова, Н.Д. Бунатяна и др., М., издательский дом «Гриф и К», 2012; ICH – Guidance for Industry S2B Genotoxicity: A Standard Battery for Genotoxicity Testing of Pharmaceuticals.

ДНК-комет тест, краситель – SYBR Green I. ДНК в клетках после обработки 8 мМ этилметансульфонатом

Исследование канцерогенных свойств проводят в соответствии с протоколами ОЭСР по испытанию химических веществ:

451	Исследования канцерогенности
453	Комбинированные исследования хронической токсичности и канцерогенности
478	Генетическая токсикология: тест «доминантной летальности» на грызунах
482	Генетическая токсикология: повреждение и репарация ДНК, незапланированный синтез ДНК в клетках млекопитающих in vitro
487	«Клеточный микроядерный тест» на млекопитающих in vitro

Публикации по теме:

Крышень К.Л., Мужикян А.А., Гайдай Д.С., Заикин К.О., Кательникова А.Е., Самсонов М.Ю., Мухаметшина Э.И., Коноплева Г.Е., Шипаева Е.В., Дмитриева А.А., Шагиахметов Ф.Ш., Попова А.О., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Исследование канцерогенного потенциала нового опиоидного антагониста онделопрана при введении крысам в течение двух лет // Исследования и практика в медицине. – 2019. – 6(2). – C. 58-68. https://doi.org/10.17709/2409-2231-2019-6-2-6
Kryshen K.L., Gaidai D.S., Katelnikova A.E., Muzhikyan A.A., Mukhametshina E.I., Samsonov M.Y., Konopleva G.E., Shipaeva E.V., Dmitrieva A.A., Shagiakhmetov F.S., Popova A.O, Makarova M.N., Makarov V.G. A two-year carcinogenicity study of the new opioid receptor antagonist ondelopran in rats // Toxicology letters. – 2019. – Vol. 314S1 – S305-306. A two-year carcinogenicity study of the new opioid receptor antagonist ondelopran in rats

Крышень К.Л., Мужикян А.А., Гайдай Д.С., Заикин К.О., Кательникова А.Е., Самсонов М.Ю., Мухаметшина Э.И., Коноплева Г.Е., Шипаева Е.В., Дмитриева А.А., Шагиахметов Ф.Ш., Попова А.О., Макарова М.Н., Макаров В.Г. Исследование канцерогенного потенциала нового опиоидного антагониста онделопрана при введении крысам в течение двух лет // Исследования и практика в медицине. – 2019. – 6(2). – C. 58-68. https://doi.org/10.17709/2409-2231-2019-6-2-6
Kryshen K.L., Gaidai D.S., Katelnikova A.E., Muzhikyan A.A., Mukhametshina E.I., Samsonov M.Y., Konopleva G.E., Shipaeva E.V., Dmitrieva A.A., Shagiakhmetov F.S., Popova A.O, Makarova M.N., Makarov V.G. A two-year carcinogenicity study of the new opioid receptor antagonist ondelopran in rats // Toxicology letters. – 2019. – Vol. 314S1 – S305-306. A two-year carcinogenicity study of the new opioid receptor antagonist ondelopran in rats

Окружающая среда, жилище и профилактика рака

Мы живем в океане естественных и искусственных химических веществ. В банке данных химиков сегодня зарегистрированы более 18 млн. химических соединений, причем более 60 тыс. находят широкое применение в многообразных сферах жизни и постоянно используются людьми. Влияние большей части этих химических веществ на человека не изучено. Например, из более чем 100 тыс. химических веществ, выделяемых промышленными предприятиями в окружающую среду, лишь в отношении 1300 известен характер их действия на организм человека. Международное агентство по изучению рака примерно у тысячи веществ зарегистрировало канцерогенные свойства, причем для почти 60 отдельных соединений, применяющихся в быту, промышленности, медицине и сельском хозяйстве, а также производственных условий доказана безусловная канцерогенная опасность для человека. Химические канцерогены поступают в организм человека с атмосферным воздухом, пищей, водой. Основным источником загрязнения атмосферного воздуха являются дымовые выбросы промышленных предприятий, выхлопные газы автомобилей, продукты сгорания тепловых электростанций. Воздух загрязняют также свалки промышленных и бытовых отходов, химчистки, автозаправочные станции, предприятия автосервиса и пр.

Рак может быть профессиональным заболеванием. В таблице1 приведены основные производства, канцерогенная опасность которых для человека четко доказана. Таблица1. Профессиональные вредности, вызывающие рак

Производство	Канцерогены	Локализация рака
Газификация угля	Полициклические углеводороды (ПАУ)	Кожа, мочевой пузырь, легкие
Производство кокса	ПАУ, ароматические амины, фенолы	Легкие, кожа, мочевой пузырь, почки
Выплавка чугуна и стали	ПАУ, формалин, фенол, хром, никель, кадмий	Легкие, желудок, почки, простата
Подземная добыча железной руды	Радон, кремниевая пыль	Легкие
Добыча и переработка асбеста	Асбест	Легкие, плевра, желудок
Очистка никеля	Никель	Полость носа
Алюминиевая промышленность	ПАУ, пек, кристаллический кремний, соединения фтора	Легкие, поджелудочная железа, лейкозы, лимфомы
Резиновая промышленность	ПАУ, сажи, минеральные масла, бензол, нитрозамины	Мочевой пузырь, лейкозы, легкие, головной мозг
Пошив и ремонт обуви	Бензол, хлоруглеводороды, хром	Полость носа, мочевой пузырь, лейкозы
Производство изопропилового спирта	Изопропиловый спирт и сильные кислоты	Полость носа
Нефтехимическое, строительство, типографии, детергенты и др.	Аэрозоли серной кислоты	Гортань, легкие
Производство красок и красителей	Галогенизированные углеводороды, ароматические амины, полихлорированные бифенилы, мышьяк, хром	Мочевой пузырь, легкие
Деревообработка и производство мебели	Древесная пыль	Полость носа, легкие

Кроме рабочих этих предприятий, подвергаются воздействию канцерогенов дорожные рабочие, работники автоинспекции, водители, маляры, работники химчисток, уборщики мусора, работники химических, текстильных и фармацевтических производств и др. Сельскохозяйственные работники могут контактировать с пестицидами и другими канцерогенными агрохимикалиями. Бензин содержит около 2% бензола, который способен вызвать лейкоз, контакт с парами бензина — профессиональная канцерогенная вредность. Примерно в 50 российских городах работают предприятия химической промышленности, в производственных процессах которых образуются диоксины — высокотоксичные вещества, содержащие хлор. Доказано, что очень маленькие дозы диоксинов способны вызывать рак.

Человек постоянно подвергается воздействию так называемых «жилищных» канцерогенов, которые выделяют материалы из пластика, пеноизоляционные материалы, синтетические обои и ковры, мебель из древесно-стружечной плиты, мягкая мебель с поролоном, бытовая химия, асбестовые покрытия. Гранит и другие строительные материалы выделяют радиоактивный газ радон. Материалы, используемые при так называемом «евроремонте», выделяют в воздух формальдегид, фенол, бензол, ксилол, тяжелые металлы и другие токсины. По данным экспертов, концентрация вредных химических веществ в помещениях после евроремонта превышает предельно допустимые концентрации в десятки раз.

На каждом производстве с профессиональными канцерогенными вредностями существует техника безопасности, соблюдение которой обязательно. Работники таких производств должны быть информированы о существующих вредностях и способах индивидуальной защиты, пользоваться соответствующими льготами. Работники производств, подвергающиеся воздействию профессиональных канцерогенов, относятся к группе повышенного онкологического риска и должны больше уделять внимания мерам индивидуальной профилактики рака.

Практические рекомендации:

выбирая жилье, старайтесь, чтобы ваш дом не находился вблизи загрязняющих атмосферу промышленных предприятий и крупных автострад, бытовых и промышленных свалок, чтобы окна квартиры выходили во двор;
если дом находится в зоне загрязнения, на окна можно поставить кондиционеры;
следует проверить, есть ли в квартире материалы, содержащие асбест: изоляция на трубах, электропроводке, печи, бытовых приборах. Если изоляция повреждена и крошится, следует удалить ее. Асбестовые материалы должны покрываться защитным слоем краски;
необходимо проверить содержание радона в воздухе вашего жилья. С этой целью можно обратиться за помощью в органы Госсанэпиднадзора. До 10% жилищ имеют повышенные концентрации радона в воздухе. Иногда источник выделения радона можно устранить, замазав трещины в фундаменте, стенах или полу;
не следует отделывать свою квартиру материалами из пластика, пеноизоляционными материалами. На синтетических обоях и коврах согласно законам электростатики может накапливаться радиоактивная пыль; не стоит приобретать мебель из древесно-стружечной плиты. Такая мебель в течение нескольких десятилетий будет выделять в воздух немалые концентрации токсичных веществ. Не стоит злоупотреблять дезодорантами, освежителями, аэрозолями, чистящими и моющими средствами и т.п.
не следует превращать свою квартиру в склад горюче-смазочных материалов, товаров для садоводства, строительных и бытовых химикалий, пластиковых бутылок, старых газет и другого бытового мусора;
тщательно проветривайте одежду и другие вещи, полученные из химчистки. Химические вещества, используемые для чистки, такие как бензин, толуол, перхлор-, трихлор- и тетрахлорэтилен вызывают злокачественные опухоли у животных и предположительно у человека.

Радиоактивные и токсичные химические вещества скапливаются на частичках пыли. Самый надежный метод очистки помещений — влажная уборка, чем чаще, тем лучше.

Благоприятно влияют на воздух жилищ комнатные растения — они часть живой природы. Воздух в природе очищается не только растениями, но и с помощью ионизации. В помещениях очищающего процесса ионизации нет. Можно рекомендовать пользоваться искусственными ионизаторами воздуха. Важно обеспечить постоянный приток свежего воздуха в помещения. Гигиенисты рекомендуют, что в течение часа в комнате должна происходить смена половины объема воздуха, т.е. за сутки — 12 раз. Ежедневное проветривание помещений — простая и эффективная мера предупреждения вредного воздействия на человека «жилищных» канцерогенов.

Физические излучения Из физических излучений рак может вызывать ионизирующая радиация, ультрафиолет и слабые электромагнитные излучения бытовых приборов. С ионизирующей радиацией современный человек чаще всего сталкивается при рентгеновских медицинских обследованиях и потреблении загрязненных радиоактивными изотопами продуктов. Возможно загрязнение окружающей среды в результате катастроф на атомных электростанция и других ядерных объектах. Например, у детей, проживающих на загрязненных территориях после катастрофы на Чернобыльской АЭС, заболеваемость раком щитовидной железы повысилась в 50 раз.

Намного чаще человек подвергается вредному воздействию ультрафиолетовых лучей, которые вызывают все виды рака кожи: плоскоклеточный, базалиому и меланому.

В последнее время в научной литературе и средствах массовой информации активно обсуждается вредное влияние слабых электромагнитных излучений на здоровье человека. Появилось такое понятие как «магнитный смог». Действительно, нас окружает множество источников электромагнитного излучения: линии электропередач, домашняя электропроводка, компьютеры, телевизоры, холодильники, микроволновые печи, электрические плиты, видеодисплеи, радиотелефоны, музыкальные центры, фены, электробритвы, электрические одеяла, электродрели, святящаяся реклама и пр. Эти блага цивилизации излучают электромагнитные волны, которые в миллионы раз превосходят уровень естественного геомагнитного поля Земли. Первыми забеспокоились американские врачи, обнаружившие, что дети, проживающие в домах вблизи высоковольтных линий электропередач, в 2 раза чаще заболевают лейкозами. В последующем связь между воздействием электромагнитных излучений и развитием рака у человека неоднократно подтверждалась. В Австралии установили, что дети, живущие в районах вокруг телебашен, в 2,5 раза чаще умирают от лейкозов. Чаще заболевали лейкозами работники радаров, телекоммуникаций. В одном исследовании было установлено, что мужчины, пользующиеся электробритвами, в 1,3 раза чаще заболевают лейкозами по сравнению с мужчинами, пользующимися для бритья лезвиями. Появились сообщения о развитии опухолей головного мозга у лиц, часто пользующихся радиотелефонами. В некоторых экспериментальных исследованиях установлено, что электромагнитные излучения бытовых приборов вызывают злокачественные опухоли у лабораторных животных, в других — эти данные не подтверждены. Хотя причинная роль слабых электромагнитных излучений в развитии рака у человека не считается бесспорно доказанной, соблюдать меры предосторожности при работе с ними следует.

Практические рекомендации:

в наше время источник ионизирующей радиации можно найти на свалке, на стройке и т.п., такие случаи описаны; не стоит подбирать незнакомые предметы и приносить их в дом. Прежде чем подвергнуться рентгеновскому обследованию, нужно убедиться в его необходимости;
не следует загорать на солнце больше 30 минут в неделю. Людям, принадлежащим к типу людей со слабо пигментированной кожей, веснушками и рыжими волосами, вообще не нужно подвергать свою кожу действию прямых солнечных лучей. При нахождении под прямыми солнечными лучами нужно пользоваться зонтиками, головными уборами, солнцезащитными очками, защитными кремами от загара. Нельзя загорать с 12 до 15 часов дня. Не рекомендуется посещать солярии, по всей вероятности, вреда от них больше, чем пользы;
соблюдайте меры безопасности при работе с аппаратурой, излучающей электромагнитные волны. В компьютере главная опасность — электромагнитное поле, создаваемое монитором. Гигиенисты считают, что общая продолжительность работы за компьютером для взрослого человека не должна превышать 5 часов в день, для школьников — 30 минут, детей дошкольного возраста — 10 минут. Расстояние от глаз пользователя до экрана монитора должно быть не менее 50см, оптимально — 60-70см. Если в офисе или рабочем кабинете находится несколько компьютеров, то расстояние между рабочими столами должно быть не менее 2 метров, общая площадь на одно рабочее место должна составлять не менее 6 квадратных метров;
держитесь на расстоянии 1,5 метра и дальше от работающего телевизора, микроволновой печи, холодильника, электрического обогревателя и других бытовых приборов. Из спальни необходимо убрать работающую бытовую технику или выключать ее на ночь. Во время сна человек более чувствителен к электромагнитным излучениям. Проветривайте помещения после работы с компьютером, просмотра телевизора, работа этих приборов отрицательно сказываются на ионном составе воздуха.

О.С. Капустина

КАНЦЕРОГЕННЫЕ СВОЙСТВА ГИДРОЛИЗАТОВ КОКОСОВОГО МАСЛА | Noskova

КАНЦЕРОГЕННЫЕ СВОЙСТВА ГИДРОЛИЗАТОВ КОКОСОВОГО МАСЛА

S. Y. Noskova, O. O. Babich, L. S. Dyshlyuk, O. A. Ivina

Аннотация

На предыдущих этапах исследования были получены продукты гидролиза кокосового масла с применением различных ферментов липолитического действия. Показано, что гидролизаты кокосового масла обогащены такими жирными кислотами, как каприновая, лауриновая и стеариновая. Канцерогенность ферментативных гидролизатов кокосового масла изучали c применением теста Эймса, использующего бактерии Salmonella typhimurium в качестве тест объекта. Полученные результаты свидетельствуют об отсутствии у ферментативного гидролизата кокосового масла канцерогенных свойств.

Ключевые слова

гидролизат кокосового масла; канцерогенность; тест Эймса; жирные кислоты

Литература

Kadolich Zh.V. Rastitel’nye masla: svoystva i metody kontrolya kachestva / Zh.V. Kadolich, I.O. Delikatnaya, E.A. Tsvetkova // Potrebitel’skaya kooperatsiya. 2010. № 4(31). S. 78–84.

Pilipenko T.V. Tovarovedenie i ekspertiza pishchevykh zhirov / T.V. Pilipenko. SPb.: Giord, 2006. 384 s.

Effects of coconut (Cocos nucifera L.) protein hydrolysates obtained from enzymatic hydrolysis on the stability and rheological properties of oil-in-water emulsions / Thaiphanit S., Schleining G., Anprung P. // Food hydrocolloids. 2016. Vol. 60, рр. 252–264.

Analiz produktov gidroliza kokosovogo masla fermentom lipoliticheskogo deystviya / Noskova S.Yu., Belova D.D., Zimina M.I., Antoshkina M.V. // Pishchevye innovatsii i biotekhnologii materialy IV Mezhdunarodnoy nauchnoy konferentsii, 2016. S. 88–90.

Saratovskikh E.A. Genotoksichnost’ pestitsidov v teste Eymsa i ikh sposobnost’ k obrazovaniyu kompleksov s DNK / E.A. Saratovskikh, V.M. Glazer, N.Yu. Kostromina, S.V. Kotelevtsev // Ekologicheskaya genetika. 2007. T. V. №3. S. 46–54.

Эндокринная терапия рака молочной железы: канцерогенные эффекты тамоксифена uMEDp

Основным антиэстрогенным препаратом для лечения больных гормонозависимым раком молочной железы (РМЖ) на протяжении многих десятилетий остается тамоксифен. Применение этого селективного модулятора эстрогеновых рецепторов при РМЖ обусловлено конкурентным связыванием с рецептором эстрогена. Между тем, несмотря на доказанную антиэстрогенную активность, тамоксифен характеризуется рядом побочных эффектов, в частности вызывает патологическую пролиферацию эндометрия, включая полипы, гиперплазию и рак тела матки. В статье проанализированы канцерогенные свойства тамоксифена. Необходимы дальнейшие исследования возможности персонализированного подхода к эндокринной терапии РМЖ тамоксифеном в целях снижения риска развития патологических пролиферативных процессов эндометрия. Выделение групп высокого риска развития патологии эндометрия может способствовать снижению риска возникновения серьезных нежелательных явлений на фоне терапии тамоксифеном.

Введение

В настоящее время тамоксифен является стандартом лечения гормонозависимого рака молочной железы (РМЖ) у женщин с сохраненной функцией яичников. На фоне пятилетнего приема препарата риск рецидива снижается на 41%, риск смерти от РМЖ – на 34%. В то же время тамоксифен эффективен при метастатическом РМЖ в пре-, пери- и постменопаузе [1, 2]. Тамоксифен долгое время считался безопасным лекарственным средством с небольшим количеством серьезных побочных эффектов. Однако впоследствии выяснилось, что длительное применение препарата в целях адъювантной терапии РМЖ опасно развитием вторичных злокачественных новообразований. Природа гормональной активности тамоксифена сложна и зависит от многих факторов, в том числе особенностей органа-мишени, уровней эндогенных эстрогенов и фармакогенетики. В основе противоопухолевого действия препарата лежит процесс образования комплекса с эстрогеновым рецептором. Это в свою очередь приводит к угнетению пролиферации опухолевых клеток и, как следствие, уменьшению вероятности рецидивирования и метастазирования гормонозависимой опухоли молочной железы. Установлено, что, несмотря на снижение риска рецидива гормонопозитивного РМЖ, а также риска развития контралатерального РМЖ, тамоксифен увеличивает риск развития опухолей других локализаций более чем в четыре раза. Сказанное особенно актуально для пациенток в постменопаузе, для которых прием тамоксифена в течение пяти лет и более ассоциируется с развитием рака и саркомы матки, характеризующихся неблагоприятным прогнозом [3].

Механизмы тамоксифен-ассоциированного канцерогенеза

Тамоксифен-ассоциированный канцерогенез основан на его эстрогенном, эпигенетическом и генотоксическом влиянии. Эстрогенный механизм характеризуется стимуляцией пролиферации клеток эндометрия, экспрессирующих атипичные варианты рецептора эстрогенов альфа, а также мембранного рецептора GPR30 (GPER, GPER1), активирующего G-белки [4, 5]. Тамоксифен способен оказывать стимулирующее действие на рост клеток при патологии эндометрия за счет частичного агонизма рецепторов эстрогенов альфа или через GPER1, который сверхэкспрессируется после длительного лечения тамоксифеном [5]. Этот процесс способствует активации MMP-2/9, что приводит к трансактивации EGFR. Рецептор GPER также может последовательно активировать MAPK и PI3K/Akt, вызывая экспрессию нескольких генов, связанных с выживанием, пролиферацией, дифференцировкой, миграцией и инвазией клеток. Скорее всего посредством данного механизма реализуется эстрогеноподобный эффект тамоксифена [6].

В научной литературе уже появились данные о корреляции продолжительности гормонотерапии тамоксифеном и экспрессии GPER. Кроме того, тамоксифен способствует ремоделированию цитоскелета и миграции клеток рака эндометрия [7].

Эпигенетический механизм основан на способности тамоксифена вызывать гиперметилирование промотора MGMT (O6-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазы). В результате формируются мутации K-RAS и P53, обусловливающие неблагоприятный прогноз течения опухолей, развившихся на фоне приема тамоксифена [4]. Высокочастотные мутации Р53, которые выступают в качестве промоутеров генов-драйверов спорадических злокачественных новообразований (PTEN и K-RAS), связаны с изменениями в ДНК в виде микросателлитной нестабильности [8].

Данные о том, что Р53-положительные опухоли эндометрия встречаются чаще в группе пациенток, получающих тамоксифен (31,4 против 18,2%; p = 0,05), и реже экспрессируют рецепторы эстрогена (60,8 против 26,2%; p ≤ 0,001), подтверждают эпигенетический механизм тамоксифен-индуцированного канцерогенеза [9]. Тем не менее не исключено, что преимущество в росте и пролиферации имеют клетки эндометрия с уже существующими мутациями [10]. Это объясняет тот факт, что женщины в постменопаузе и женщины с типичными факторами риска, включая ожирение, подвержены более высокому риску развития тамоксифен-ассоциированного рака эндометрия, чем женщины в пременопаузе без факторов риска.

Генотоксический механизм канцерогенного действия тамоксифена основан на образовании производных аддуктов ДНК [4]. Тамоксифен является пролекарством, которое при попадании в организм расщепляется до активных метаболитов N-десметил-тамоксифена, 4-гидрокси-N-десметил-тамоксифена (эндоксифен) и 4-гидрокси-тамоксифена с участием системы цитохрома P450 (CYP) [11]. В ряде исследований в эндометрии обнаруживались полиморфные формы Р450, способные генерировать реактивные метаболиты тамоксифена, которые связываются с ДНК в эндометрии, вызывая генотоксический эффект и соответственно провоцируя развитие рака эндометрия [12].

Результаты исследований противоречивы. Анализ аддуктов ДНК в тканях эндометрия женщин с РМЖ, принимающих тамоксифен в качестве эндокринной терапии, не показал убедительных результатов. Образование аддуктов ДНК в тканях эндометрия было обнаружено на крайне низких уровнях и только у единичных пациентов [10]. Однако S. Shibutani и соавт., а также E.A. Martin и соавт. удалось обнаружить в эндометрии женщин, получавших терапию тамоксифеном, вещества, идентифицированные как транс- и цис-эпимеры R- (N2-дезоксигуанозинил) тамоксифена [13, 14]. Такие реактивные метаболиты могут выявляться в тканях эндометрия, миометрия и молочной железы в небольших количествах даже после однократного приема тамоксифена [15].

Таким образом, описанные механизмы свидетельствуют о том, что тамоксифен является канцерогеном, потенциально способным повышать риск развития метахронных опухолей.

Данные клинических исследований

Частота развития рака эндометрия на фоне пятилетнего применения тамоксифена не превышает 0,3% [16]. Тем не менее, согласно некоторым данным, больные раком эндометрия, индуцированным тамоксифеном, могут иметь более низкие показатели выживаемости [9].

Первые исследования канцерогенного действия тамоксифена на эндометрий появились в конце 1980-х гг., но то были единичные наблюдения или анализ относительно небольших групп больных.

B. Fisher и соавт. в 1998 г. опубликовали данные исследования NSABP-P-1 (National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project P-1 Study) в отношении химиопрофилактики РМЖ. В исследовании тамоксифен снижал риск развития РМЖ почти на 50% у 13 388 рандомизированных женщин (умеренно высокого риска) и в то же время увеличивал риск развития рака эндометрия (отношение рисков (ОР) 2,53; 95%-ный доверительный интервал (ДИ) 1,35–4,97). Повышенный риск развития рака эндометрия имел место преимущественно у женщин в возрасте 50 лет и старше. Во всех наблюдениях рак эндометрия в группе тамоксифена был выявлен на стадии I, случаев смерти от рака эндометрия не зарегистрировано. В данном исследовании не отмечалось увеличения частоты выявления рака печени, опухолей толстой кишки, яичников или других локализаций [17].

В рандомизированном исследовании ATLAS (Adjuvant Tamoxifen: Longer Against Shorter), включавшем 12 894 больных РМЖ, при десятилетнем периоде лечения тамоксифеном также отмечалось увеличение риска развития рака эндометрия (ОР 1,74). Кумулятивный риск развития рака эндометрия в течение 5–14 лет составил 3,1%, риск смерти – 0,4% для женщин, которым была назначена пролонгированная терапия тамоксифеном. В контрольной группе аналогичные показатели составили 1,6 и 2% соответственно (абсолютное увеличение смертности 0,2%). Но в целом клиническое преимущество пролонгированного применения тамоксифена с точки зрения эффективности лечения РМЖ оказалось существенно выше риска побочных эффектов. Максимальную пользу от пролонгированного приема тамоксифена в виде снижения риска смерти от РМЖ на 2,8% получили пациентки в пременопаузе. У них зафиксирован несоизмеримо более низкий риск смерти от рака эндометрия (0,4% у женщин, принимавших тамоксифен десять лет, 0,2% – у тех, кто принимал тамоксифен пять лет) [18].

Увеличение частоты развития рака эндометрия также стало наиболее серьезным побочным эффектом длительного лечения тамоксифеном в исследовании aTTom (adjuvant Tamoxifen – To offer more?). Всего в исследовании участвовало 6934 больных. Анализ результатов исследования проводился дважды: в 2008 и 2013 гг. Первая оценка частоты развития рака эндометрия показала двукратное увеличение показателей при десятилетнем приеме тамоксифена по сравнению с пятилетним (76 против 35 случаев соответственно) [19]. По результатам второго анализа зарегистрировано 102 случая рака эндометрия при десятилетнем лечении и 45 случаев – при пятилетнем (ОР 2,2). Таким образом, при десятилетнем периоде использования препарата риск смерти возрастал (р = 0,02). Смерть от рака эндометрия зафиксирована у 37 (1,1%) и 20 (0,6%) больных соответственно [20]. Очевидно, что продолжительность терапии тамоксифеном достоверно влияет на риск развития рака эндометрия.

В крупном исследовании STAR (Study of Tamoxifen and Raloxifene), проведенном группой по изучению рака молочной железы и колоректального рака NSABP, 19 747 женщин в постменопаузе (средний возраст – 58,5 года) с повышенным риском развития РМЖ получали перорально тамоксифен (20 мг/сут) или антиэстроген ралоксифен (60 мг/сут) в течение пяти лет. В группе больных, принимавших тамоксифен, случаев рака эндометрия зарегистрировано больше, чем в группе ралоксифена (ОР 0,62; 95% ДИ 0,35–1,08). Ежегодная заболеваемость раком тела матки составила 1,99% при приеме тамоксифена и 1,25% при использовании ралоксифена (ОР 0,62; 95% ДИ 0,35–1,08). Кумулятивная заболеваемость в течение семи лет составила 14,7% в группе тамоксифена и 8,1% в группе ралоксифена (р = 0,07). При этом гиперплазия эндометрия, фактор риска развития рака эндометрия, встречалась гораздо чаще в группе тамоксифена, причем разница была статистически значимой (ОР 0,16; 95% ДИ 0,09–0,29). Пациенток, перенесших гистерэктомию по причинам, не связанным со злокачественным новообразованием, в группе ралоксифена было значительно меньше (ОР 0,39; 95% ДИ 0,30–0,50). Примечательно, что в исследовании не описаны клинические исходы гиперплазии эндометрия. Более того, не зафиксировано повышения риска ее трансформации в рак эндометрия. При этом различие между группами пациенток, подвергшихся гистерэктомии по причинам, не связанным с опухолью, вероятно, привело к недооценке истинного риска развития патологии тела матки, ассоциированного с тамоксифеном, и уменьшению значимости различий между группами [21, 22].

В рандомизированное плацебоконтролируемое исследование IBIS-I было включено 7154 женщины как в пременопаузе, так и в постменопаузе в возрасте 35–70 лет с повышенным риском развития РМЖ. Установлено, что риск развития рака эндометрия возрастал в группе тамоксифена по сравнению с группой плацебо в течение первых пяти лет наблюдения (ОР 3,76; 95% ДИ 1,20–15,56). Однако после прекращения лечения риск развития рака эндометрия снижался до нормы (для 5–10-летнего наблюдения ОР 0,64; 95% ДИ 0,21–1,80; для периода наблюдения ≥ 10 лет ОР 1,40; 95% ДИ 0,38–5,61) [23]. Таким образом, кумулятивный канцерогенный эффект тамоксифена очевиден.

Несмотря на некоторую неуверенность в данных о гинекологической токсичности в описанных исследованиях, риск развития рака тела матки можно считать серьезным нежелательным эффектом терапии тамоксифеном. В метаанализе, включавшем 32 исследования тамоксифена в качестве эндокринотерапии РМЖ (n = 52 929), относительный риск развития рака эндометрия у женщин, получавших тамоксифен, составил 2,7 по сравнению с пациентками контрольной группы (ОР 2,70; 95% ДИ 1,94–3,75). Развитие рака эндометрия зафиксировано у больных в 23 исследованиях. Всего зарегистрировано 185 случаев рака эндометрия за средний период наблюдения 5,4 года. Наибольшему риску подвергались пациентки в постменопаузе. Изучение риска развития опухолей других локализаций, кроме РМЖ и рака эндометрия, не показало статистически значимой роли тамоксифена (ОР 1,04; 95% ДИ 0,92–1,17). Согласно данным 16 исследований, небольшое статистически значимое увеличение риска развития опухолей выявлено в отношении желудочно-кишечного тракта (ОР 1,31; 95% ДИ 1,01–1,69). В остальных исследованиях, в том числе единственном крупнейшем испытании (NASBP P-1), не сообщалось о существенном увеличении риска развития опухолей желудочно-кишечного тракта [24].

Один из последних крупных метаанализов S. Mocellin и соавт. был посвящен оценке эффективности химиопрофилактики у 50 927 женщин с повышенным риском развития РМЖ. Ученые проанализировали результаты использования селективных модуляторов эстрогеновых рецепторов (тамоксифена и ралоксифена) и ингибиторов ароматазы (экземестана и анастрозола). В трех исследованиях с участием 22 832 женщин в группе тамоксифена зарегистрировано снижение риска развития РМЖ по сравнению с группой плацебо (ОР 0,68; 95% ДИ 0,62–0,76). Что касается побочных эффектов, в двух исследованиях с участием 20 361 женщины в отличие от плацебо тамоксифен вызывал увеличение частоты нежелательных явлений (ОР 1,28; 95% ДИ 1,12–1,47). В частности, пациентки группы тамоксифена достоверно имели более высокую частоту рака эндометрия (ОР 2,26; 95% ДИ 1,52–3,38) [25].

Согласно имеющимся данным, помимо рака эндометрия тамоксифен ассоциируется с повышением риска развития саркомы матки [26]. Результаты ряда исследований показали, что тамоксифен значительно увеличивает риск развития неэндометриоидных опухолей. Смертность, связанная с этими морфологическими вариантами, в 2,3–5,4 раза выше, чем при эндометриоидном раке тела матки [8, 27].

Большинство сарком, связанных с тамоксифеном, о которых сообщалось в литературе, имели структуру МММТ (злокачественная смешанная мезодермальная опухоль) [28].

Аденофибромы, аденосаркомы и карциносаркомы (злокачественные смешанные мюллеровы опухоли) также были описаны при использовании тамоксифена [29, 30]. Вероятно, существует связь между карциносаркомой матки и терапией тамоксифеном, особенно длительной. Однако не ясно, существует ли подобная корреляция с аденофибромой и аденосаркомой, поскольку зарегистрировано только несколько случаев. Высказывается предположение, что перигландулярная стромальная конденсация, часто обнаруживаемая в полипах эндометрия на фоне лечения тамоксифеном по поводу РМЖ, в ряде случаев может трансформироваться в аденосаркому [31]. Несмотря на это, геномный анализ показал, что нет глобальных достоверных различий между опухолями, индуцированными тамоксифеном, эндометриоидными или неэндометриоидными и опухолями, возникающими у пациенток, не принимающих тамоксифен [32, 33].

Выводы

Итак, очевидно, что увеличение частоты патологических изменений органов репродуктивной сферы у женщин и развитие вторичных опухолей различных локализаций относятся к проявлениям канцерогенного эффекта тамоксифена. Представленные данные могут быть полезны при гинекологическом наблюдении и консультировании во время лечения тамоксифеном пациенток с РМЖ в целях раннего выявления вторичных опухолей женской репродуктивной системы и, возможно, профилактики гинекологического рака у данной группы больных. Однако по-прежнему не решен вопрос выявления групп пациенток с максимальным риском развития патологии эндометрия, что исключает возможность персонализации терапии антиэстрогенами.

Использование тамоксифена при РМЖ, особенно назначение пролонгированной эндокринотерапии или эндокринопрофилактики этим антиэстрогеном, требует тщательного обсуждения всех потенциальных преимуществ и рисков. В силу гинекологической токсичности необходимо найти способ прогнозирования канцерогенных эффектов, определить, какие женщины с наибольшей вероятностью получат максимальную пользу при минимальных побочных эффектах терапии тамоксифеном. Представляется необходимым поиск дополнительных данных для выделения групп больных – кандидатов на этот вид терапии. Важным вопросом остается выбор оптимальной дозы тамоксифена с учетом метаболизма каждой конкретной пациентки.

Таким образом, проблема достижения баланса между вредом и пользой от той или иной терапии активно обсуждается мировым онкологическим сообществом и требует дальнейшего изучения.

Заключение

Тамоксифен характеризуется наличием побочных эффектов, но его клиническая значимость от этого не снижается. Вместе с тем любое потенциальное негативное влияние терапии на общую выживаемость больных при условии, что излечение от гормонопозитивного РМЖ возможно, требует активного выявления жизнеугрожающих нежелательных явлений, таких как вторичные злокачественные новообразования. Это чрезвычайно важно при наблюдении за больными во время или после эндокринотерапии и принятии решений об использовании тамоксифена не только в лечебных, но и профилактических целях.

Несмотря на длительную историю изучения канцерогенных свойств тамоксифена, особенно в отношении развития патологии органов женской репродуктивной системы, способ их предотвращения не найден. Очевидно, что пациентки, принимающие тамоксифен, должны быть проинформированы о рисках гиперплазии эндометрия, рака эндометрия и саркомы матки, а также о любых аномальных вагинальных кровотечениях, кровянистых выделениях из влагалища. Женщины в постменопаузе, принимающие тамоксифен, должны находиться под тщательным наблюдением онкологов и гинекологов.

Необходимо разработать стратегию оценки рисков развития патологии эндометрия у больных РМЖ, получающих терапию тамоксифеном. Подобная тактика предполагает изучение исходного состояния гормонального статуса больных, их индивидуальных, а также структурных и молекулярно-генетических характеристик, особенностей метаболизма препарата.

Информационный бюллетень о рисках, связанных с алкоголем и раком

Рабочая группа МАИР по оценке канцерогенных рисков для людей. Употребление алкоголя и этилкарбамата. Монографии МАИР по оценке канцерогенных рисков у людей 2010; 96: 3-1383.

Рабочая группа МАИР по оценке канцерогенных рисков для людей. Личные привычки и возгорания в помещении. Том 100 E. Обзор канцерогенов человека. Монографии МАИР по оценке канцерогенных рисков у людей 2012; 100 (Pt E): 373-472.

Bagnardi V, Rota M, Botteri E, et al. Употребление легкого алкоголя и рак: метаанализ. Анналы онкологии 2013; 24 (2): 301-308.

[Аннотация PubMed]

Bagnardi V, Rota M, Botteri E, et al. Употребление алкоголя и локальный риск рака: комплексный метаанализ «доза-реакция». Британский журнал рака 2015; 112 (3): 580-593.

[Аннотация PubMed]

Цао Y, Виллетт WC, Римм EB, Штампфер MJ, Джованнуччи EL.Употребление алкоголя от легкого до умеренного, характер употребления алкоголя и риск рака: результаты двух проспективных когортных исследований в США. BMJ 2015; 351: h5238.

[Аннотация PubMed]

Chen WY, Rosner B, Hankinson SE, Colditz GA, Willett WC. Умеренное употребление алкоголя во взрослом возрасте, режимы употребления алкоголя и риск рака груди. JAMA 2011; 306 (17): 1884-1890.

[Аннотация PubMed]

White AJ, DeRoo LA, Weinberg CR, Sandler DP.Потребление алкоголя в течение всей жизни, чрезмерное употребление алкоголя и риск рака груди. Американский эпидемиологический журнал 2017; 186 (5): 541-549.

[Аннотация PubMed]

Нельсон Д.Е., Джарман Д.В., Рем Дж. И др. Смертность от рака, связанная с алкоголем, и потерянные годы потенциальной жизни в Соединенных Штатах. Американский журнал общественного здравоохранения 2013; 103 (4): 641-648.

[Аннотация PubMed]

LoConte NK, Brewster AM, Kaur JS, Merrill JK, Alberg AJ.Алкоголь и рак: Заявление Американского общества клинической онкологии. Журнал клинической онкологии 2018; 36 (1): 83-93.

[Аннотация PubMed]

Hashibe M, Brennan P, Chuang SC, et al. Взаимодействие между употреблением табака и алкоголя и риском рака головы и шеи: объединенный анализ, проведенный Международным консорциумом по эпидемиологии рака головы и шеи. Эпидемиология рака, биомаркеры и профилактика 2009; 18 (2): 541-550.

[Аннотация PubMed]

Wu C, Wang Z, Song X и др. Совместный анализ трех полногеномных ассоциативных исследований плоскоклеточного рака пищевода в китайских популяциях. Nature Genetics 2014; 46 (9): 1001-1006.

[Аннотация PubMed]

Гревал П., Вишванатен, Вирджиния. Рак печени и алкоголь. Клиника болезней печени 2012; 16 (4): 839-850.

[Аннотация PubMed]

Петрик Дж. Л., Кэмпбелл П. Т., Кошиол Дж. И др.Табак, употребление алкоголя и риск гепатоцеллюлярной карциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы: Объединенный проект рака печени. Британский журнал рака 2018; 118 (7): 1005-1012.

[Аннотация PubMed]

Федирко В., Трамасере I, Багнарди В. и др. Риск употребления алкоголя и колоректального рака: общий метаанализ опубликованных исследований и метаанализ зависимости от дозы. Анналы онкологии 2011; 22 (9): 1958-1972.

[Аннотация PubMed]

Чжао Дж., Стоквелл Т., Ремер А., Чикрицс Т.Является ли употребление алкоголя фактором риска рака простаты? Систематический обзор и метаанализ. BMC Cancer 2016; 16 (1): 845.

[Аннотация PubMed]

Махабир С., Лейтцманн М.Ф., Виртанен М.Дж. и др. Проспективное исследование риска употребления алкоголя и почечно-клеточного рака в когорте финских курильщиков-мужчин. Эпидемиология, биомаркеры и профилактика рака 2005; 14 (1): 170-175.

[Аннотация PubMed]

Рашидхани Б., Акессон А, Линдблад П., Волк А.Потребление алкоголя и риск почечно-клеточного рака: проспективное исследование шведских женщин. Международный журнал рака 2005; 117 (5): 848-853.

[Аннотация PubMed]

Ли Дж. Э., Хантер Д. Д., Шпигельман Д. и др. Потребление алкоголя и почечно-клеточный рак в объединенном анализе 12 проспективных исследований. Журнал Национального института рака 2007; 99 (10): 801-810.

[Аннотация PubMed]

Tramacere I, Pelucchi C, Bonifazi M и др.Употребление алкоголя и риск неходжкинской лимфомы: систематический обзор и метаанализ. Анналы онкологии 2012; 23 (11): 2791-2798.

[Аннотация PubMed]

Psaltopoulou T, Sergentanis TN, Ntanasis-Stathopoulos I, et al. Потребление алкоголя и риск гематологических злокачественных новообразований: метаанализ проспективных исследований. Международный журнал рака 2018; 143 (3): 486-495.

[Аннотация PubMed]

GBD 2016 Соавторы по алкоголю.Употребление алкоголя и бремя алкоголя в 195 странах и территориях, 1990–2016 гг .: систематический анализ для исследования глобального бремени болезней, 2016 г. Lancet 2018; DOI: 10.1016 / S0140-6736 (18) 31310-2.

[Аннотация PubMed]

Druesne-Pecollo N, Keita Y, Touvier M, et al. Употребление алкоголя и второй первичный риск рака у пациентов с раком верхних отделов пищеварительного тракта: систематический обзор и метаанализ обсервационных исследований. Эпидемиология, биомаркеры и профилактика рака 2014; 23 (2): 324-331.

[Аннотация PubMed]

Симапивапан П., Болтонг А., Ходж А. В какой степени потребление алкоголя связано с рецидивом рака груди и вторым первичным раком груди ?: Систематический обзор. Обзоры лечения рака 2016; 50: 155-167.

[Аннотация PubMed]

Park SM, Li T, Wu S, et al. Риск второго первичного рака, связанный с преддиагностическим курением, алкоголем и ожирением у женщин с кератиноцитарной карциномой. Эпидемиология рака 2017; 47: 106-113.

[Аннотация PubMed]

Knight JA, Fan J, Malone KE и др. Сочетание употребления алкоголя и курения сигарет: прогностический фактор риска контралатерального рака груди в исследовании WECARE. Международный журнал рака 2017; 141 (5): 916-924.

[Аннотация PubMed]

Турати Ф, Гаравелло В, Трамасере I и др. Мета-анализ употребления алкоголя и рака полости рта и глотки: результаты анализов подгрупп. Алкоголь и алкоголизм 2013; 48 (1): 107-118.

[Аннотация PubMed]

Druesne-Pecollo N, Tehard B, Mallet Y и др. Алкоголь и генетические полиморфизмы: влияние на риск рака, связанного с алкоголем. Lancet Oncology 2009; 10 (2): 173-180.

[Аннотация PubMed]

Сторнетта А., Гвидолин В., Бальбо С. Воздействие спиртового ацетальдегида в полости рта. Раков 2018; 10 (1).pii: E20.

[Аннотация PubMed]

Fan X, Питерс Б.А., Джейкобс Э.Дж. и др. Употребление алкоголя связано с изменением микробиома ротовой полости человека в большом исследовании взрослых американцев. Microbiome 2018; 6 (1): 59.

[Аннотация PubMed]

Канда Дж., Мацуо К., Сузуки Т. и др. Влияние потребления алкоголя с полиморфизмом ферментов, метаболизирующих алкоголь, на риск рака поджелудочной железы на японском языке. Наука о раке 2009; 100 (2): 296-302.

[Аннотация PubMed]

Йокояма А., Омори Т. Генетические полиморфизмы алкогольных и альдегиддегидрогеназ и риск рака пищевода, головы и шеи. Алкоголь 2005; 35 (3): 175-185.

Вартоломей, доктор медицинских наук, Кимура С., Ферро М. и др. Влияние умеренного употребления вина на риск развития рака простаты. Клиническая эпидемиология 2018; 10: 431-444.

[Аннотация PubMed]

Чао С., Хак Р., Каан Б.Дж. и др. Употребление красного вина не связано со снижением риска колоректального рака. Nutrition and Cancer 2010; 62 (6): 849-855.

[Аннотация PubMed]

Рем Дж., Патра Дж., Попова С. Прекращение употребления алкоголя и его влияние на рак пищевода, головы и шеи: объединенный анализ. Международный журнал рака 2007; 121 (5): 1132-1137.

[Аннотация PubMed]

Ахмад Киадалири А, Ярл Дж., Гавриилидис Дж., Гердтам У. Прекращение употребления алкоголя и риск рака гортани и глотки: систематический обзор и метаанализ. PLoS One 2013; 8 (3): e58158.

[Аннотация PubMed]

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки вашего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Влияние гидростатического давления на канцерогенные свойства эпителия

Образец цитирования: Токуда С., Ким Й.Х., Мацумото Х., Муро С., Хираи Т., Мишима М. и др.(2015) Влияние гидростатического давления на канцерогенные свойства эпителия. PLoS ONE 10 (12): e0145522. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522

Редактор: Кьетил Таскен, Университет Осло, НОРВЕГИЯ

Поступила: 11 сентября 2015 г .; Одобрена: 5 декабря 2015 г .; Опубликовано: 30 декабря 2015 г.

Авторские права: © 2015 Tokuda et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в пределах документ и вспомогательные информационные файлы к нему.

Финансирование: Программа финансирования ведущих мировых исследователей нового поколения от Японского общества содействия науке, LS084, http://www.jsps.go.jp/, MF; Грант на научные исследования (B) Японского общества содействия науке, 262

, http://www.jsps.go.jp/, MF.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Взаимосвязь между хроническим воспалением и раком хорошо известна [1]; Эпидемиологические исследования показали, что хроническое воспаление предрасполагает людей к различным типам рака, а воспалительные клетки и медиаторы воспаления, такие как хемокины, цитокины и факторы транскрипции, участвуют в путях, которые связывают воспаление и рак [2–4 ].С другой стороны, также известно, что воспаление увеличивает проницаемость кровеносных сосудов, что впоследствии повышает давление в интерстициальных тканях (закон Старлинга о капиллярах), а повышенное давление интерстициальной жидкости наблюдается в большинстве солидных злокачественных опухолей [5-8] . Однако было только несколько сообщений о влиянии гидростатического давления на культивируемые клетки [6,8,9], а взаимосвязь между повышенным гидростатическим давлением и свойствами клеток, связанными со злокачественными опухолями, менее изучена [7].

В этом исследовании мы исследовали влияние гидростатического давления на культивируемые эпителиальные клетки, выращенные на проницаемых фильтрах. Неожиданно гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны индуцировало расслоение эпителия в клетках почки собаки Madin-Darby (MDCK) I и Caco-2. Влияние гидростатического давления на различные функции эпителиальных клеток, включая полярность клеток, пролиферацию и апоптоз клеток, а также трансэпителиальный транспорт, были дополнительно исследованы в исследовании.

Результаты и обсуждение

Гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны запускает расслоение эпителия в клетках MDCK I

Чтобы исследовать влияние гидростатического давления на эпителий, мы засевали клетки MDCK I (высокоустойчивый штамм клеток MDCK) с плотностью 2 × 10 ⁵ клеток / см ² на проницаемых фильтрах Transwell.Обычно значения трансэпителиального электрического сопротивления (TER) в клетках MDCK I через два дня после посева были выше, чем 1000 Ом · см ², что указывало на формирование сливающихся слоев эпителиальных клеток. Затем мы варьировали количество культуральной среды на апикальной и базальной сторонах, чтобы приложить гидростатическое давление к клеточным листам MDCK I через два дня после посева на фильтры (таблица S1). Между эпителиальными клетками и культуральной средой не было воздуха. Среду для культивирования меняли каждые два дня, и высота поверхности среды не показывала видимых изменений в течение двух дней.

Внутрипросветное давление в мочевыводящих путях и желудочно-кишечном тракте в фазе покоя составляет 5–15 см вод. 4 см вод. Ст. ₂ O) [7]. Следовательно, давление в несколько см вод. Ст. ₂ O от апикальной к базальной стороне считается приложенным к эпителию в нормальных условиях. Напротив, давление интерстициальной жидкости в различных опухолях человека обычно находится в диапазоне 14–54 см вод. Ст. ₂ O [7,10], поэтому считается, что давление в несколько см вод. для нанесения на эпителий в этих условиях.В этом исследовании мы изучили влияние гидростатического давления 0,6 см вод. хотя ситуация с гидростатическим давлением in vivo более сложна, чем условия эксперимента. Интенсивность градиента гидростатического давления (0,6 см вод. Ст. ₂ O) определялась с учетом ограничения по высоте проницаемого фильтра Transwell.

Сначала мы наблюдали клеточные листы MDCK I с помощью сканирующей электронной микроскопии через четыре дня после приложения гидростатического давления (шесть дней после посева) (рис. 1). Плоская поверхность клеточного листа наблюдалась в «апикальном» состоянии, при котором высота средней поверхности на апикальной стороне была примерно на 6 мм выше, чем на базальной стороне (таблица S1). Напротив, мы обнаружили заметно неровную поверхность клеточного листа в «базальном» состоянии, при котором высота средней поверхности на базальной стороне была примерно на 6 мм выше, чем на апикальной стороне.Внимательное наблюдение при большом увеличении показало, что неровная поверхность состоит из поднятых клеток MDCK I (рис. 1C).

Рис. 1. Сканирующая электронная микроскопия и изображения световой микроскопии в вертикальном срезе клеток MDCK I в «апикальных» и «базальных» условиях.

(A) Диаграммы условий культивирования. Клетки MDCK I высевали с плотностью 2 × 10 ⁵ клеток / см ² на проницаемых фильтрах Transwell, и количество культуральной среды на апикальной и базальной сторонах варьировали через два дня после посева на фильтры.(B и C) Сканирующие электронные микрофотографии клеточных листов MDCK I при малом увеличении (B) и большом увеличении (C) через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях. Неровная поверхность клеточного листа наблюдалась в «базальном» состоянии. (D и E) Вертикальный разрез листов клеток MDCK I при малом увеличении (D) и большом увеличении (E). Клетки MDCK I высевали на фильтры и культивировали в «апикальных» и «базальных» условиях в течение четырех дней. Вертикальный срез клеточных листов наблюдали с помощью световой микроскопии, окрашивая толуидиновым синим.Многослойный клеточный лист с множеством приподнятых клеточных скоплений наблюдался в «базальных» условиях. Масштабные линейки = 100 мкм для (B), 10 мкм для (C), 50 мкм для (D) и 20 мкм для (E). A , апикальная сторона; B , базальная сторона.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g001

Для исследования внутренней структуры клеточных листов MDCK I мы наблюдали вертикальный разрез клеточных листов в «апикальных» и «базальных» условиях с помощью света. окрашивание под микроскопом толуидиновым синим.В «апикальном» состоянии наблюдался единственный слой клеточного листа (рис. 1D). Напротив, мы обнаружили многослойный клеточный лист с рядом приподнятых клеточных скоплений в «базальном» состоянии (рис. 1E). Эти результаты показывают, что «базальное» состояние запускает расслоение эпителия в клетках MDCK I.

Считается, что в «базальном» состоянии разница в высоте средних поверхностей между апикальной и базальной сторонами действует как гидростатическое давление 0,6 см вод. вызвать расслоение эпителия в клетках MDCK I.Однако большее количество культуральной среды на базальной стороне («базальное» состояние, 2200 мкл против «апикального» состояния, 1200 мкл) или меньшее количество культуральной среды на апикальной стороне в «базальном» состоянии («базальное» состояние, 120 мкл по сравнению с «апикальным» состоянием, 960 мкл) также потенциально способствует расслоению эпителия в клетках MDCK I. Чтобы изучить влияние количества культуральной среды на эпителиальную стратификацию, клетки MDCK I культивировали в условиях, при которых культуральная среда как с апикальной, так и с базальной сторон была либо увеличена (условие «Увеличение»), либо уменьшена («Уменьшение». условие) (таблица S1).Вертикальный разрез клеточных листов наблюдали с помощью световой микроскопии (рис. 2A и 2B). В условиях «увеличения» наблюдался один слой клеточного листа, аналогичный слою в «апикальном» состоянии (рис. 2A), что указывает на то, что увеличение культуральной среды на базальной стороне не вызывает стратификации эпителия, когда культура среда не уменьшена на апикальной стороне. Напротив, мы обнаружили небольшую степень расслоения эпителия под условием «Уменьшение» (рис. 2А). Чтобы количественно оценить степень расслоения эпителия, мы подсчитали количество клеток по вертикальным линиям, проведенным с интервалом 20 мкм на вертикальном срезе клеточных листов MDCK I (индекс стратификации; S1 фиг.).Индекс стратификации в условиях «Уменьшение» был значительно выше, чем в «Апикальном» состоянии (рис. 2С).

Рис. 2. Изображения под световым микроскопом в вертикальных срезах клеток MDCK I, клеток MDCK II и клеток Caco-2 при различных условиях гидростатического давления.

(A) Вертикальный разрез листов ячеек MDCK I. Культуральная среда как с апикальной, так и с базальной сторон была увеличена в условиях «Увеличение» и уменьшена в условиях «Уменьшение».Небольшая степень расслоения эпителия наблюдалась при условии «Уменьшение». (B) Вертикальный разрез листов ячеек MDCK I. Культуральная среда с апикальной стороны была почти удалена, и гидростатическое давление от базальной к апикальной стороне было приложено (условие «HP +») или не приложено (условие «HP-») к клеточным листам MDCK I. Стратификация эпителия наблюдалась в состоянии «HP +», тогда как при условии «HP-» почти не было никаких признаков расслоения эпителия. (C) Индекс стратификации при условиях (A) и (B).Степень расслоения эпителия (индекс стратификации) определяли количественно, как описано в Материалах и методах . * p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с «апикальным» состоянием. (D и E) Вертикальный разрез клеточных листов MDCK II при малом увеличении (D) и большом увеличении (E). Клетки MDCK II высевали на фильтры и культивировали в «апикальных» и «базальных» условиях в течение четырех дней. Эпителиальная стратификация не наблюдалась в «апикальных» и «базальных» условиях.(F и G) Вертикальный разрез листов клеток Caco-2 при малом увеличении (F) и большом увеличении (G). Клетки Caco-2 высевали на фильтры и культивировали в «апикальных» и «базальных» условиях в течение восьми дней. Многослойный клеточный лист наблюдался в «базальных» условиях. (H) Индекс стратификации в клетках MDCK II и Caco-2. ** p <0,01 по сравнению с «апикальным» состоянием в соответствующих клетках. Верхняя сторона - апикальная, а нижняя - базальная. Масштабные линейки = 20 мкм для (A), (B), (D) и (F) и 10 мкм для (E) и (G).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g002

Небольшое количество культуральной среды на апикальной стороне образует вогнутый мениск из-за адгезии между культуральной средой и внутренней стенкой чашки фильтра. Считается, что поверхностное натяжение вогнутого мениска действует как физическая сила, подтягивающая культуральную среду, что может привести к расслоению эпителия в клетках MDCK I. Чтобы подтвердить эффекты небольшого количества культуральной среды на апикальной стороне, мы культивировали клетки MDCK I в условиях, в которых культуральная среда на апикальной стороне была практически исключена и применялось гидростатическое давление от базальной к апикальной стороне (‘ HP + ‘) или не применяется (условие’ HP- ‘) к листам ячеек MDCK I (таблица S1).Вертикальный разрез клеточных листов наблюдали с помощью световой микроскопии (рис. 2В). В состоянии «HP-» практически не было признаков расслоения эпителия в клеточном листе MDCK I. Напротив, многослойный клеточный лист наблюдался в условиях «HP +», хотя индекс стратификации был ниже, чем в «базальном» состоянии (рис. 2С). Эти результаты показывают, что гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны запускает эпителиальную стратификацию в клетках MDCK I, а небольшое количество культуральной среды на апикальной стороне также вызывает умеренную степень расслоения эпителия.

Гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны вызывает расслоение эпителия в клетках Caco-2, но не в клетках MDCK II

Чтобы выяснить, является ли расслоение эпителия под действием гидростатического давления явлением, специфичным для клеток MDCK I, мы исследовали влияние гидростатического давления на расслоение эпителия в клетках MDCK II (штамм с низким сопротивлением клеток MDCK) и Caco-2. клетки (клетки карциномы толстой кишки человека). Поскольку скорость роста клеток Caco-2 была ниже, чем скорость роста клеток MDCK, в клетках Caco-2 в течение восьми дней применялось гидростатическое давление.В клетках MDCK II не было обнаружено явной эпителиальной стратификации в «апикальном» и «базальном» состоянии (рис. 2D, 2E и 2H). Напротив, многослойный клеточный лист наблюдался в случае клеток Caco-2 в «базальных» условиях (рис. 2F, 2G и 2H). Эти результаты показывают, что стратификация эпителия, вызванная гидростатическим давлением от базальной к апикальной стороне, не является специфическим явлением для клеток MDCK I, а также встречается в клетках Caco-2, и реакция на гидростатическое давление варьируется в зависимости от типов клеток.

Динамика и обратимость расслоения эпителия гидростатическим давлением

Затем мы исследовали динамику стратификации эпителия под действием гидростатического давления в клетках MDCK I. Мы прикладывали гидростатическое давление от базальной к апикальной стороне к клеточным пластинам MDCK I через два дня после посева на фильтры, а вертикальное сечение клеточных пластов наблюдали на 2-й день и 1–12 дней после приложения гидростатического давления (3–14 дни. ) (Рис. 3A). Клетки MDCK I показали постепенное развитие эпителиальной стратификации со временем, и индекс стратификации последовательно увеличивался в течение 12 дней во время приложения гидростатического давления (рис. 3A и 3C).

Рис. 3. Динамика и обратимость расслоения эпителия под действием гидростатического давления.

(A) Вертикальный разрез листов ячеек MDCK I. Гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны прикладывалось к клеточным пластинам MDCK I через два дня после посева на фильтры, а вертикальное сечение клеточных пластов наблюдалось на 2-й день и 1–12 дней после приложения гидростатического давления (дни 3–12). 14). Клетки MDCK I со временем демонстрировали постепенное развитие эпителиальной стратификации.(B) Обратимость расслоения эпителия гидростатическим давлением. Гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны прикладывалось к клеточным листам MDCK I в течение четырех дней, а затем градиент гидростатического давления устранялся путем увеличения культуральной среды на апикальной стороне. (C) Индекс стратификации при условиях (A) и (B). Верхняя сторона — апикальная, а нижняя — базальная. Масштабные линейки = 20 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g003

Мы также исследовали обратимость расслоения эпителия под действием гидростатического давления. Мы прикладывали гидростатическое давление от базальной к апикальной стороне к клеточным листам MDCK I в течение четырех дней, а затем градиент гидростатического давления был устранен путем увеличения культуральной среды на апикальной стороне. Один слой клеточного листа с несколькими многослойными областями наблюдался через два дня после устранения градиента гидростатического давления (рис. 3B и 3C), что указывает на обратимость эпителиальной стратификации под действием гидростатического давления.

Влияние гидростатического давления на полярность ячейки

Для детального изучения стратификации эпителия под действием гидростатического давления мы наблюдали клетки MDCK I с помощью просвечивающей электронной микроскопии через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях (рис. 4A – 4C). В «апикальном» состоянии мы наблюдали один слой клеток MDCK I, который имел короткие и редкие микроворсинки на апикальных клеточных мембранах, что согласуется с предыдущим исследованием [11] (рис. 4A).Напротив, расслоение эпителия, наблюдаемое в «базальном» состоянии, показало наличие ряда полостей в многослойных клеточных листах клеток MDCK I. Интересно, что мы обнаружили структуры микроворсинок на поверхности полостей, а также на апикальных клеточных мембранах самого внешнего клеточного слоя. Внимательное наблюдение за полостями при большом увеличении показало, что плазматические мембраны между соседними клетками слились непосредственно под поверхностью полости (рис. 4B и 4C).Поскольку слияние плазматических мембран между соседними клетками является характерной структурой плотных контактов (TJs) на микрофотографиях просвечивающего электронного микроскопа [12], вероятно, что TJs образовывались между соседними клетками, окружающими полости внутри многослойного эпителия.

Рис. 4. Просвечивающая электронная микроскопия и электронная микроскопия при замораживании клеток MDCK I в «апикальных» и «базальных» условиях.

(A) Электронные микрофотографии в просвечивающем свете в вертикальном сечении листов клеток MDCK I при малом увеличении в «апикальных» и «базальных» условиях.Клетки MDCK I наблюдали через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях. Полости наблюдались внутри многослойных клеток MDCK I в «базальном» состоянии. Масштабная линейка = 5 мкм. (B) Просвечивающая электронная микрофотография в вертикальном разрезе клеточных листов MDCK I при большом увеличении в «базальном» состоянии. Структура микроворсинок наблюдалась на поверхности полостей и апикальных клеточных мембранах самого внешнего клеточного слоя. Масштабная линейка = 1 мкм. (C) Увеличенное изображение в области, ограниченной белой линией на микрофотографии просвечивающего электронного микроскопа (B).Плазматические мембраны между соседними клетками сливались непосредственно под поверхностью полости ( стрелки, ). Масштабная линейка = 1 мкм. (D) Электронные микрофотографии замороженных трещин в боковой проекции клеток MDCK I в «апикальном» состоянии при малом увеличении (левая панель) и большом увеличении (правая панель). Пряди TJ наблюдались непосредственно под микроворсинками (, стрелка ). Масштабные полосы = 5 мкм для левой панели и 200 нм для правой панели. (E) Электронные микрофотографии замороженных трещин в боковой проекции клеток MDCK I в «базальном» состоянии при малом увеличении (верхняя левая панель), увеличенное изображение в области, ограниченной белой линией на верхней левой панели (верхняя правая панель), а также увеличенные изображения в областях, ограниченных белыми линиями в верхней правой панели (нижние панели).Нити TJ наблюдались непосредственно под поверхностью полости внутри многослойных клеток MDCK I ( стрелки ). Масштабные линейки = 5 мкм для верхней левой панели, 1 мкм для верхней правой панели и 200 нм для нижних панелей. м , микровиллы; n , ядро; *, полость.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g004

Эпителиальные клетки прикрепляются друг к другу через соединительные комплексы, и TJs расположены в самой апикальной части комплексов на границе между апикальной и базолатеральной клетками. мембраны [12,13].На электронных микрофотографиях трещин при замораживании TJ выглядят как непрерывные анастомозирующие нити частиц (нити TJ) [14]. Чтобы подтвердить, является ли слияние плазматических мембран вокруг полостей, наблюдаемых на просвечивающих электронных микрофотографиях, TJ или нет, мы наблюдали клеточные листы MDCK I с помощью электронной микроскопии замораживания-разрушения через четыре дня после культивирования в « апикальных » и « базальных » условиях. (Рис. 4D и 4E). В «апикальном» состоянии нити TJ наблюдались непосредственно под микроворсинками на боковой проекции клеток MDCK I на электронных микрофотографиях излома-замораживания (рис. 4D).Напротив, мы наблюдали многослойные клетки MDCK I с рядом полостей в «базальном» состоянии, и нити TJ иногда обнаруживались непосредственно под поверхностью полости (рис. 4E). Эти результаты показывают, что полости с микроворсинками и TJs вокруг их поверхностей формируются внутри многослойного эпителия, индуцированного гидростатическим давлением от базальной к апикальной стороне в клетках MDCK I. Эти результаты также предполагают, что клетки MDCK I, окружающие полости, обладают свойством апикально-базальной полярности с поверхностью полости в качестве апикальной стороны.

Локализация белков TJ в многослойном эпителии, индуцированная гидростатическим давлением

В настоящее время многие белки идентифицированы как компоненты TJ, такие как каркасный белок zonula occludens-1 (ZO-1) [15] и интегральные мембранные белки окклюдин [16] и клаудины [17]. Чтобы подтвердить локализацию белков TJ в межклеточных контактах вокруг полостей, присутствующих в многослойном эпителии, мы исследовали локализацию ZO-1 в клетках MDCK I через четыре дня после культивирования под «апикальным» и «базальным». условия с помощью иммунофлуоресцентной микроскопии (рис. 5).В «апикальном» состоянии сигналы ZO-1 были сконцентрированы в наиболее апикальных областях межклеточных контактов со слабыми сигналами вдоль латеральных мембран в клетках MDCK I (рис. 5A), что согласуется с предыдущими исследованиями [18–18]. 20]. Напротив, сигналы ZO-1 были обнаружены внутри многослойного эпителия, а также на межклеточных контактах самого внешнего клеточного слоя (Рис. 5B). В трехмерных изображениях, построенных путем объединения конфокальных изображений сканирования, замкнутые линии сигналов ZO-1 были обнаружены в многослойном эпителии в «базальном» состоянии (рис. 5E и S1 Movie).Сферическое окрашивание F-актина также наблюдалось внутри многослойного эпителия в «базальном» состоянии (фиг. 5D), что, как полагали, представляет собой сигналы F-актина микроворсинок, наблюдаемые при электронной микроскопии. Мы также исследовали локализацию клаудина-3 и окклюдина в клетках MDCK I (рис. 6A-6D). Сигналы клаудина-3 и окклюдина также наблюдались в многослойном эпителии в «базальном» состоянии. Эти результаты показывают, что белки TJ, включая ZO-1, клаудин (ы) и окклюдин, локализуются в TJ в клетках MDCK I, окружающих полости.

Рис. 5. Локализация ZO-1 и F-актина в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I.

(A и B) Иммунофлуоресцентная микроскопия для ZO-1 и F-актина в плоскости оси z в «апикальных» (A) и «базальных» (B) условиях в клетках MDCK I. Сигналы ZO-1 наблюдались в многослойных клетках MDCK I в «базальных» условиях ( стрелки ). A , апикальная сторона; B , базальная сторона. (C и D) Иммунофлуоресцентная микроскопия для ZO-1 и F-актина в плоскости xy в «апикальных» (C) и «базальных» (D) условиях в клетках MDCK I.На среднем уровне многослойных клеток MDCK I в «базальном» состоянии линии сигналов ZO-1 наблюдались при сферическом окрашивании F-актина ( стрелки ). (E) Трехмерные изображения сигналов ZO-1 в многослойных клетках MDCK I в «базальном» состоянии. Сигналы ZO-1 в «базальном» состоянии в клетках MDCK I регистрировались с помощью конфокальной микроскопии, и трехмерные изображения были построены путем интеграции конфокальных сканирующих изображений. Замкнутые линии сигналов ZO-1 были обнаружены внутри многослойных клеток MDCK I ( стрелки ).Масштабные линейки = 10 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g005

Рис. 6. Локализация клаудина-3, E-кадгерина, окклюдина и Na ⁺ / K ⁺ АТФазы под «апикальной» и «Базальные» условия в клетках MDCK I и барьерная функция TJ вокруг полостей в многослойном эпителии.

(A и B) Иммунофлуоресцентная микроскопия клаудина-3 и E-кадгерина в плоскости оси z в «апикальных» (A) и «базальных» (B) условиях в клетках MDCK I.Сигналы клаудина-3 наблюдались в многослойных клетках MDCK I в «базальных» условиях ( стрелки ). (C и D) Иммунофлуоресцентная микроскопия для окклюдина и Na ⁺ / K ⁺ АТФазы в плоскости оси z в «апикальных» (C) и «базальных» (D) условиях в клетках MDCK I. Сигналы окклюдина наблюдались внутри многослойных клеток MDCK I в «базальном» состоянии ( стрелки ). (E и F) Эксперимент с индикатором с использованием реагента для первичного аминного биотинилирования проводили на клетках MDCK I, культивируемых в «апикальных» (E) и «базальных» (F) условиях.Реагент биотинилирования вводили в базальную часть в течение 10 мин, и связанный биотин детектировался стрептавидином. Реагент биотинилирования, по-видимому, останавливался на TJ вокруг полостей в многослойном эпителии в «базальном» состоянии ( стрелки ). Масштабные линейки = 10 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g006

Мы также исследовали локализацию ZO-1 и F-актина в клетках Caco-2 (S2 фиг.). Сигналы ZO-1 и сферическое окрашивание F-актина были обнаружены в многослойном эпителии в «базальном» состоянии.Эти результаты предполагают, что образование полостей с микроворсинками и TJs вокруг их поверхностей также происходит в клетках Caco-2 внутри многослойного эпителия, индуцированного гидростатическим давлением от базальной к апикальной стороне.

Барьерная функция TJ вокруг полостей в многослойном эпителии

Эпителии действуют как барьер для внешней среды, а TJs, как известно, регулируют перемещение веществ по параклеточному пути [21,22]. Чтобы исследовать, действуют ли TJ в межклеточных контактах вокруг полостей в качестве барьера в параклеточном пути, мы провели эксперимент с индикатором с использованием реагента для биотинилирования, реагирующего с первичными аминами, который маркирует белки и первичные аминосодержащие макромолекулы на поверхности клетки [23]. ].Реагент биотинилирования вводили в базальный раствор на 10 мин, и связанный биотин определялся стрептавидином. В «апикальном» состоянии реагент биотинилирования, по-видимому, диффундирует по межклеточному пространству с базальной стороны, но останавливается на уровне TJ, представленных концентрированными сигналами ZO-1 (рис. 6E). Напротив, реагент биотинилирования не только останавливался на TJ в самом внешнем слое клетки, но также останавливался на TJ вокруг полостей в многослойном эпителии в «базальном» состоянии (рис. 6F).Эти результаты показывают, что TJs в межклеточных контактах вокруг полостей внутри многослойного эпителия также проявляют функцию параклеточного барьера.

Влияние гидростатического давления на пролиферацию клеток

Предполагается, что в многослойном эпителии общее количество клеток в чаше фильтра увеличивается по сравнению с таковым в однослойном эпителии. Чтобы подтвердить эту возможность, мы обработали клетки трипсином на фильтрах и подсчитали количество клеток с помощью счетной камеры в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I и MDCK II.Клетки MDCK I, засеянные с плотностью 2 × 10 ⁵ клеток / см ² на фильтрах, были увеличены до плотности 6,51 × 10 ⁵ клеток / см ² через два дня после посева на фильтры (рис. 7A). ). В «апикальном» состоянии плотность клеток MDCK I дополнительно увеличивалась на 38% в течение четырех дней культивирования (8,95 × 10 ⁵ клеток / см ²). Напротив, плотность клеток MDCK I была дополнительно увеличена на 232% в течение четырех дней культивирования в «базальных» условиях (21.60 × 10 ⁵ клеток / см ²). Плотность клеток MDCK I через четыре дня после культивирования в условиях «Увеличение», при которых не было разницы в высоте поверхности среды между апикальной и базальной сторонами, была сопоставима с таковой в «Апикальном» состоянии (8,62 × 10 ⁵ клеток / см ²) (S3 Рис). С другой стороны, клетки MDCK II, засеянные с плотностью 2 × 10 ⁵ клеток / см ² на фильтрах, были увеличены до плотности 8.14 × 10 ⁵ клеток / см ² через два дня после посева, и плотность дополнительно увеличивалась примерно на 10% в течение четырех дней культивирования независимо от «апикального» или «базального» состояния. Эти результаты показывают, что количество клеток показывает увеличение гидростатического давления от базальной к апикальной стороне в клетках MDCK I, но не в клетках MDCK II, что согласуется с гипотезой о том, что количество клеток увеличивается в многослойном эпителии.

Рис 7.Влияние гидростатического давления на пролиферацию клеток.

(A) Влияние гидростатического давления на количество клеток в клетках MDCK I и MDCK II, культивируемых на фильтрах. Клетки MDCK I и MDCK II высевали с плотностью 2 × 10 ⁵ клеток / см ² на фильтры, и количество клеток подсчитывали с помощью счетной камеры после трипсинизации клеток в каждый момент времени. Плотность клеток MDCK I в «базальном» состоянии была значительно выше, чем в «апикальном» состоянии.(B) Анализ 5-бром-2’-дезоксиуридина (BrdU) в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I. Анализ BrdU выполняли, как описано в Материалах и методах . Верхняя сторона является апикальной стороной, а нижняя сторона — базальной стороной в плоскости оси z. Масштабные линейки = 20 мкм. (C) Соотношение BrdU-положительных клеток в клетках MDCK I и MDCK II, культивируемых на фильтрах. Рассчитывали отношение количества BrdU-положительных клеток к количеству DAPI-положительных клеток. Соотношение BrdU-положительных клеток в «базальном» состоянии было значительно выше, чем в «апикальном» состоянии в клетках MDCK I.(D) Плотность BrdU-положительных клеток в клетках MDCK I и MDCK II, культивируемых на фильтрах. Плотность BrdU-положительных клеток в «базальном» состоянии была более чем в четыре раза выше, чем в «апикальном» состоянии в клетках MDCK I. ** p <0,01 по сравнению с «апикальным» состоянием в соответствующие дни.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g007

Затем мы выполнили анализ 5-бром-2’-дезокси-уридина (BrdU) для оценки пролиферации клеток.Мы вводили BrdU в течение 1 часа, и клетки, включающие BrdU в свою ДНК вместо тимидина, были обнаружены с помощью моноклональных антител против BrdU [24] (рис. 7B). Затем мы подсчитали общее количество клеток, окрашенных 4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI), и количество BrdU-положительных клеток, а затем рассчитали отношение количества BrdU-положительных клеток к общему количеству BrdU-положительных клеток. сотовый номер. В клетках MDCK I соотношение BrdU-положительных клеток составляло 7,73 ± 0,75% через два дня после посева, и соотношение было немного увеличено на 4 день и восстановилось до уровня 2 дня на 6 день (день 4 ‘Апикальный’, 14.30 ± 0,64%; день 6 «Апикальный», 8,05 ± 0,39%) (Рис. 7C). Напротив, соотношение BrdU-положительных клеток в «базальном» состоянии было значительно выше, чем в «апикальном» состоянии (4-й день «базальный», 22,90 ± 1,53%; 6-й день «базальный», 16,63 ± 0,27%). . Эти результаты показывают, что гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны способствует пролиферации клеток в клетках MDCK I. Мы также рассчитали количество BrdU-положительных клеток на единицу площади, поскольку плотность клеток MDCK I в «базальном» состоянии была выше, чем в «апикальном» состоянии.Плотность BrdU-положительных клеток в «базальном» состоянии была более чем в четыре раза выше, чем в «апикальном» состоянии на 4 и 6 дни в случае клеток MDCK I (рис. 7D), что позволяет предположить, что увеличение пролиферирующие клетки в «базальном» состоянии, вероятно, будут способствовать увеличению числа клеток в клетках MDCK I.

С другой стороны, соотношение BrdU-положительных клеток составляло 5,78 ± 0,91% через два дня после посева в клетки MDCK II, а соотношение упало до менее 1% на 4 и 6 дни под «апикальным» и «базальным». условия (Рис. 7C) (день 4 ‘Апикальный’, 0.77 ± 0,30%; день 4 «Базальный», 0,80 ± 0,18%; день 6 «Апикальный», 0,43 ± 0,22%; день 6 «Базальный», 0,33 ± 0,22%). Тенденция культурных клеток останавливать или замедлять свою пролиферацию по мере роста до слияния известна как контактное ингибирование [25], а клетки MDCK II, как сообщается, проявляют способность контактного ингибирования [26]. Считается, что уменьшение соотношения BrdU-положительных клеток после дня 4 отражает контактное ингибирование в клетках MDCK II, и гидростатическое давление от базальной к апикальной стороне, вероятно, не оказывает значительного влияния на пролиферацию клеток в клетках MDCK II.

Влияние гидростатического давления на апоптоз клеток

Мы также исследовали влияние гидростатического давления на гибель клеток. Чтобы подтвердить наличие гибели клеток в клетках MDCK I, мы сначала наблюдали супернатант культуры клеток MDCK I, культивированных на фильтрах в течение четырех дней, с помощью фазово-контрастной микроскопии. Многие сферические плавающие объекты наблюдались в супернатанте культуры клеток MDCK I (фиг. 8A). При просвечивающей электронной микроскопии в супернатанте культуры клеток MDCK I наблюдали множество мелких везикул и фрагментированных ядер (рис. 8B).Затем мы оценили объем остатков в культуральном супернатанте. Мы собирали культуральный супернатант каждые два дня при замене культуральной среды, и супернатант помещали в микрокапиллярные пробирки с внутренним диаметром 0,29 мм и центрифугировали для упаковки дебриса (S4, рис.). Упакованные обломки наблюдались с помощью световой микроскопии, и мы подтвердили, что упакованные обломки состояли из мертвых клеток (S4 Рис.). Затем измеряли высоту упакованного мусора в микрокапиллярных трубках и рассчитывали объем мертвых клеток как площадь трубки × высота мусора.В клетках MDCK I объем мертвых клеток в супернатанте культуры, собранный на 2 день, составлял 0,501 ± 0,023 мм ³. Объем был немного уменьшен в дни 2–4, 4–6 и 6–8 дни, но он составлял примерно половину объема в дни 0–2 в «апикальном» состоянии (дни 2–4 «апикальный», 0,352 ± 0,036 мм ³; дни 4–6 «Апикальный», 0,198 ± 0,038 мм ³; дни 6–8 «Апикальный», 0,252 ± 0,029 мм ³). Напротив, объем мертвых клеток постепенно уменьшался в «базальном» состоянии.Объем на 6–8 дни в «базальном» состоянии был значительно меньше, чем в «апикальном» состоянии (дни 2–4 «базальный», 0,331 ± 0,019 мм ³; дни 4–6 «базальный», 0,113 ± 0,005 мм ³; 6–8 дни «Базальный», 0,039 ± 0,007 мм ³). Эти результаты предполагают, что гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны подавляет возникновение гибели клеток в клетках MDCK I. С другой стороны, объем мертвых клеток в культуральном супернатанте, собранном на 2 день в клетках MDCK II, составлял примерно 15% от объема в клетках MDCK I (0.075 ± 0,004 мм ³). Объем был дополнительно уменьшен через день 2 независимо от «апикального» или «базального» состояния, что указывает на низкую частоту возникновения гибели клеток в клетках MDCK II, культивируемых на фильтрах (фиг. 8C).

Рис. 8. Влияние гидростатического давления на гибель клеток.

(A) Фазово-контрастные микроскопические изображения супернатанта культуры клеток MDCK I, культивированных на фильтрах в течение четырех дней. Наблюдалось множество плавающих сферических объектов. Масштабные линейки = 100 мкм для левой панели и 20 мкм для правой панели.(B) Просвечивающая электронная микрофотография супернатанта культуры клеток MDCK I. Масштабная линейка = 1 мкм. (C) Объем остатков в культуральном супернатанте. Объем обломков измеряли, как описано в «Материалы и методы» . Объем дебриса в дни 6-8 в «базальном» состоянии был значительно меньше, чем в «апикальном» состоянии в клетках MDCK I. ** p <0,01 по сравнению с «апикальным» состоянием в соответствующий день.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0145522.g008

Фрагментированные ядра, наблюдаемые на просвечивающей электронной микрофотографии культурального супернатанта клеток MDCK I, являются одним из характерных признаков апоптотических клеток [27], хотя упакованный мусор может также включать мертвые клетки из-за причин, отличных от апоптоза. Чтобы подтвердить, подавляется ли апоптоз клеток гидростатическим давлением от базальной до апикальной стороны в клетках MDCK I, мы провели анализ терминального мечения ник-концов дезоксинуклеотидилтрансферазы-dUTP (TUNEL), который обнаруживает фрагментированную ДНК [28].Мы провели анализ TUNEL через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I. Плотность флуоресцентных сигналов фрагментации ДНК в «базальном» состоянии была немного ниже, чем в «апикальном» состоянии в клетках MDCK I (фиг. 9A и 9B и S4, фиг.). Поскольку каждая апоптотическая клетка генерирует ряд флуоресцентных сигналов фрагментированной ДНК, считалось, что трудно точно количественно оценить возникновение апоптоза клеток с помощью анализа TUNEL и оценить разницу между «апикальным» и «базальным» состояниями.Поэтому мы выполнили анализ TUNEL после устранения гидростатического давления от базальной к апикальной стороне в клетках MDCK I и исследовали возникновение апоптоза клеток во время уменьшения расслоения эпителия. Мы культивировали клетки MDCK I в «базальных» условиях в течение четырех дней и исследовали временной ход возникновения апоптоза клеток после устранения градиента гидростатического давления (рис. 9С). Флуоресцентные сигналы фрагментированной ДНК немного увеличились через 2 часа после устранения градиента гидростатического давления, а сигналы, очевидно, увеличились через 6 часов после устранения градиента гидростатического давления, что сопровождалось уменьшением стратификации эпителия (рис. 9C и S4 Рис).Эти результаты предполагают, что гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны подавляет апоптоз клеток в клетках MDCK I.

Рис. 9. Анализ мечения ник-концов терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы-dUTP (TUNEL).

(A и B) TUNEL-анализ через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I в плоскости xy (A) и плоскости оси z (B). (C) Анализ TUNEL после устранения градиента гидростатического давления в клетках MDCK I. Клетки MDCK I культивировали в «базальных» условиях в течение четырех дней, и градиент гидростатического давления был устранен путем увеличения культуральной среды на апикальной стороне.Тест TUNEL проводили через 0–24 ч после устранения градиента гидростатического давления. Флуоресцентные сигналы фрагментированной ДНК явно усиливались через 6 ч после устранения градиента гидростатического давления. Верхняя сторона является апикальной стороной, а нижняя сторона — базальной стороной в плоскости оси z. Масштабные линейки = 20 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g009

Влияние гидростатического давления на трансэпителиальный транспорт

Трансэпителиальный транспорт — одна из важнейших функций эпителия.Чтобы исследовать влияние гидростатического давления на трансэпителиальный транспорт, мы измерили TER, обратную ионную проводимость через эпителий в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I (рис. 10А). В «апикальном» состоянии TER постепенно увеличивался со временем после посева на фильтры, что согласовывалось с предыдущими исследованиями [11,19]. Напротив, TER увеличивался аналогичным образом, но позже снижался через два дня после культивирования в «базальных» условиях.Значение TER на 6 день (через четыре дня после культивирования в «базальном» состоянии) составляло примерно одну треть от значения в «апикальном» состоянии («апикальное», 5395 ± 210 Ом · см ² по сравнению с «базальным», 1924 ± 54 Ом · см ²). TER в состоянии «Увеличение», при котором не было разницы в высоте поверхности среды между апикальной и базальной сторонами, был сопоставим с таковым в состоянии «Апикальный» (S5, рис.).

Рис. 10. Влияние гидростатического давления на трансэпителиальный транспорт.

(A) Влияние гидростатического давления на трансэпителиальное электрическое сопротивление (TER) в клетках MDCK I. TER был изменен на снижение через два дня после приложения гидростатического давления в «базовых» условиях. (B) Отношение P _Na к P _Cl ( P _Na/ P _Cl) в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I. P _Na/ P _Cl измеряли через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях.Значение P _Na/ P _Cl в «базальном» состоянии было значительно выше, чем в «апикальном» состоянии. (C) P _Na и P _Cl в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I. Значение P _Na в «базальном» состоянии было примерно в четыре раза выше, чем в «апикальном» состоянии. (D) Иммунофлуоресцентная микроскопия клаудина-2 и ZO-1 в клетках MDCK I через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях.Окрашивание клаудином-2 было четко обнаружено в контактах между клетками в ограниченной области в «базальном» состоянии. Масштабная линейка = 10 мкм. (E) Иммуноблоты на клаудин-2 и E-кадгерин в клетках MDCK I через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях. Клетки MDCK II, культивированные на фильтрах в течение шести дней, использовали в качестве положительного контроля. Слабая полоса клаудина-2 была обнаружена в «базальном» состоянии в клетках MDCK I. (F) Поток флуоресцеина и 4 кДа FITC-декстрана в «апикальных» и «базальных» условиях в клетках MDCK I.Поток измеряли через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях. Поток флуоресцеина в «базальном» состоянии был значительно ниже, чем в «апикальном» состоянии. * p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с «апикальным» состоянием.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g010

Затем мы измерили потенциалы разведения для изучения проницаемости для Na ⁺ и Cl ^— через эпителий ( P _Na и P _Cl) через четыре дня после культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях.Отношение P _Na к P _Cl ( P _Na/ P _Cl) составляло 1,45 ± 0,04 в « апикальных » условиях в клетках MDCK I, показывая небольшую катионную активность. селективное свойство клеток MDCK I согласуется с предыдущим исследованием [29] (рис. 10B). Напротив, клетки MDCK I в «базальных» условиях показали более высокую катионную селективность ( P _Na/ P _Cl, 4,28 ± 0,35). Значение P _Na в «базальном» состоянии было примерно в четыре раза выше, чем в «апикальном» состоянии («апикальное», 0.187 ± 0,004 × 10 ⁻⁶ см / с по сравнению с «Базальным», 0,719 ± 0,011 × 10 ⁻⁶ см / с), тогда как значение P _Cl в условиях «Базальное» было лишь немного выше. чем в «апикальном» состоянии («апикальный», 0,129 ± 0,002 × 10 ⁻⁶ см / с по сравнению с «базальным», 0,168 ± 0,007 × 10 ⁻⁶ см / с). Эти результаты предполагают, что гидростатическое давление от базальной к апикальной стороне увеличивает трансэпителиальную проницаемость для ионов с избирательным увеличением на P _Na, чем на P _Cl.

Трансэпителиальные перемещения ионов происходят двумя путями: трансцеллюлярным и параклеточным путями. Активный ионный транспорт в трансцеллюлярном пути генерирует трансэпителиальные электрические потенциалы (Vt). В так называемом «плотном» эпителии, который имеет высокие значения TER, таких как клетки MDCK I, Vt, генерируемый активным транспортом, оказывает значительное влияние на потенциалы разведения, которые определяют P _Na/ P _Cl [ 30,31]. Поэтому мы измерили Vt в листах клеток MDCK I в культуральной среде в «апикальных» и «базальных» условиях (S5, рис.).Vt показал небольшие значения независимо от «апикального» или «базального» состояния в клетках MDCK I («апикальный», 0,23 ± 0,09 мВ; «базальный», 0,00 ± 0,10 мВ), что позволяет предположить, что влияние активного транспорта на разведение потенциалы были незначительны в клетках MDCK I. Для дальнейшего изучения участия трансклеточного пути в переносе ионов в клетках MDCK I мы измерили P _Na и P _Cl до и через 30 минут после применения бензамила (ингибитор эпителиальных натриевых каналов), буметанид (Na ⁺ -K ⁺ -Cl ^— ингибитор котранспортера) и уабаин (ингибитор Na ⁺ / K ⁺ -АТФазы) в «апикальных» и «базальных» условиях.Значения P _Na и P _Cl показали небольшие изменения при применении ингибиторов независимо от «апикального» или «базального» состояния (S5 фиг.). Эти результаты предполагают, что трансцеллюлярный путь менее вовлечен в увеличение P _Na за счет гидростатического давления от базальной к апикальной стороне в клетках MDCK I.

TJ регулируют движение веществ по параклеточному пути [21,22], и основными детерминантами проницаемости TJ являются клаудины, большое семейство интегральных мембранных белков [17,32,33].Поскольку известно, что клаудин-2 формирует поры с высокой проводимостью и катионной селективностью в TJs [29,34,35], мы оценили экспрессию клаудина-2 с помощью иммунофлуоресцентной микроскопии. В «апикальном» состоянии мы не обнаружили окрашивания клаудином-2 в межклеточных контактах, что согласуется с предыдущими исследованиями [19,29]. Напротив, окрашивание клаудином-2 было четко обнаружено в межклеточных контактах в некоторых областях в «базовых» условиях (фиг. 10D и S6, фиг.). Затем был проведен иммуноблот-анализ на клаудин-2.Клетки MDCK II использовали в качестве положительного контроля, поскольку они по своей природе экспрессируют клаудин-2 [19,34]. В клетках MDCK I полоса клаудина-2 не была обнаружена в «апикальном» состоянии, что согласовывалось с предыдущими исследованиями [19,29], тогда как слабая полоса клаудина-2 была обнаружена в «базальном» состоянии ( Рис 10E). Поскольку сообщалось, что небольшое количество клаудина-2 оказывает значительное влияние на P _Na [29,36], следовое количество клаудина-2 в «базальном» состоянии потенциально способствует увеличению P . _Na гидростатическим давлением в ячейках MDCK I.Мы также исследовали влияние гидростатического давления на трансэпителиальный транспорт в клетках MDCK II. TER показал несколько более низкие значения в «базальном» состоянии по сравнению с «апикальным» состоянием, но значения P _Na/ P _Cl, P _Na и P _Cl в «базальном» состоянии были сопоставимы с таковыми в «апикальном» состоянии (S7 рис.).

В параклеточном пути проницаемость более крупных молекул (> 4 Å) регулируется отдельно от проницаемости малых молекул, таких как Na ⁺ и Cl ^— [31,37].Чтобы изучить влияние гидростатического давления на проницаемость более крупных молекул, мы измерили поток флуоресцеина (332 Да), двухвалентного аниона среднего размера и 4 кДа FITC-декстрана в клетках MDCK I через четыре дня после культивирования в условиях Апикальные и базальные условия. Поток флуоресцеина в «базальном» состоянии был ниже, чем в «апикальном» состоянии, тогда как поток 4 кДа FITC-декстрана не зависел от гидростатического давления (рис. 10F). Эти результаты предполагают, что гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны может снижать проницаемость более крупных молекул в параклеточном пути.Эти результаты также согласуются с предыдущим исследованием, в котором сверхэкспрессия клаудина-2 увеличивала катионную проницаемость, не влияя на проницаемость больших молекул (> 4 Å) в TJs [37], хотя в трансэпителиальный транспорт в трансэпителиальном транспорте могут быть вовлечены различные механизмы. многослойный эпителий, такой как транспорт посредством прерывистых межклеточных контактов и трансцитоз, наблюдаемый в эндотелии [38]. Поскольку сообщалось, что экспрессия клаудина изменяется при многих карциномах, экспрессия клаудина-2 в клетках MDCK I в «базальном» состоянии может быть связана с изменением экспрессии клаудина в карциномах [39].

Участие передачи клеточных сигналов в стратификации эпителия за счет гидростатического давления

Наконец, мы исследовали участие клеточной передачи сигналов в стратификации эпителия за счет гидростатического давления; мы проверили роль общих медиаторов передачи сигнала, включая протеинкиназу A (PKA), протеинкиназу C (PKC) и протеинтирозинкиназу (PTK), используя конкурентные ингибиторы, нацеленные на сайты связывания АТФ PKA (H89), PKC (Go6983), и PTK (генистеин) в расслоении эпителия.Поскольку участие PKA в эпителиальной стратификации предполагалось в следующих экспериментальных результатах, мы также исследовали эффекты снижения внутриклеточных уровней циклического аденозинмонофосфата (cAMP), второго мессенджера, участвующего в активации PKA, специфическим аденилином. ингибитор циклазы SQ22536 и повышение внутриклеточных уровней цАМФ за счет активатора аденилатциклазы форсколина и ингибитора фосфодиэстеразы 3-изобутил-1-метилксантина (IBMX) на стратификации эпителия.

Сначала мы исследовали влияние ингибиторов и активаторов сигналов, используемых в этом исследовании, на пролиферацию клеток. Мы высевали клетки MDCK I с плотностью 5,0 × 10 ⁴ клеток / лунку в 12-луночный планшет и культивировали в течение 48 ч в присутствии ингибитора или активатора. Затем количество клеток подсчитывали с помощью счетной камеры (фиг. 11A), и время удвоения рассчитывали, исходя из предположения, что скорость пролиферации клеток была постоянной в течение 48 часов культивирования (фиг. 11B). Время удвоения клеток MDCK I, рассчитанное в контрольном эксперименте (ДМСО), составило 11.5 часов, а введение генистеина увеличило время удвоения на 13,2 часа, H89 увеличилось на 4 часа, а введение SQ22536, форсколина и IBMX увеличилось примерно на 1 час. Поскольку как ингибирование PKA (H89 и SQ22536), так и активация PKA (форсколин и IBMX) увеличивают время удвоения клеток MDCK I, правильный уровень активности PKA может способствовать оптимальной пролиферации клеток в клетках MDCK I. Мы также измерили TER в присутствии ингибитора или активатора. TER показал более низкие значения в присутствии H89, форсколина и IBMX (рис. 11C), но значения, зарегистрированные на второй день, все еще были более 300 Ом · см ².Кроме того, высота поверхностей среды не показала видимых изменений в присутствии сигнального ингибитора или активатора в «апикальных» и «базальных» условиях в следующих экспериментах.

Рис. 11. Действие сигнальных ингибиторов и активаторов на пролиферацию клеток и TER.

(A) Влияние ингибиторов и активаторов сигналов на количество клеток в клетках MDCK I. Клетки MDCK I высевали с плотностью 5,0 × 10 ⁴ клеток / лунку в 12-луночный планшет, культивировали в течение 48 часов в присутствии ингибитора или активатора, и количество клеток подсчитывали с помощью счетной камеры после трипсинизации. ячеек.(B) Влияние сигнальных ингибиторов и активаторов на время удвоения клеток MDCK I. Время удвоения рассчитывали по результатам (А), исходя из предположения, что скорость пролиферации клеток была постоянной в течение 48 часов культивирования. (C) Влияние ингибиторов и активаторов сигналов на TER. Клетки MDCK I культивировали на фильтрах в присутствии ингибитора или активатора сигнала, и TER измеряли в каждый момент времени.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g011

Затем мы исследовали влияние ингибиторов и активаторов на стратификацию эпителия под действием гидростатического давления. Мы высевали клетки MDCK I на фильтры и через два дня после посева применяли гидростатическое давление в присутствии ингибитора или активатора. Неожиданно введение H89, ингибитора PKA, индуцировало небольшую степень расслоения эпителия даже в «апикальном» состоянии (фиг. 12A и 12B). Введение SQ22536, который снижает внутриклеточные уровни цАМФ и приводит к ингибированию PKA, также вызывает небольшую степень расслоения эпителия в «апикальном» состоянии.Напротив, одиночный слой клеточного листа MDCK I наблюдался в присутствии Go6983, генистеина, форсколина и IBMX, аналогично контрольному эксперименту (DMSO) в «апикальных» условиях (фиг. 12A и 12B).

Рис. 12. Влияние ингибиторов и активаторов сигналов на стратификацию эпителия за счет гидростатического давления.

(A) Световые микроскопические изображения в вертикальном срезе в «апикальном» состоянии в присутствии ингибитора или активатора сигнала в клетках MDCK I. Верхняя сторона — апикальная, а нижняя — базальная.(B) Индекс стратификации клеток MDCK I в «апикальном» состоянии в присутствии сигнального ингибитора или активатора. Индекс стратификации в присутствии H89 и SQ22536 был значительно выше, чем в контрольном эксперименте (ДМСО). (C) Световые микроскопические изображения в вертикальном срезе в «базальном» состоянии в присутствии ингибитора или активатора сигнала в клетках MDCK I. Верхняя сторона — апикальная, а нижняя — базальная. (D) Индекс стратификации клеток MDCK I в «базальном» состоянии в присутствии сигнального ингибитора или активатора.Введение H89 значительно увеличивало степень расслоения эпителия за счет гидростатического давления, а введение форсколина значительно снижало степень расслоения эпителия. ** p <0,01 по сравнению с контролем (ДМСО).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0145522.g012

В «базальном» состоянии введение H89 дополнительно увеличивало степень расслоения эпителия за счет гидростатического давления (рис. 12C и 12D).Введение SQ22536 также показало тенденцию к увеличению степени расслоения эпителия, хотя разница в индексе стратификации не достигла уровня статистической значимости по сравнению с контролем (ДМСО). Поскольку активность PKA напрямую ингибируется H89, тогда как ингибирование PKA с помощью SQ22536 опосредуется снижением внутриклеточных уровней цАМФ, разница между индексом стратификации в присутствии H89 и SQ22536, вероятно, связана с разница в уровне ингибирования PKA H89 и SQ22536.Однако, поскольку известно, что введение H89 ингибирует киназы, отличные от PKA, в высоких концентрациях, неспецифические эффекты H89 также потенциально вызывают разницу между индексом расслоения в присутствии H89 и SQ22536. Дальнейший анализ необходим, чтобы понять влияние ингибирования PKA на стратификацию эпителия за счет гидростатического давления. Напротив, введение форсколина, который увеличивает внутриклеточные уровни цАМФ и приводит к активации PKA, значительно снижает степень расслоения эпителия в «базальном» состоянии.Введение IBMX, который также увеличивает внутриклеточные уровни цАМФ по-другому, чем форсколин, также продемонстрировало тенденцию к снижению степени расслоения эпителия в «базальном» состоянии. Эти результаты предполагают, что ингибирование PKA способствует расслоению эпителия за счет гидростатического давления, тогда как активация PKA подавляет расслоение эпителия в клетках MDCK I.

Таким образом, это исследование показывает, что градиент гидростатического давления играет роль в регуляции различных функций эпителиальных клеток: гидростатическое давление от базальной стороны к апикальной стороне вызывает стратификацию эпителия, сопровождаемую аберрантной полярностью клеток, способствует пролиферации клеток, подавляет апоптоз клеток и увеличивает трансэпителиальную ионную проницаемость.Однако многие вопросы, связанные с этим явлением, до сих пор остаются без ответа. Как эпителий воспринимает градиент гидростатического давления? Как развивается процесс расслоения эпителия? Какие механизмы участвуют в регуляции различных функций клеток под действием гидростатического давления? Почему реакция на градиент гидростатического давления различается для разных типов клеток? Участие сигнального пути PKA в стратификации эпителия за счет гидростатического давления, наблюдаемого в этом исследовании, может дать ключ к выяснению механизмов этого феномена.Поскольку изменения, вызванные гидростатическим давлением от базальной к апикальной стороне в эпителиальных клетках, вероятно, связаны с особенностями карциномы [40], понимание этого феномена может способствовать разработке новой стратегии лечения карцинома в будущих исследованиях.

Материалы и методы

Культура клеток

клеток MDCK I, предоставленных покойным доктором Шоичиро Цукита (Университет Киото) [19], клетки MDCK II, предоставленные доктором Масаюки Мурата [19], и клетки Caco-2, полученные из Американской коллекции культур тканей, поддерживались в нашей лаборатории. .Клетки MDCK I и II выращивали в среде DMEM (с высоким содержанием глюкозы) с добавлением 5% фетальной бычьей сыворотки. Для культивирования клеток Caco-2 пластиковые чашки 100 мм и проницаемые фильтры Transwell покрывали коллагеном (Cellmatrix Type I-C; Nitta Gelatin) в соответствии с протоколом производителя. Клетки Caco-2 выращивали в среде DMEM (с высоким содержанием глюкозы) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки. Чтобы приложить гидростатическое давление к клеточному листу, культивируемому на фильтрах, культуральная среда с апикальной стороны была удалена путем аспирации, и точные количества культуральной среды, показанные в таблице S1, были добавлены к апикальной и базальной сторонам с помощью аспирации. пипетка.Культуральную среду меняли каждые два дня, и высота поверхности среды не показывала видимых изменений в течение двух дней во всех экспериментах в этом исследовании.

Антитела и реагенты

Мышиные моноклональные антитела против ZO-1 (mAb) (T8 / 754), крысиные mAb против окклюдина (MOC37) и кроличьи поликлональные антитела против клаудина-2 (pAb) были охарактеризованы, как описано ранее [41–43]. Мышиные mAb против клаудина-2 (32-5600), кроличьи анти-клаудин-3 pAb (34-1700), фаллоидин alexa fluor 488 (A12379) и фаллоидин alexa fluor 647 (A22287) были приобретены у Life Technologies.Мышиные mAb против E-кадгерина (ECCD-2; M108) были приобретены у Clontech. Мышиные анти-Na ⁺ / K ⁺ mAb против АТФазы α1 (NB300-146) были приобретены в Novus Biologicals. Флуоресцеина изотиоцианат-декстран (FITC-декстран), бензамил (B2417), буметанид (B3023), уабаин (O3125), H89 (B1427), генистеин (G6649), Go6983 (G1918) и 3-изобутил-1-метилксантин (IBM I5879) были приобретены у Sigma Aldrich. Флуоресцеин (16106–82) был приобретен в Nacalai tesque. SQ22536 был куплен в Санта Круз.Форсколин был куплен в Вако.

Просвечивающая электронная микроскопия

Эпителиальные клетки высевали с плотностью 2 × 10 ⁵ клеток / см ² и выращивали на поликарбонатных фильтрах Transwell диаметром 12 мм с размером пор 0,4 мкм (Corning). После культивирования в «апикальных» и «базальных» условиях в течение четырех дней эпителий фиксировали 2% параформальдегидом, 1% глутаральдегидом и 2% дубильной кислотой / 0,1 М буфером HEPES в течение 2 часов при комнатной температуре. Затем эпителий трижды промывали буфером HEPES.Эпителий был постфиксирован 1% тетроксидом осмия / 0,1 М буфером HEPES в течение 60 мин при 4 ° C. После промывания деионизированной водой эпителий обезвоживали с использованием этанола возрастающих концентраций (65%, 75%, 85%, 95%, 99% и 100% в течение 10–15 минут каждый). Этанол заменяли оксидом пропилена с последующей заделкой эпителия эпоксидной смолой Poly / Bed 812 (Polyscience). Эпителий делали на срезы при длине волны 70 нм с использованием алмазного ножа, и ультратонкие срезы собирали на медных сетках размером 200 меш с последующим их окрашиванием 1% хлоридом гафния в метаноле в течение 1 минуты, а затем цитратом свинца Сато в течение 1 минуты.Образцы наблюдали с помощью просвечивающего электронного микроскопа JEM-1011 (JEOL).

Сканирующая электронная микроскопия

Эпителии, выращенные на фильтрах в «апикальных» и «базальных» условиях, фиксировали 10% параформальдегидом и 1% глутаровым альдегидом / 0,1 М буфером HEPES в течение 2 часов с последующей фиксацией 1% тетроксидом осмия / 0,1 М буфером HEPES в течение 60 минут. и обезвоживают этанолом аналогично тому, как описано в Transmission Electronic Microscopy . Затем этанол заменяли трет-бутанолом, и эпителий замораживали при -20 ° C с последующей сублимацией трет-бутанола.Фильтры устанавливали на алюминиевые планшеты с углеродным клеем и покрывали платиной с использованием ионного устройства для нанесения покрытий, и образцы наблюдали с помощью сканирующего электронного микроскопа JSM-6510LVS (JEOL).

Световая микроскопия и индекс стратификации

Эпителии, выращенные на фильтрах, фиксировали 2% параформальдегидом, 1% глутаральдегидом и 5% дубильной кислотой / 0,1 М буфером HEPES в течение 48–72 часов. Затем их фиксировали 1,8% тетроксидом осмия / 0,1 М буфером HEPES в течение 60 мин, дегидратировали этанолом с последующей заменой оксидом пропилена и заключали в эпоксидную смолу аналогично тому, как описано в Transmission Electronic Microscopy .Эпителий делали на срезы при 3000 нм, и срезы собирали на предметном стекле с последующим окрашиванием толуидиновым синим. Образцы наблюдали с помощью светового микроскопа (IX71; Olympus), а цифровые изображения получали с помощью охлаждаемой камеры устройства с зарядовой связью (ORCAER; Hamamatsu Photonics K.K.). Чтобы количественно оценить степень расслоения эпителия, мы подсчитали количество клеток по вертикальным линиям, проведенным с интервалом 20 мкм на вертикальном срезе слоев эпителиальных клеток (S1, фиг.).На образец было проанализировано более 140 линий, и среднее значение числа клеток в линиях было определено как индекс стратификации. N = 3–4 для каждого эксперимента.

Электронная микроскопия замерзания трещин

Электронная микроскопия трещин при замораживании была выполнена, как описано ранее [19]. Вкратце, эпителий, выращенный на поликарбонатных фильтрах Nunc диаметром 23 мм с размером пор 0,4 мкм (Life Technologies), фиксировали 2% параформальдегидом и 2,5% глутаральдегидом / 0,1 М фосфатным буфером (pH 7.3) ночь. Затем эпителий замораживали в жидком азоте, а замороженные образцы разрушали при -110 ° C и затемняли платиной в системе Balzers Freeze Etching (BAF060, Bal-Tec). Образцы наблюдали с помощью просвечивающего электронного микроскопа JEM-1011.

Иммуноцитохимия

Иммуноцитохимия выполнялась, как описано ранее [24]. Вкратце, эпителий, выращенный на 12-миллиметровых фильтрах, фиксировали 10% параформальдегидом в течение 7 минут при комнатной температуре или в 100% метаноле в течение 10 минут при -20 ° C.Затем фильтры подвергали проницаемости в растворе 0,2% (мас. / Об.) Triton X-100 (EMD Biosciences), блокировали 2% бычьим сывороточным альбумином и инкубировали с первичным Ab, а затем с вторичным Ab. Образцы получали на конфокальном микроскопе Zeiss LSM700.

BrdU проба

Анализ

BrdU выполняли с использованием набора для маркировки и обнаружения BrdU I в соответствии с протоколом производителя (Roche, 1296736). Вкратце, 10 мкМ BrdU вводили в культуральную среду в течение 60 мин, и эпителий фиксировали 92% этанолом, содержащим 50 мМ глицина (pH 2.0) в течение 20 мин при −20 ° C. Затем фильтры инкубировали с mAb против BrdU, содержащими нуклеазы, и обрабатывали вторичными антителами, меченными флуоресцеином, и DAPI. Образцы были отображены на конфокальном микроскопе Zeiss LSM700, и девять случайно выбранных областей размером 7730 мкм ² были проанализированы для каждого образца. Подсчитывали количество DAPI-положительных клеток и BrdU-положительных клеток для каждой области и рассчитывали отношение количества BrdU-положительных клеток к DAPI-положительным клеткам. N = 3–4 для каждого эксперимента.

TUNEL анализ

Анализ

TUNEL проводили с использованием Click-iT TUNEL Alexa Fluor 488 Imaging Assay в соответствии с протоколом производителя (Life Technologies, C10245). Вкратце, эпителий, выращенный на 12-миллиметровых фильтрах, фиксировали 10% параформальдегидом в течение 7 минут и повышали проницаемость с помощью Triton X-100. Модифицированные dUTP были включены терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой на 3’-OH концах фрагментированной ДНК, что является признаком апоптоза [28]. Модифицированные dUTP были обнаружены катализируемой медью (I) реакцией между алкином в модифицированном dUTP и азидом alexa fluor 488.Плотность сигналов TUNEL определяли количественно аналогично тому, как описано в BrdU assay .

Количественное определение остатков в культуральном супернатанте

Культуральный супернатант собирали при замене культуральной среды в микропробирки. После центрифугирования осадки дебриса ресуспендировали в небольшом количестве PBS, которые помещали в микрокапиллярные пробирки с внутренним диаметром 0,29 мм (BRAND GMBH + CO KG, 708707). Один конец микрокапиллярных пробирок был забит замазкой, и пробирки центрифугировали для уплотнения мусора (S4, рис.).Упакованные обломки в микрокапиллярных трубках были захвачены стереомикроскопом MZ10F (Leica) с объектным микрометром, а цифровые изображения были получены с помощью охлаждаемой камеры устройства с зарядовой связью (камера Rolera EM-C EMCCD; QImaging). Высота упакованного мусора в микрокапиллярных трубках измерялась с помощью ImageJ 1.43u (доступно на http://rsb.info.nih.gov/ij; разработано Уэйном Расбандом, Национальные институты здравоохранения, Бетезда, Мэриленд), а объем обломков рассчитывали по формуле: Площадь трубы × высота обломков.N = 4–6 для каждого эксперимента.

Иммуноблоттинг

Эпителиальные клетки, культивированные на фильтрах, соскребали в буфере для образцов Laemmli SDS и кипятили в течение 5 мин. Белки разделяли с помощью одномерного SDS-PAGE и электропереносили из гелей на PVDF-мембраны с последующей инкубацией с первичным Abs. Связанные Ат были обнаружены с использованием вторичных Ат, связанных с HRP, и визуализированы с помощью усиленной хемилюминесценции (ECL Prime Kit; GE Healthcare).

Электрофизиологические измерения

Электрофизиологические исследования проводили, как описано ранее [36,44].Вкратце, электрическое сопротивление и потенциалы через эпителий измеряли с помощью эпителиального вольт-омметра Millicell-ERS (Millipore), а трансэпителиальное электрическое сопротивление (TER) и потенциалы (Vt) определяли путем вычитания сопротивления и потенциала холостого образца. фильтр. Для определения ионной проницаемости Na ⁺ ( P _Na) и Cl ^— ( P _Cl) через эпителий, потенциалы разведения и TER клеточных монослоев были измерены с раствором A [140 мМ NaCl, 5 мМ глюкозы, 5 мМ KCl, 1 мМ MgCl ₂, 1 мМ CaCl ₂ и 10 мМ HEPES-NaOH (pH 7.4)] на апикальной стороне и растворе B [70 мМ NaCl, 130 мМ сахарозы, 5 мМ глюкозы, 5 мМ KCl, 1 мМ MgCl ₂, 1 мМ CaCl ₂ и 10 мМ HEPES-NaOH (pH 7,4). ] на базальной стороне при 37 ° C. Отношение P _Na/ P _Cl рассчитывалось с использованием уравнения Гольдмана – Ходжкина – Каца. Значения P _Na и P _Cl были затем рассчитаны на основе TER и P _Na/ P _Cl с использованием уравнения Кимидзука – Кокецу [45].Для исследований ингибиторов трансцеллюлярного транспорта эпителий инкубировали в растворе A на апикальной стороне и растворе B на базальной стороне с 10 мкМ бензамила, 100 мкМ буметанида и 1 мМ уабаином с обеих сторон в течение 30 минут при 37 ° C. P _Na и P _Cl измеряли до и через 30 минут после введения ингибиторов. N = 3–4 для каждого эксперимента.

Трассирующий флюс

Эпителии, выращенные на фильтрах, инкубировали в растворе А с 0.2 мМ флуоресцеина или FITC-декстрана на базальной стороне в течение 1 ч, и растворы собирали на апикальной стороне. Флуоресценцию растворов при 518 нм измеряли с помощью флуоресцентного спектрофотометра (F-4500; Hitachi High-Tech) с длиной волны возбуждения 488 нм. Количество флуоресцеина и FITC-декстрана определяли экстраполяцией из стандартной кривой известных концентраций флуоресцеина или FITC-декстрана с использованием линейной регрессии. Проницаемость флуоресцеина и FITC-декстрана была определена как (dQ / dt) / AC ₀ [36].

Анализ поверхностного биотинилирования

Мы выполнили индикаторный эксперимент с использованием реагента для биотинилирования, реагирующего с первичными аминами, который маркирует белки и первичные аминосодержащие макромолекулы на поверхности клетки [23]. Эпителии, выращенные на 12-мм фильтрах, инкубировали в растворе A с 0,01 мг / мл EZ-Link Sulfo-NHS-Biotin (Life Technologies) на базальной стороне в течение 10 мин при 37 ° C. Затем эпителии фиксировали 10% параформальдегидом в течение 7 мин и пемеабилизировали Triton X-100. Связанный биотин был обнаружен стрептавидином alexa fluor 555 (S-32355; Life Technologies).Образцы получали на конфокальном микроскопе Zeiss LSM700 аналогично тому, как описано в Immunocytochemistry .

Исследования ингибиторов и активаторов сигналов

Чтобы изучить влияние сигнальных ингибиторов и активаторов на время удвоения клеток MDCK I, мы высевали клетки MDCK I с плотностью 5,0 × 10 ⁴ клеток / лунку на 12-луночный планшет (Falcon, 3,38 см ² / скв.). Клетки выращивали в культуральной среде, содержащей 10 мкМ H89, 10 мкМ генистеина, 500 нМ Go6983, 200 мкМ SQ22536, 10 мкМ форсколин или 500 мкМ IBMX в течение 48 часов.Время удвоения рассчитывали, исходя из предположения, что скорость пролиферации клеток была постоянной в течение 48 часов культивирования. Для измерения TER и индекса стратификации эпителий выращивали на фильтрах в культуральной среде, содержащей ингибитор или активатор сигнала.

Статистический анализ

Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводился с использованием критерия Стьюдента t и поправки Бонферрони для множественных сравнений. P <0,05 считалось статистически значимым.

Биомониторинг воздействия металлических соединений с канцерогенными свойствами на JSTOR

Абстрактный

Некоторые металлы, такие как мышьяк, бериллий, хром и никель, являются канцерогенными для человека, если они присутствуют в определенных четко определенных физико-химических формах. Канцерогенный потенциал этих металлов связан с их мутагенными свойствами. Определение металла или, возможно, его метаболитов в биологических средах и цитогенетическое исследование соматических клеток — это два метода, которые в настоящее время можно использовать для мониторинга воздействия на группы риска.Из-за использования несоответствующей методологии ценность опубликованных на данный момент положительных цитогенетических результатов представляется сомнительной. Напротив, концентрации металлов в крови, моче или других биологических материалах можно определить точными и точными методами. Хотя он не позволяет напрямую оценить канцерогенный риск, этот подход в настоящее время является наиболее подходящим для мониторинга подверженных воздействию групп населения.

Информация о журнале

\ Environmental Health Perspectives (EHP) — это ежемесячный рецензируемый журнал исследований и новостей, публикуемый при поддержке Национального института гигиены окружающей среды, Национальных институтов здравоохранения США.S. Департамент здравоохранения и социальных служб. Миссия EHP — служить форумом для обсуждения взаимосвязи между окружающей средой и здоровьем человека путем публикации высококачественных исследований и новостей в этой области. С импакт-фактором 7,03 EHP занимает третье место в рейтинге Public, Environmental and Occupational Health, четвертое место в области токсикологии и пятое место в области экологических наук. Текущие выпуски перспектив гигиены окружающей среды находятся в свободном доступе для всех пользователей на веб-сайте журнала.

Информация об издателе

Миссия NIEHS — снизить бремя болезней и недееспособности человека за счет понимания того, как окружающая среда влияет на развитие и прогрессирование болезней человека. Чтобы оказать наибольшее влияние на профилактику заболеваний и улучшение здоровья человека, NIEHS фокусируется на фундаментальной науке, исследованиях, ориентированных на болезни, здоровье окружающей среды в мире и междисциплинарном обучении. для исследователей.

Каннабис и табачный дым не одинаково канцерогены | Журнал снижения вреда

Хурана С., Батра В., Паткар А.А., Леоне Ф.Т .: Употребление табака в XXI веке: это больше не просто фактор риска. Respir Med. 2003, 97 (4): 295-301. 10.1053 / rmed.2002.1443.

CAS Статья PubMed Google ученый

Тун М.Дж., Хенли С.Дж., Калле Е.Е.: Употребление табака и рак: эпидемиологическая перспектива для генетиков. Онкоген. 2002, 21 (48): 7307-7325. 10.1038 / sj.onc.1205807.

CAS Статья PubMed Google ученый

Alavanja MC: Биологические повреждения в результате воздействия табачного дыма и радона: значение для профилактических мероприятий. Онкоген. 2002, 21 (48): 7365-7375. 10.1038 / sj.onc.1205798.

CAS Статья PubMed Google ученый

Новотный М., Мерли Ф., Вайслер Д., Фенкл М., Саид Т: Фракционирование и капиллярная газовая хроматографо-масс-спектрометрическая характеристика нейтральных компонентов в конденсатах марихуаны и табачного дыма.J Chromatogr. 1982, 238: 141-150. 10.1016 / S0021-9673 (00) 82720-Х.

CAS Статья Google ученый

Ташкин Д.Р., Болдуин Г.К., Сарафиан Т., Дубинетт С., Рот М.Д.: Респираторные и иммунологические последствия курения марихуаны. J Clin Pharmacol. 2002, 42 (11 доп.): 71С-81С.

CAS Статья PubMed Google ученый

Сидней С., Бек Дж. Э., Текава И. С., Кузенберри С. П., Фридман Г. Д.: Употребление марихуаны и смертность.Am J Public Health. 1997, 87: 585-590.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google ученый

Hashibe M, Straif K, Tashkin DP, Morgenstern H, Greenland S, Zhang ZF: Эпидемиологический обзор употребления марихуаны и риска рака. Алкоголь. 2005, 35: 265-275. 10.1016 / j.alcohol.2005.04.008.

CAS Статья PubMed Google ученый

Ташкин Д.П. Курение марихуаны как причина поражения легких.Сундук Monaldi Arch Dis. 2005, 63: 93-100.

CAS PubMed Google ученый

Мансон А.Е., Харрис Л.С., Фридман М.А., Дьюи В.Л., Карчман Р.А.: Противоопухолевое действие каннабиноидов. J Natl Cancer Inst. 1975, 55: 597-602.

CAS PubMed Google ученый

10.

Sanchez C, de Ceballos ML, del Pulgar TG, Rueda D, Corbacho C, Velasco G, Galve-Roperh I, Huffman JW, Ramon y, Cajal S, Guzman M: Ингибирование роста глиомы in vivo с помощью селективная активация каннабиноидного рецептора CB (2).Cancer Res. 2001, 61: 5784-5789.

CAS PubMed Google ученый

11.

МакКаллип Р.Дж., Ломбард С., Фишер М., Мартин Б.Р., Рю С., Грант С., Нагаркатти П.С., Нагаркатти М.: нацеливание на каннабиноидные рецепторы CB2 в качестве нового метода лечения злокачественных лимфобластных заболеваний. Кровь. 2002, 100: 627-634. 10.1182 / кровь-2002-01-0098.

CAS Статья PubMed Google ученый

12.

Sanchez C, Galve-Roperh I, Canova C, Brachet P, Guzman M: Delta9-тетрагидроканнабинол индуцирует апоптоз в клетках глиомы C6. FEBS Lett. 1998, 436: 6-10. 10.1016 / S0014-5793 (98) 01085-0.

CAS Статья PubMed Google ученый

13.

Казанова М.Л., Бласкес С., Мартинес-Паласио Дж., Вильянуэва С., Фернандес-Асенеро М.Дж., Хаффман Дж. В., Хоркано Дж. Л., Гусман М.: Ингибирование роста опухоли кожи и ангиогенеза in vivo путем активации каннабиноидных рецепторов.J Clin Invest. 2003, 111: 43-50. 10.1172 / JCI200316116.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google ученый

14.

Саркер К.П., Обара С., Наката М., Китадзима I, Маруяма I. Анандамид индуцирует апоптоз клеток PC-12: участие супероксида и каспазы-3. FEBS Lett. 2000, 472: 39-44. 10.1016 / S0014-5793 (00) 01425-3.

CAS Статья PubMed Google ученый

15.

Hart S, Fischer OM, Ullrich A: Каннабиноиды вызывают пролиферацию раковых клеток через трансактивацию рецептора эпидермального фактора роста ферментом, опосредованным альфа-преобразователем фактора некроза опухоли (TACE / ADAM17). Cancer Res. 2004, 64: 1943-1950. 10.1158 / 0008-5472.CAN-03-3720.

CAS Статья PubMed Google ученый

16.

Годшалк Р., Наир Дж., Ван Скутен Ф.Дж., Риш А., Дрингс П., Кайзер К., Динеманн Х., Бартч Х .: Сравнение нескольких типов аддуктов ДНК в опухоли, прилегающей к ткани легких человека: эффект курения сигарет.Канцерогенез. 2002, 23: 2081-2086. 10.1093 / carcin / 23.12.2081.

CAS Статья PubMed Google ученый

17.

Watson SJ, Benson JAJ, Joy JE: Марихуана и медицина: оценка научной базы: резюме отчета Института медицины 1999 года. Arch Gen Psychiatry. 2000, 57 (6): 547-552. 10.1001 / archpsyc.57.6.547.

CAS Статья PubMed Google ученый

18.

Wu TC, Tashkin DP, Djahed B, Rose JE: Легочные опасности курения марихуаны по сравнению с табаком. N Engl J Med. 1988, 318: 347-351.

CAS Статья PubMed Google ученый

19.

Grotenhermen F: Фармакокинетика и фармакодинамика каннабиноидов. Clin Pharmacokinet. 2003, 42 (4): 327-360.

CAS Статья PubMed Google ученый

20.

Неберт DW, Гонсалес FJ: гены P450: структура, эволюция и регуляция. Анну Рев Биохим. 1987, 56: 945-993. 10.1146 / annurev.bi.56.070187.004501.

CAS Статья PubMed Google ученый

21.

Hecht SS, Carmella SG, Murphy SE, Foiles PG, Chung FL: Биомаркеры канцерогенов, связанные с курением и раком верхних отделов пищеварительного тракта. J Cell Biochem Suppl. 1993, 17F: 27-35. 10.1002 / jcb.240531005.

CAS Статья PubMed Google ученый

22.

Третьякова Н., Материя B, Джонс Р., Шеллоп А. Образование аддуктов бензо [a] пирендиол эпоксида-ДНК на определенных гуанинах в последовательностях генов K-ras и p53: метод масс-спектрометрии с меткой стабильных изотопов. Биохимия. 2002, 41: 9535-9544. 10.1021 / bi025540i.

CAS Статья PubMed Google ученый

23.

Рот, М.Д., Маркес-Магалланес, Дж. А., Юань М., Сун В., Ташкин Д. П., Ханкинсон О.: Индукция и регуляция фермента, метаболизирующего канцерогены, CYP1A1 дымом марихуаны и дельта (9) -тетрагидроканнабинолом.Am J Respir Cell Mol Biol. 2001, 24: 339-344.

CAS Статья PubMed Google ученый

24.

Прайс Р.Дж., Ренвик А.Б., Уолтерс Д.Г., Янг П.Дж., Лейк-Би-Джи: метаболизм никотина и индукция форм CYP1A в срезах печени и легких крыс, подвергнутых прецизионному нарезанию. Toxicol In Vitro. 2004, 18: 179-185. 10.1016 / j.tiv.2003.08.012.

CAS Статья PubMed Google ученый

25.

Неберт Д.В., Рассел Д.В.: Клиническое значение цитохромов P450. Ланцет. 2002, 360 (9340): 1155-1162. 10.1016 / S0140-6736 (02) 11203-7.

CAS Статья PubMed Google ученый

26.

Девейн В.А., Ханус Л., Брейер А., Пертви Р.Г., Стивенсон Л.А., Гриффин Г., Гибсон Д., Мандельбаум А., Этингер А., Мешулам Р.: Выделение и структура компонента мозга, который связывается с каннабиноидным рецептором. Наука. 1992, 258: 1946-1949.

CAS Статья PubMed Google ученый

27.

West KA, Brognard J, Clark AS, Linnoila IR, Yang X, Swain SM, Harris C, Belinsky S, Dennis PA: быстрая активация Akt никотином и канцерогеном табака модулирует фенотип нормального эпителия дыхательных путей человека клетки. J Clin Invest. 2003, 111: 81-90. 10.1172 / JCI200316147.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google ученый

28.

Woo RA, Poon RY: Циклинзависимые киназы и контроль S-фазы в клетках млекопитающих. Клеточный цикл. 2003, 2: 316-324.

CAS Статья PubMed Google ученый

29.

Bockaert J, Pin JP: Молекулярное изменение рецепторов, связанных с G-белком: эволюционный успех. EMBO J. 1999, 18 (7): 1723-1729. 10.1093 / emboj / 18.7.1723.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google ученый

30.

Howlett AC, Barth F, Bonner T.I, Cabral G, Casellas P, Devane WA, Felder CC, Herkenham M, Mackie K, Martin BR, Mechoulam R, Pertwee RG: Международный союз фармакологии. XXVII. Классификация каннабиноидных рецепторов. Pharmacol Rev.2002, 54 (2): 161-202. 10.1124 / пр.54.2.161.

CAS Статья PubMed Google ученый

31.

Итье V, Бертран D: Нейрональные никотиновые рецепторы: от структуры белка к функции.FEBS Lett. 2001, 504 (3): 118-125. 10.1016 / S0014-5793 (01) 02702-8.

CAS Статья PubMed Google ученый

32.

Gomez del Pulgar T, Velasco G, Guzman M: Каннабиноидный рецептор CB1 связан с активацией протеинкиназы B / Akt. Biochem J. 2000, 347: 369-373. 10.1042 / 0264-6021: 3470369.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google ученый

33.

Минна Дж. Д.: Воздействие никотина и экспрессия никотинового ацетилхолинового рецептора в эпителиальных клетках бронхов в патогенезе рака легких. J Clin Invest. 2003, 111 (1): 31-33. 10.1172 / JCI200317492.

PubMed Central CAS Статья PubMed Google ученый

34.

Паникашвили Д., Симеониду С., Бен-Шабат С., Ханус Л., Брейер А., Мешулам Р., Шохами Е. Эндогенный каннабиноид (2-AG) оказывает нейропротекторное действие после черепно-мозговой травмы.Природа. 2001, 413: 527-531. 10.1038 / 35097089.

CAS Статья PubMed Google ученый

35.

Leker RR, Shohami E, Abramsky O, Ovadia H: дексанабинол; новый нейропротекторный препарат при экспериментальной очаговой ишемии головного мозга. J Neurol Sci. 1999, 162: 114-119. 10.1016 / S0022-510X (98) 00301-3.

CAS Статья PubMed Google ученый

36.

Ювон Т., Эспозито Дж., Эспозито Р., Сантамария Р., Ди Роса М., Иззо А.А.: нейропротекторный эффект каннабидиола, непсихоактивного компонента Cannabis sativa, на токсичность, вызванную бета-амилоидом в клетках PC12.J Neurochem. 2004, 89: 134-141.

CAS Статья PubMed Google ученый

37.

Kihara T, Shimohama S, Sawada H, Honda K, Nakamizo T, Shibasaki H, Kume T, Akaike A: альфа-7 никотиновый рецептор преобразует сигналы к фосфатидилинозитол-3-киназе, чтобы блокировать индуцированный бета-амилоидом А. . J Biol Chem. 2001, 276: 13541-13546.

CAS PubMed Google ученый

38.

Heeschen C, Jang JJ, Weis M, Pathak A, Kaji S, Hu RS, Tsao PS, Johnson FL, Cooke JP: Никотин стимулирует ангиогенез и способствует росту опухоли и атеросклерозу. Nat Med. 2001, 7: 833-839. 10.1038 / 89961.

CAS Статья PubMed Google ученый

39.

Galve-Roperh I, Sanchez C, Cortes ML, del Pulgar TG, Izquierdo M, Guzman M: Противоопухолевое действие каннабиноидов: участие в устойчивом накоплении церамидов и активации киназ, регулируемых внеклеточными сигналами.Nat Med. 2000, 6: 313-319. 10.1038 / 73171.

CAS Статья PubMed Google ученый

40.

Blazquez C, Gonzalez-Feria L, Alvarez L, Haro A, Casanova ML, Guzman M: Каннабиноиды ингибируют путь фактора роста эндотелия сосудов в глиомах. Cancer Res. 2004, 64: 5617-5623. 10.1158 / 0008-5472.CAN-03-3927.

CAS Статья PubMed Google ученый

41.

Сарафян Т.А., Магалланес Дж. А., Шау Х., Ташкин Д., Рот М. Д.: Окислительный стресс, вызванный дымом марихуаны. Побочный эффект усиливается каннабиноидами. Am J Respir Cell Mol Biol. 1999, 20: 1286-1293.

CAS Статья PubMed Google ученый

42.

Chung HY, Kim HJ, Kim JW, Yu BP: Гипотеза воспаления при старении: молекулярная модуляция за счет ограничения калорий. Ann N Y Acad Sci. 2001, 928: 327-335.

CAS Статья PubMed Google ученый

43.

Раха С., Робинсон Б. Х .: Митохондрии, свободные радикалы кислорода и апоптоз. Am J Med Genet. 2001, 106: 62-70. 10.1002 / ajmg.1398.

CAS Статья PubMed Google ученый

44.

Halliwell B: Роль свободных радикалов в нейродегенеративных заболеваниях: терапевтическое значение для лечения антиоксидантами. Наркотики старения. 2001, 18: 685-716.

CAS Статья PubMed Google ученый

45.

Дрю Б., Левенбург К. Старение и роль активных форм азота. Ann N Y Acad Sci. 2002, 959: 66-81.

CAS Статья PubMed Google ученый

46.

Yuan M, Kiertscher SM, Cheng Q, Zoumalan R, Tashkin DP, Roth MD: Delta 9-Tetrahydrocannabinol регулирует баланс цитокинов Th2 / Th3 в активированных Т-клетках человека. J Neuroimmunol. 2002, 133: 124-131. 10.1016 / S0165-5728 (02) 00370-3.

CAS Статья PubMed Google ученый

47.

Mirken B: Испарители для медицинской марихуаны. СПИД лечит Новости № 327. 1999,; Разд. 1, 5.

Google ученый

48.

Gieringer D, St Laqurent J, Goodrich S: Испаритель каннабиса сочетает в себе эффективную доставку ТГК с эффективным подавлением пиролитических соединений. Журнал Cannabis Therapeutics. Отредактировал: доктор Итан Руссо. 2004, Бингемтон, Нью-Йорк: Haworth Press, 7-27. 10.1300 / J175v04n01_02. 4

Google ученый

Канцерогены в косметике — безопасная косметика

Законы, регулирующие косметику и средства личной гигиены, настолько ограничены, что известные канцерогенные химические вещества или канцерогены разрешены законом в продуктах личной гигиены.Некоторые канцерогены, такие как формальдегид и консерванты, выделяющие формальдегид, часто встречаются в продуктах личной гигиены, тогда как другие встречаются реже, но все же иногда присутствуют.

НАЙДЕНО В : широкий выбор продуктов в зависимости от ингредиента

КАК ИЗБЕЖАТЬ КАНЦЕРОГЕНОВ В КОСМЕТИКЕ?

Читайте этикетки и избегайте косметики и средств личной гигиены, содержащих формальдегид и высвобождающие формальдегид консерванты (кватерниум-15, диазолидинилмочевина, имидазолидинилмочевина, гидантоин DMDM и 2-бром-2-нитропропан-1,3 диол), фенацетин, каменноугольная смола , бензол, необработанные или слабо обработанные минеральные масла, оксид этилена, хром, кадмий и его соединения, мышьяк и кристаллический кремнезем (или кварц).

ВОПРОСЫ ЗДОРОВЬЯ : Рак, эндокринные нарушения, токсичность для развития и репродуктивной системы, биоаккумуляция, экотоксичность.
УЯЗВИМЫЕ НАСЕЛЕНИЯ : Все
ПОЛОЖЕНИЯ : Формальдегид запрещен в Японии, ^[1] и ограничен в ЕС; ^[2] каменноугольная смола запрещена в ЕС; ^[3] бензол запрещен в ЕС; ^[4] окись этилена запрещена в ЕС; ^[5] хром запрещен в ЕС; ^[6] соединения кадмия запрещены в Японии ^[7] и ЕС; ^[8] мышьяк запрещен в ЕС.^[9]

Где мы находим эти известные канцерогенные химические вещества для человека?
Международное агентство по изучению рака (IARC) — межправительственное агентство, входящее в состав Всемирной организации здравоохранения. Миссия IARC — расширять международное сотрудничество в области исследований рака. ^[10]

МАИР объединяет научные данные и классифицирует рассматриваемые химические вещества по пяти уровням: ^[11]

Группа 1: Канцерогены для человека
Группа 2A: Вероятно, канцерогенные для человека
Группа 2B: возможно канцерогенное вещество для человека
Группа 3: Канцерогенность для человека не классифицируется
Группа 4: Вероятно, не канцерогены для человека.

Из 113 агентов, перечисленных МАИР как известные канцерогены для человека (Группа 1), по крайней мере 11 использовались или в настоящее время используются в средствах личной гигиены: формальдегид, фенацетин, каменноугольный деготь, бензол, необработанные или слегка обработанные минеральные масла, метиленгликоль , оксид этилена, хром, кадмий и его соединения, мышьяк и кристаллический кремнезем или кварц. ^[12]

Канцерогены в продуктах личной гигиены: химические вещества и их опасность для здоровья ?

Формальдегид

Формальдегид намеренно добавлен в некоторые продукты, например, в кератиновые выпрямители для волос.^[13] Консерванты, высвобождающие формальдегид (FRP), также широко ^[14] ^{, [15]} используются в продуктах личной гигиены, включая лак для ногтей, тени для век, тушь, средства для ухода за ногтями, шампунь и румяна ^[16] для предотвращения роста бактерий. ^[17] FRP предназначены для медленного и постоянного высвобождения формальдегида с течением времени ^[18], чтобы действовать как консервант. ^[19] ^{, [20]}

IARC, Национальная токсикологическая программа (NTP) и Предложение 65 Калифорнийского агентства по охране окружающей среды (Prop 65) классифицируют формальдегид как канцероген для человека.^[21] ^{, [22],} ^[23] EPA определяет формальдегид как вероятный канцероген для человека. ^[24] Национальный институт безопасности и гигиены труда (NIOSH) также выражает обеспокоенность тем, что воздействие формальдегида приводит к раздражению глаз, носа, горла и дыхательной системы. ^[25] Стандарты для косметики в Японии запрещают использование формальдегида в косметике, ^[26] и Европейская комиссия ограничивает содержание формальдегида в косметике до концентрации не более пяти процентов в готовом продукте.^[27]

Фенацетин

Фенацетин использовался как обезболивающее и жаропонижающее до тех пор, пока не был запрещен в США Управлением по контролю за продуктами и лекарствами (FDA) в 1983 году из-за его канцерогенности. ^[28] Хотя он больше не используется в качестве лекарственного средства, он все еще иногда используется в продуктах личной гигиены в качестве стабилизатора в таких продуктах, как отбеливатель для волос на лице, краска для волос и средства для удаления волос для женщин. ^[29], ^[30]

IARC и Prop 65 идентифицируют фенацетин как канцероген для человека.^[31], ^[32] NTP перечисляет, что фенацетин и анальгетические смеси, содержащие фенацетин, считаются канцерогенами для человека. ^[33] Фенацетин также может вызывать повреждение почек и анемию. ^[34] Воздействие фенацетина связано со злокачественными опухолями молочной железы. ^[35]

Каменноугольная смола

Каменноугольная смола — известный канцероген и побочный продукт переработки угля. Он используется в косметике, содержащей краски для волос, шампуни, средства для лечения перхоти / кожи головы и покраснения / купероза.^[36]

IARC, NTP и EPA классифицируют каменноугольную смолу как известный канцероген для человека. ^{[37], [38],} ^[39] Каменноугольная смола была одним из первых профессиональных воздействий, связанных с раком; когда рак мошонки у молодых трубочистов был связан с облучением. ^[40] Он также связан с раком легких, мочевого пузыря, почек и пищеварительного тракта. ^[41] Министерство охраны окружающей среды Канады классифицирует каменноугольный пек как стойкий и токсичный по своей природе для водных организмов.^[42] Европейская комиссия запрещает использование каменноугольной смолы в косметике. ^[43]

Угольные смолы представляют собой сложные смеси, которые могут содержать другие известные канцерогены, такие как полициклические ароматические углеводороды (ПАУ), ^[44], такие как бензо [а] пирен. ^[45], ^[46] ПАУ повреждают ДНК, ^[47] и воздействие ПАУ может привести к опухолям легких, мочевого пузыря и кожи; и ПАУ могут также вызывать нераковые токсические эффекты, такие как токсичность для репродуктивной системы и развития.^[48]

Бензол

Бензол получают из каменноугольной смолы, и пути воздействия бензола — вдыхание и проглатывание. ^[49] Бензол используется в производстве пластмасс и моющих средств ^[50] и иногда в кондиционерах для волос и лосьонах для укладки. ^[51]

IARC и NTP классифицируют бензол как известный канцероген для человека. ^[52], ^[53] Prop 65 определяет бензол как фактор, вызывающий как рак, так и токсичность для развития, ^[54] и бензол могут приводить к опухолям молочной железы у самок мышей.^[55] EPA определяет бензол как известный респираторный токсикант человека. ^[56] Агентство по охране окружающей среды считает бензол одним из основных загрязнителей сточных вод, что означает, что выбросы бензола в окружающую среду регулируются. ^[57] Организация Endocrine Disrupt Exchange рассматривает бензол как эндокринный разрушитель. ^[58] Воздействие бензола на рабочем месте связано с лейкемией; а бензол может поражать органы, включая глаза, кожу, дыхательную систему, кровь, центральную нервную систему и костный мозг.^[59] Европейская комиссия запрещает использование бензола в косметике, ^[60], и это ограничено Конвенцией о защите морской среды Северо-Восточного Альтантика (OSPAR). ^[61]

Минеральные масла (необработанные и слегка обработанные)

Минеральные масла получают из сырой нефти; а минеральные масла средней степени очистки всегда содержат значительное количество ПАУ. ^[62] Минеральные масла используются в широком спектре средств личной гигиены, включая тени для век, увлажняющие средства, блеск для губ, помаду, кондиционер, краску для волос и отбеливание, уход за лицом, гель / лосьон для укладки, румяна и консилер.^[63]

IARC, NTP и Prop 65 классифицируют необработанные и слабо обработанные минеральные масла как известные канцерогенные вещества для человека. ^{[64], [65],} ^[66] NIOSH вызывает опасения, что минеральные масла могут воздействовать на органы, включая глаза, кожу и дыхательную систему, при вдыхании или контакте с кожей и глазами. ^[67]

Окись этилена

Оксид этилена является возможной примесью в продуктах личной гигиены в качестве побочного продукта процесса этоксилирования, который используется для смягчения резкого воздействия некоторых пенообразующих веществ; ^[68] Окись этилена наиболее широко используется для стерилизации медицинских инструментов.^[69] Его можно найти в табачном дыме, выхлопных газах автомобилей и пищевых продуктах. ^[70] Существуют убедительные доказательства того, что оксид этилена может вызывать лимфатический и гемопоэтический рак; а некоторые исследования выявили повышенную заболеваемость раком груди у рабочих, подвергшихся воздействию. ^[71]

Prop 65 определяет оксид этилена как фактор, вызывающий как рак, так и токсичность для развития как у женщин, так и у мужчин. ^[72] В журнале Endocrine Disrupt Exchange оксид этилена упоминается как эндокринный разрушитель.^[73] NIOSH пришел к выводу, что оксид этилена приводит к развитию рака брюшины и лейкемии; Воздействие оксида этилена при вдыхании, проглатывании и контакте с кожей и глазами может нарушить дыхательную систему, центральную нервную систему и репродуктивную систему. ^[74] Европейская комиссия запрещает использование окиси этилена в косметике. ^[75]

Тяжелые металлы

Тяжелые металлы, такие как шестивалентный хром и кадмий, служат красителями в тенях для век и блеске для губ. ^[76] ^{, [77], [78]} Другие металлы, такие как мышьяк, являются примесями в косметических ингредиентах, включая лосьон для лица, шампунь и тональный крем ^[79] ^{, [80]} в результате загрязнения мышьяком в таких ингредиентах, как D&C Red 6, октенилсукцинат крахмала алюминия, гидеогенизированное хлопковое масло и поливинилацетат.^[81] ^{, [82]}.

МАИР, Национальная токсикологическая программа и Калифорнийское предложение 65 определяют кадмий и его соединения, мышьяк и хром как канцерогены для человека; ^{[83], [84], [85]} Кроме того, хром также может вызывать проблемы в развитии как у женщин, так и у мужчин ^{. [86]}

Кадмий и его соединения

Помимо своих канцерогенных свойств, кадмий воздействует на сердечно-сосудистую, почечную, неврологическую, репродуктивную и дыхательную системы при вдыхании и проглатывании.^[87] Стандарты для косметики в Японии и Европейская комиссия запрещают использование соединений кадмия в косметике. ^{[88], [89]}

Мышьяк

Агентство по охране окружающей среды США (EPA) заключает, что существует достаточно доказательств того, что мышьяк является канцерогеном; а мышьяк также может вызывать гиперпигментацию, кератоз и возможные сосудистые осложнения. ^[90] EPA перечисляет мышьяк в качестве приоритетного загрязнителя и регулирует выбросы мышьяка; ^[91] Обмен эндокринных нарушений предполагает, что мышьяк может вызывать нарушения эндокринной системы.^[92] NIOSH демонстрирует, что воздействие мышьяка приводит к раку легких и лимфатической системы; потому что он может воздействовать на органы, включая печень, почки, кожу, легкие и лимфатическую систему, путем вдыхания, абсорбции через кожу, контакта с кожей и глазами и проглатывания. ^[93] Европейская комиссия запрещает использование мышьяка в косметике. ^[94]

Хром

Европейское химическое агентство (ECHA) считает хром канцерогеном и мутагеном. ^[95] NIOSH указывает, что воздействие хрома приводит к раку легких; а металл нацелен на органы, включая кровь, дыхательную систему, печень и почки.Это может вызвать повышение лейкоцитов в крови, повреждение глаз и кожные язвы при вдыхании, проглатывании, а также при контакте с кожей и глазами. ^[96] EPA считает, что хром обладает биоаккумуляцией и экотоксичностью. ^[97] Европейская комиссия запрещает использование хрома в косметике. ^[98]

Кремнезем

Кремнезем встречается в двух различных формах: кристаллической или аморфной; кварц является обычным минералом кристаллического кремнезема. ^[99] Вдыхаемый кристаллический кремнезем — это переносимый по воздуху загрязнитель, который может проникать в легкие при вдыхании.^[100] Кристаллический диоксид кремния широко используется в губных помадах, блесках для губ, тенях для век, подводке для глаз, тональном креме, солнцезащитном креме, лосьоне и шампунях. ^[101]

NTP и IARC перечисляют кристаллический кремнезем пригодного для вдыхания размера как известный канцероген для человека, ^{[102], [103]} и Prop 65 классифицируют кремнезем, кристаллический (взвешенные в воздухе частицы вдыхаемого размера), как канцероген. ^[104] NIOSH вызывает опасения по поводу рака легких у животных, подвергшихся воздействию кристаллического кремнезема; и это химическое вещество может поражать глаза и дыхательную систему при вдыхании, контакте с кожей и глазами.^[105]

Номер ссылки

[1] Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения. Стандарты на косметику. Доступно в Интернете: http://www.mhlw.go.jp/english/dl/cosmetics.pdf 23 июля 2014 г.

[2] Европейское химическое агентство. Деготь, уголь. Доступно на сайте: https://echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.029.417 23 июля 2014 г.

[3] Европейское химическое агентство. Деготь, уголь. Доступно на сайте: https: // echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.029.417 23 июля 2014 г.

[4] Европейское химическое агентство. Триоксид хрома. Доступно на сайте: https://echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.014.189 23 июля 2014 г.

[5] Европейское химическое агентство. Деготь, уголь. Доступно на сайте: https://echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.029.417 23 июля 2014 г.

[6] Европейское химическое агентство. Триоксид хрома. Доступно на сайте: https: // echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.014.189 23 июля 2014 г.

[7] Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения. Стандарты на косметику. Доступно в Интернете: http://www.mhlw.go.jp/english/dl/cosmetics.pdf 23 июля 2014 г.

[8] Европейское химическое агентство. Кадмий и его соединения. Доступно на сайте: https://echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.239.172 23 июля 2014 г.

[9] Европейская комиссия. Мышьяк. Доступно в Интернете: https://ec.europa.eu/food/safety/chemical_safety/contaminants/catalogue/arsenic_en 23 июля 2014 г.

[10] Международное агентство по изучению рака (IARC). Миссия МАИР. Доступно в Интернете: http://www.iarc.fr/en/about/index.php 31 июля 2014 г.

[11] Международное агентство по изучению рака. Агенты, классифицированные монографиями МАИР, тома 1-109. Доступно в Интернете: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ 31 июля 2014 г.

[12] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР. Vol. 1-109, доступно в Интернете: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 22 июля 2014 г.

[13] Управление по охране труда. Формальдегид. Доступно в Интернете: https://www.osha.gov/SLTC/formaldehyde/index.html 30 июля 2014 г.

[14] Moennich J. et al. Консервант с высвобождением формальдегида в детских и косметических продуктах. Журнал Ассоциации медсестер-дерматологов, вып. 1. С. 211-214, 2009.

[15] Джейкоб С. и Брейтхаупт А., Воздействие окружающей среды — Педиатрический взгляд на аллергический контактный дерматит. Кожа и старение.Июль 2009: 28–36.

[16] База данных продуктов Калифорнийской программы безопасной косметики. Формальдегид. Доступно в Интернете: https://safecosmetics.cdph.ca.gov/search/categories.aspx 6 августа 2014 г.

[17] Джошуа Х. и Хиллебранд Э., Определение свободного формальдегида в косметических консервантах и поверхностно-активных веществах с помощью ВЭЖХ с постколоночной дериватизацией. Американская лаборатория, т. 42, нет. 8. С. 14-15, 2010.

[18] Джейкоб С. и Брайтхаупт А., Воздействие окружающей среды — Педиатрический взгляд на аллергический контактный дерматит.Кожа и старение. Июль 2009: 28–36.

[19] Moennich J. et al. Консервант голя, высвобождающий формальдегид, в детских и косметических продуктах. Журнал Ассоциации медсестер-дерматологов, вып. 1. С. 211-214, 2009.

[20] Джейкоб С. и Брейтхаупт А., Воздействие окружающей среды — Педиатрический взгляд на аллергический контактный дерматит. Кожа и старение. Июль 2009: 28–36.

[21] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно в Интернете: https: // oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 22 июля 2014 г.

[22] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР. Vol. 1-109, доступно на сайте: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 22 июля 2014 г.

[23] Национальная токсикологическая программа Службы общественного здравоохранения Министерства здравоохранения и социальных служб США. Отчет о канцерогенных веществах. 12 ^{-е издание}, 2011г.

[24] СШААгенство по Защите Окружающей Среды. IRIS: формальдегид. Доступно в Интернете: https://cfpub.epa.gov/ncea/iris2/chemicalLanding.cfm?&substance_nmbr=419 24 июля 2014 г.

[25] Центры по контролю и профилактике заболеваний. Карманный справочник NOISH по химической опасности: нафта (каменноугольная смола). Доступно в Интернете: http://www.cdc.gov/niosh/npg/npgd0293.html 24 июля 2014 г.

[26] Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения. Стандарты на косметику. Доступно в Интернете: http://www.mhlw.go.jp/english/dl/cosmetics.pdf 23 июля 2014 г.

[27] Европейское химическое агентство. Формальдегид. Доступно на сайте: https://echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.000.002 23 июля 2014 г.

[28] Институт тихой весны. База данных обзора канцерогенов молочной железы: фенацетин. Доступно в Интернете: http://sciencereview.silentspring.org/mamm_detail.cfm?cid=62-44-2 22 июля 2014 г.

[29] Институт тихой весны. База данных обзора канцерогенов молочной железы: фенацетин. Доступно в Интернете: http: // sciencereview.silntspring.org/mamm_detail.cfm?cid=62-44-2 22 июля 2014 г.

[30] Национальная медицинская библиотека. НАЦИОНАЛЬНЫЕ ИНСТИТУТЫ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ США. Фенацетин. Доступно в Интернете: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Phenacetin 31 июля 2014 г.

[31] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно в Интернете: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 22 июля 2014 г.

[32] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР.Vol. 1-109, доступно на сайте: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 22 июля 2014 г.

[33] Национальная токсикологическая программа. Отчеты о канцерогенных веществах, четырнадцатое издание (2011 г.): фенацетин. Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/ntp/roc/twelfth/roc12.pdf 31 июля 2014 г.

[34] Национальная токсикологическая программа. Регистрационный номер CAS: 62-44-2 токсичность. Доступно в Интернете: https://ntp.niehs.nih.gov/whatwestudy/testpgm/status/ts-10378-l.html 22 июля 2014 г.

[35] Институт тихой весны. База данных обзора канцерогенов молочной железы: фенацетин. Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/testing/status/chemid/hsdb-62-44-2.html 22 июля 2014 г.

[36] База данных EWG Skin Deep Cosmetics. Каменноугольная смола. Доступно в Интернете: http://www.ewg.org/skindeep/ingredient/701514/COAL_TAR/ 28 июля 2014 г.

[37] Национальная токсикологическая программа. Отчеты о канцерогенных веществах, двенадцатое издание, 2011 г. Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/ntp/roc/twelfth/roc12.pdf 23 июля 2014 г.

[38] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР. Vol. 1-109, доступно на сайте: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 22 июля 2014 г.

[39] Агентство по охране окружающей среды США. IRIS: выбросы коксовой печи. Доступно в Интернете: http://www.epa.gov/iris/subst/0395.htm 24 июля 2014 г.

[40] Gawkrodger DJ. Профессиональные раковые заболевания кожи. Медицина труда, т. 54, pp 458-63, 2003. Доступно в Интернете: http: // occmed.oxfordjournals.org/content/54/7/458.full.pdf 6 августа 2014 г.

[41] Национальная токсикологическая программа. Отчеты по канцерогенам, двенадцатое издание, 2011 г. Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/ntp/roc/twelfth/profiles/coaltars.pdf 5 августа 2014 г.

[42] Министерство здравоохранения Канады. Каменноугольная смола. Доступно в Интернете: https://www.canada.ca/en/health-canada/services/chemicals-product-safety/coal-tars.html 28 июля 2014 г.

[43] Европейское химическое агентство. Деготь, уголь. Доступно на сайте: https: // echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.029.417 23 июля 2014 г.

[44] Национальная токсикологическая программа. Отчет о канцерогенных веществах, двенадцатое издание (2011 г.): каменноугольные смолы и каменноугольные пекы. Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/ntp/roc/twelfth/profiles/coaltars.pdf 31 июля 2014 г.

[45] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно на сайте: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 22 июля 2014 г.

[46] Агентство по охране окружающей среды США, Оценка токсичности и воздействия на здоровье детей. Бензо (а) пирен (БаП). Доступно в Интернете: https://archive.epa.gov/region5/teach/web/pdf/bap_summary.pdf 31 июля 2014 г.

[47] Национальная программа по токсичности (NTP). Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/ntp/about_ntp/bsc/2012/de December/pahresearchconcept_508be.pdf 24 июля 2014 г.

[48] Национальная программа по токсичности (NTP). Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/ntp/about_ntp/bsc/2012/de December/pahresearchconcept_508be.pdf 24 июля 2014 г.

[49] Институт тихой весны. База данных обзора канцерогенов молочной железы: фенацетин. Доступно в Интернете: http://sciencereview.silentspring.org/mamm_detail.cfm?cid=71-43-2 24 июля 2014 г.

[50] Министерство труда США. OSHA: бензол. Доступно в Интернете: https://www.osha.gov/SLTC/benzene/index.html 24 июля 2014 г.

[51] База данных продуктов Калифорнийской программы безопасной косметики. Бензол. Доступно в Интернете: https://safecosmetics.cdph.ca.gov/search/categories.aspx 31 июля 2014 г.

[52] Национальная токсикологическая программа. Регистрационный номер CAS: 62-44-2 токсичность. Доступно в Интернете: https://ntp.niehs.nih.gov/whatwestudy/testpgm/status/ts-10378-l.html 23 июля 2014 г.

[53] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР. Vol. 1-109, доступно на сайте: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 22 июля 2014 г.

[54] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность.Доступно в Интернете: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 22 июля 2014 г.

[55] Институт тихой весны. База данных обзора канцерогенов молочной железы: фенацетин. Доступно в Интернете: http://sciencereview.silentspring.org/mamm_detail.cfm?cid=71-43-2 24 июля 2014 г.

[56] Агентство по охране окружающей среды США. Исходный список опасных загрязнителей воздуха выглядит следующим образом. Доступно в Интернете: http://www.epa.gov/ttn/atw/188polls.html 24 июля 2014 г.

[57] Агентство по охране окружающей среды США. Токсичные и приоритетные загрязнители. Доступно в Интернете: http://water.epa.gov/scitech/methods/cwa/pollutants-background.cfm#pp 6 августа 2014 г.

[58] Обмен нарушениями эндокринной системы (TEDX). Бензол. Доступно в Интернете: http://endocrinedisruption.org/popup-chemical-details?chemid=401 24 июля 2014 г.

[59] Центры по контролю и профилактике заболеваний. Карманный справочник NOISH по химической опасности: бензол. Доступно в Интернете: http: // www.cdc.gov/niosh/npg/npgd0049.html 24 июля 2014 г.

[60] Европейское химическое агентство. Триоксид хрома. Доступно на сайте: https://echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.014.189 23 июля 2014 г.

[61] Комиссия ОСПАР. Список веществ, которые могут вызывать беспокойство. Доступно в Интернете: https://www.ospar.org/work-areas/hasec/hazardous-substances/possible-concern/list. Доступ 2 декабря 2020 г.

[62] Монографии МАИР. Минеральные масла, необработанные или слегка обработанные.Доступно в Интернете: http://monographs.iarc.fr/ENG/Monographs/vol100F/mono100F-19.pdf 28 июля 2014 г.

[63] База данных EWG Skin Deep Cosmetics. Минеральное масло. Доступно в Интернете: http://www.ewg.org/skindeep/ingredient/703977/MINERAL_OIL/ 28 июля 2014 г.

[64] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно в Интернете: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity. Доступ 2 декабря 2020 г.

[65] Национальная медицинская библиотека NIH. Регистрационный номер CAS: 62-44-2 токсичность. Доступно в Интернете: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Phenacetin. Проверено 23 июля 2014 г.

[66] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР. Vol. 1-109, доступно в Интернете: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 22 июля 2014 г. Доступно в Интернете: http://ntp.niehs.nih.gov/testing/status/chemid/ hsdb-62-44-2.html 23 июля 2014 г.

[67] Центры по контролю и профилактике заболеваний.Карманный справочник NOISH по химической опасности: масляный туман (минеральный). Доступно в Интернете: http://www.cdc.gov/niosh/npg/npgd0472.html 24 июля 2014 г.

[68] Монографии МАИР. Окись этилена. Доступно в Интернете: http://monographs.iarc.fr/ENG/Monographs/vol97/mono97-7.pdf 5 августа 2014 г.

[69] База данных EWG Skin Deep Cosmetics. Формальдегид. Доступно в Интернете: http://www.ewg.org/skindeep/ingredient/726229/ETHYLENE_OXIDE/ 28 июля 2014 г.

[70] Институт тихой весны. База данных обзора канцерогенов молочной железы: оксид этилена.Доступно в Интернете: http://sciencereview.silentspring.org/mamm_detail.cfm?cid=75-21-8 28 июля 2014 г.

[71] Институт тихой весны. База данных обзора канцерогенов молочной железы: оксид этилена. Доступно в Интернете: http://sciencereview.silentspring.org/mamm_detail.cfm?cid=75-21-8 28 июля 2014 г.

[72] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно в Интернете: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 22 июля 2014 г.

[73] Обмен нарушениями эндокринной системы (TEDX). Бензол. Доступно в Интернете: http://endocrinedisruption.org/popup-chemical-details?chemid=578 24 июля 2014 г.

[74] Центры по контролю и профилактике заболеваний. Карманный справочник NOISH по химической опасности: нафта (каменноугольная смола). Доступно в Интернете: http://www.cdc.gov/niosh/npg/npgd0275.html 24 июля 2014 г.

[75] Европейская комиссия. Смолы каменноугольные неочищенные и рафинированные. Доступно в Интернете: http://ec.europa.eu/consumers/cosmetics/cosing/index.cfm? fuseaction = search.details & id = 28401 23 июля 2014 г.

[76] Управление по охране труда. Шестивалентный хром. Доступно в Интернете: https://www.osha.gov/Publications/OSHA-3373-hexavalent-chromium.pdf 5 августа 2014 г.

[77] Управление по охране труда. Кадмий. Доступно в Интернете: https://www.osha.gov/SLTC/cadmium/ 5 августа 2014 г.

[78] База данных EWG по глубокой косметике. Доступно в Интернете: https://www.ewg.org/skindeep/ 5 августа 2014 г.

[79] База данных Skin Deep EWG. Вызывающие беспокойство примеси в продуктах личной гигиены. 6 августа 2014 г.

[80] База данных продуктов Калифорнийской программы безопасной косметики. Мышьяк. Доступно в Интернете: https://safecosmetics.cdph.ca.gov/search/products.aspx 30 июля 2014 г.

[81] Гормоны имеют значение. Токсины в косметике — загрязняющие вещества в ваших продуктах личной гигиены. Доступно в Интернете: http://www.hormonesmatter.com/toxins-cosmetics/ 6 августа 2014 г.

[82] База данных Skin Deep EWG.Мышьяк. Доступно в Интернете: http://www.ewg.org/skindeep/ingredient/726195/ARSENIC/ 7 августа 2014 г.

[83] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно в Интернете: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 23 июля 2014 г.

[84] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР. Vol. 1-109, доступно в Интернете: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 23 июля 2014 г.

[85] Национальная медицинская библиотека NIH. Регистрационный номер CAS: 62-44-2 токсичность. Доступно в Интернете: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Phenacetin 23 июля 2014 г.

[86] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно в Интернете: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 23 июля 2014 г.

[87] Министерство труда США. OSHA: кадмий.Доступно в Интернете: https://www.osha.gov/SLTC/cadmium/index.html 23 июля 2014 г.

[88] Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения. Стандарты на косметику. Доступно в Интернете: http://www.mhlw.go.jp/english/dl/cosmetics.pdf 23 июля 2014 г.

[89] Европейское химическое агентство. Кадмий и его соединения. Доступно на сайте: https://echa.europa.eu/substance-information/-/substanceinfo/100.239.172 23 июля 2014 г.

[90] Агентство по охране окружающей среды США (EPA). ИРИС: мышьяк, неорганический.Доступно в Интернете: https://cfpub.epa.gov/ncea/iris/iris_documents/documents/subst/0278_summary.pdf 28 января 2020 г.

[91] Агентство по охране окружающей среды США. Приоритетные загрязнители. Доступно в Интернете: http://water.epa.gov/scitech/methods/cwa/pollutants.cfm 23 июля 2014 г.

[92] Обмен нарушениями эндокринной системы (TEDX). Мышьяк. Доступно в Интернете: http://endocrinedisruption.org/popup-chemical-details?chemid=389 23 июля 2014 г.

[93] Центры по контролю и профилактике заболеваний.Карманный справочник NOISH по химической опасности: Мышьяк. Доступно в Интернете: http://www.cdc.gov/niosh/npg/npgd0038.html 23 июля 2014 г.

[94] Европейская комиссия. Мышьяк. Доступно в Интернете: http://ec.europa.eu/consumers/cosmetics/cosing/index.cfm?fuseaction=search.details_v2&id=28880 23 июля 2014 г.

[95] Европейское химическое агентство (ECHA). Список веществ, вызывающих очень серьезную озабоченность, для получения разрешения: триоксид хрома. Доступно на сайте: http://echa.europa.eu/candidate-list-table?p_p_id=substancetypelist_WAR_substanceportlet&p_p_lifecycle=0&p_p_state=normal&p_p_mode=view&p_p_col_id=column-1&p_p_col_pos=2&p_p_col_count=3&_substancetypelist_WAR_substanceportlet_delta=20&_substancetypelist_WAR_substanceportlet_keywords=&_substancetypelist_WAR_substanceportlet_advancedSearch=false&_substancetypelist_WAR_substanceportlet_andOperator=true&_substancetypelist_WAR_substanceportlet_orderByCol=INCLUSIONDATECL&_substancetypelist_WAR_substanceportlet_orderByType=desc&_substancetypelist_WAR_substanceportlet_cur=6 23 июля 2014 г.

[96] Центры по контролю и профилактике заболеваний. Карманный справочник NOISH по химическим опасностям: хромовая кислота и хроматы. Доступно в Интернете: http://www.cdc.gov/niosh/npg/npgd0138.html 23 июля 2014 г.

[97] Агентство по охране окружающей среды США. Приоритетные загрязнители. Доступно в Интернете: http://water.epa.gov/scitech/methods/cwa/pollutants.cfm 23 июля 2014 г.

[98] Европейская комиссия. Триоксид хрома. Доступно в Интернете: http://ec.europa.eu/consumers/cosmetics/cosing/index.cfm? fuseaction = search.details_v2 & id = 80923 23 июля 2014 г.

[99] Министерство труда США. OSHA: кремнезем кристаллический. Доступно в Интернете: https://www.osha.gov/dsg/topics/silicacrystalline/index.html 22 июля 2014 г.

[100] Кристаллический кремнезем и здоровье с точки зрения европейской промышленности. Что такое респирабельный кристаллический кремнезем (RSC)? Доступно в Интернете: http://www.crystallinesilica.eu/content/what-respirable-crystalline-silica-rcs 31 июля 2014 г.

[101] База данных EWG Skin Deep Cosmetics.Кремнезем кристаллический. Доступно в Интернете: http://www.ewg.org/skindeep/ingredient/705472/SILICA%2C_CRYSTALLINE_%28QUARTZ%29/ 28 июля 2014 г.

[102] Национальная токсикологическая программа Службы общественного здравоохранения Министерства здравоохранения и социальных служб США. Отчет о канцерогенных веществах. 12 ^{-е издание}, 2011г.

[103] Монографии МАИР. Агенты, классифицированные Монографиями МАИР. Vol. 1-109, доступно в Интернете: http://monographs.iarc.fr/ENG/Classification/ClassificationsAlphaOrder.pdf 22 июля 2014 г.

[104] Химические вещества, которые, как известно государству, вызывают рак или репродуктивную токсичность. Доступно в Интернете: https://oehha.ca.gov/proposition-65/crnr/chemicals-listed-known-state-cause-cancer-or-reproductive-toxicity 22 июля 2014 г.

[105] Центры по контролю и профилактике заболеваний. Карманный справочник NOISH по химическим опасностям, кремнезем, кристаллический. Доступно в Интернете: http://www.cdc.gov/niosh/npg/npgd0684.html 22 июля 2014 г.

Все дает рак | Education

Я бы не сказал, что я точно лечил рак, но до сих пор я не обращал внимания на предупреждения.Однако сейчас я достигла той стадии в жизни, когда я думаю, что, возможно, пора перестать встречаться с раком на полпути. Только что после трехнедельного отпуска, который сочетал в себе порцию алкоголя, стрессы, много солнца, много красного мяса, много пассивного курения и некоторое количество агрессивного курения, я думаю, что, возможно, мне стоит попытаться быть немного менее полезно при раке. По крайней мере, я мог избежать известных канцерогенов, хотя бы на один день. Я решил попробовать.

Моя первая ошибка произошла вскоре после пробуждения.С тех пор я обнаружил, что зубная паста содержит несколько соединений (среди них фториды и лаурилсульфат натрия), которые, по крайней мере, являются канцерогенами, как и крем для бритья, мыло и шампунь. Завтрак — это не только самый важный прием пищи в течение дня, но и коктейль из веществ, вызывающих рак. Гетероцикликамины — сильно мутагенные, возможно канцерогенные — образуются при приготовлении или сжигании пищи и обычно встречаются в кофе и тостах.

Афлатоксины, вырабатываемые естественными грибами, в небольших концентрациях обнаруживаются в молоке и зерновых.Афлатоксин B1, самый смертоносный из всех афлатоксинов, вызывает рак у мышей, крыс, хомяков, радужной форели, уток, мартышек (кстати, это неполный список), землероек, морских свинок и обезьян. К счастью, завтрак для меня не самый важный прием пищи, поэтому я с радостью его пропускаю.

Быстро становится ясно, что полное воздержание от канцерогенов сложнее, чем кажется. Когда этот известный онколог Джо Джексон впервые провозгласил: «Все / вызывает рак», я думаю, большинство людей поняли, что он говорит обо всех хороших вещах в жизни — курении и питье, красном мясе и пестицидах на основе ДДТ.Но беглый взгляд даже на неполный список известных канцерогенов человека доказывает, что он мог говорить буквально.

Выход на полуденное солнце представляет очевидный риск, но из-за того, что радон проникает в ваш дом из почвы под землей, остается нахождение в помещении. Подняться в воздух не лучше: полеты на большой высоте обычно подвергают пассажиров и экипаж воздействию радиации, а бесплатный арахис со следами канцерогенных токсичных метаболитов грибов тоже не очень помогает.

Вскоре после того, как я не позавтракал, я решил уединиться в своем офисе на самом верху дома, как можно дальше от рака, не заболеть раком, где я прочитал о 15 известных канцерогенных веществах, обычно используемых в кровельных материалах.

Голод в конце концов заставил меня вернуться на кухню, чтобы я хотел приготовить салат, не вызывающий рака, но и здесь выхода не было. Хотя риск заражения раком от фруктов и овощей остается небольшим, большая часть этого риска связана с канцерогенными веществами природного происхождения, обычно с органическими пестицидами, производимыми самими растениями для защиты от хищников. Брокколи, яблоки, лук, апельсины, клубника, лимоны и грибы содержат ацетальдегид, естественный побочный продукт окисления и известный канцероген для человека.Если вы закроете глаза, вы практически почувствуете вкус.

Нитраты, которые организм человека может преобразовывать в канцерогенные соединения нитрозаминов, присутствуют в таких, казалось бы, безвредных продуктах, как сельдерей, салат, капуста и ревень. Нитриты, которые уже наполовину превратились в нитрозамины, содержатся в колбасах. Канцерогены специфичны для водопроводной воды, базилика, пива и горчицы. ПХБ, вызывающие рак, обнаруживаются во всех пищевых продуктах в разном количестве. Принято считать, что не существует такой вещи, как диета, свободная от канцерогенов, поэтому беспокоиться об этом нет смысла, хотя непонятно, как вторая часть следует из первой.

Конечно, хорошо известно, что определенные продукты питания обладают антиканцерогенными свойствами: сероорганические соединения, флавоноиды, дубильные вещества и каротиноиды подавляют некоторые формы рака. К сожалению, эти антиканцерогены, как правило, содержатся в продуктах, которые также содержат канцерогены — хорошо известные убийцы, такие как брокколи, лук, клубника и капуста. Даже несмотря на то, что эти овощи предохраняют вас от рака, они вызывают рак.

Прямой прием канцерогенов в настоящее время считается довольно старомодным способом заболеть раком.В наши дни простое пребывание в окружении на продолжительное время — то, что раньше называлось стоять и заниматься своим делом — уже достаточно канцерогенно. Дизельные выхлопные газы, асбест, формальдегид в обычном домашнем воздухе и кристаллический кремнезем пригодного для вдыхания размера (например, пыль) — все они перечислены как канцерогены.

Раком можно заразиться из-за воска на полу, краски на стенах и красок на рубашке. Мы все постоянно подвергаемся воздействию винилхлорида, газа, выделяемого ПВХ-пластиком, который иногда называют запахом новых автомобилей.Затем идет изопрен, который Национальная токсикологическая программа США описывает как «разумно предполагаемый канцероген для человека». Изопрен выделяется резиновыми изделиями (натуральными и синтетическими), автомобилями и деревьями и обычно содержится в выдыхаемом человеческом дыхании. Когда вы вдыхаете, вы заболеете раком; когда вы выдыхаете, вы отдаете его кому-то другому.

Популярная идея о том, что абсолютно все вызывает рак, наконец подтверждается тем фактом, что многие методы лечения рака, такие как цисплатин, сами по себе вызывают рак.Таким образом, даже если вы умираете от рака, вы также можете заболеть раком. Это в некотором роде менее тревожная перспектива, немного похожая на обнаружение канцерогенности горчичного газа (а это так).

Если вы когда-либо сомневаетесь, вызывает ли у вас рак, то, что вы делаете, едите или вдыхаете, Интернет всегда готов подтвердить ваши худшие опасения. Зайдите в любую поисковую систему, введите название любого распространенного продукта или вещества (травяной чай, лак для ногтей, заливные угри, смягчитель ткани), затем введите рак и нажмите клавишу возврата.Вы не будете разочарованы.

В конечном счете, однако, представление о канцерогенности всего сущего вводит в заблуждение; риски сильно различаются в зависимости от дозы, продолжительности воздействия и множества других факторов.

Канцерогенные свойства: Что нужно знать о канцерогенах

Что нужно знать о канцерогенах

ПРОДУКТЫ, КОТОРЫЕ ПРОВОЦИРУЮТ РАК

У сотен распространенных химических веществ обнаружили канцерогенные свойства — Наука

оценка канцерогенных свойств лекарственных средств

Исследование препаратов на канцерогенность

Канцерогенность: основные положения исследования

Окружающая среда, жилище и профилактика рака

КАНЦЕРОГЕННЫЕ СВОЙСТВА ГИДРОЛИЗАТОВ КОКОСОВОГО МАСЛА | Noskova

КАНЦЕРОГЕННЫЕ СВОЙСТВА ГИДРОЛИЗАТОВ КОКОСОВОГО МАСЛА

Аннотация

Ключевые слова

Литература

Эндокринная терапия рака молочной железы: канцерогенные эффекты тамоксифена uMEDp

Информационный бюллетень о рисках, связанных с алкоголем и раком

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Что сохраняется в файле cookie?

Влияние гидростатического давления на канцерогенные свойства эпителия

Введение

Результаты и обсуждение

Гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны запускает расслоение эпителия в клетках MDCK I

Гидростатическое давление от базальной до апикальной стороны вызывает расслоение эпителия в клетках Caco-2, но не в клетках MDCK II

Динамика и обратимость расслоения эпителия гидростатическим давлением

Влияние гидростатического давления на полярность ячейки

Локализация белков TJ в многослойном эпителии, индуцированная гидростатическим давлением

Барьерная функция TJ вокруг полостей в многослойном эпителии

Влияние гидростатического давления на пролиферацию клеток

Влияние гидростатического давления на апоптоз клеток

Влияние гидростатического давления на трансэпителиальный транспорт

Участие передачи клеточных сигналов в стратификации эпителия за счет гидростатического давления

Материалы и методы

Культура клеток

Антитела и реагенты

Просвечивающая электронная микроскопия

Сканирующая электронная микроскопия

Световая микроскопия и индекс стратификации

Электронная микроскопия замерзания трещин

Иммуноцитохимия

BrdU проба

TUNEL анализ

Количественное определение остатков в культуральном супернатанте

Иммуноблоттинг

Электрофизиологические измерения

Трассирующий флюс

Анализ поверхностного биотинилирования

Исследования ингибиторов и активаторов сигналов

Статистический анализ

Биомониторинг воздействия металлических соединений с канцерогенными свойствами на JSTOR

Каннабис и табачный дым не одинаково канцерогены | Журнал снижения вреда

Канцерогены в косметике — безопасная косметика

Все дает рак | Education

Добавить комментарий Отменить ответ

Рубрики