Пчелы пыльца: Пчелиная пыльца: полезные свойства и вред, какую стоит употреблять и где купить.
Сбор пыльцы (обножки)
Спрос на цветочную пыльцу на рынке ежегодно растет, так как за последние годы сделаны большое количество всевозможных исследований этого продукта пчеловодства и теперь уже во всем мире широко известны ее питательные, полезные и целебные свойства.Соответственно где спрос — там и предложение. Многие пасеки занимаются не только выкачкой меда, но и производят сбор пыльцы. Сбор пыльцы, а вернее пчелиной обножки производят на пасеках во время обильного приноса ее пчелами в улья. Цветочная пыльца собирается пчелами с цветков растений медоносов и используется ими в качестве белкового корма. Обычно пчелы собирают пыльцу с растений и цветов, которые выделяют одновременно нектар (например: подсолнечник, белый клевер, цветы акации, ива, одуванчик и др.), но в некоторые периоды, особенно ранней весной, когда цветы медоносы еще не распустились, пчелы собирают пыльцу с опыляемых ветром растений (дуб, береза, ольха, орешник, грецкий орех, осина и др.) По цвету пыльцы можно определить, с каких растений она была собрана.
Например, пыльца с ивы — светло-желтая, с цветов одуванчика — оранжевая, с разнотравья — желтая, с клевера — коричневая, с яблони — светло-зеленая, а с кипрея — темно-синяя и так далее, сколько растений — столько и оттенков пыльцы. Пчелы собирают зерна пыльцы с цветков и, чтобы уложить их в корзиночки, располагающихся на задних лапках пчелы, увлажняют их нектаром и секретом особой железы. Получаются яркие цветные комочки гранулы. Это и есть пчелиная обножка. Важность этого продукта для пчелиных семей трудно переоценить. Пчелы кормилицы используют пыльцу для выработки маточного молочка, которым обильно питается матка, а также личинки рабочих пчел в первые три дня. Пыльцу потребляют только что родившиеся пчелы для набора силы, пчелы-строители — для правильной работы восковых желез, а трутни — для нормального полового развития.
Сбор пыльцы на пасеке производится с помощью пыльцеуловителей — специальных задвижек с круглыми прорезями диаметром 5мм для прохождения пчелы в улей, которые крепятся на переднюю стенку улья перед летком.
Пчелы проходя сквозь отверстия теряют часть переносимой пыльцы, которая скатывается в пыльцесборники.
За один вылет каждая пчела собирает около 15 мг пыльцы в двух обножках, таким образом за сезон одна пчелиная семья может собрать от 20 до 30 кг пыльцы. Но не стоит волноваться, что организовав сбор пыльцы на пасеке, Вы лишите пчелиные семьи корма. Далеко не вся пыльца попадает в пыльцеуловители, а только около 20-40%, что не сильно отражается на жизнедеятельности пчел. Исследования показали, что при сборе одного килограмма пыльцы пчелы теряют всего 250 грамм меда. К тому же не стоит устанавливать пыльцеуловители на ульях на продолжительное время. Так как пчелы имеют способность приспосабливаться к пыльцеуловителям и перестают терять обножку при прохождении пыльцеуловителя, соответственно сбор пыльцы на пасеке постепенно сокращается. Чтобы этого избежать рекомендуется устанавливать пыльцеуловители на пять-семь дней, после чего снимать их на неделю, чтобы пчелы успели отвыкнуть.
Таким образом при хорошей работоспособности пчел, за день с одной пчелиной семьи можно собрать около 60-120 гр пыльцы, а это в итоге 2-4 килограмма с одной семьи за сезон.
При сборе пыльцы стоит учесть, что она очень хорошо впитывает влагу. При высокой влажности пыльца может подвергнуться брожению, в результате чего она придет в негодность и не будет годиться в пищу.
Скатившуюся в пыльцеуловители обножку необходимо ежедневно собирать и просушивать.
На небольших пасеках собранную пыльцу просушивают естественным способом, высыпав и аккуратно распределив ее на бумаге ровным слоем толщиной не более 1 см. Пыльцу необходимо периодически перемешивать для равномерной сушки. Сушка проходит в сухом хорошо проветриваемом помещении.
На крупных пасеках, занимающихся пчеловодством как бизнесом, для сушки пыльцы используют специальные сушильные шкафы.
После просушки пыльцу расфасовывают в полиэтиленовые пакеты, которые складывают в стеклянную, непрозрачную , герметично закрывающуюся тару. Хранить собранную пыльцу рекомендуется при температуре от 2 до 4 градусов Цельсия не больше года.
Помимо пыльцы на пасеках осуществляют сбор прополиса, как ценного продукта пчеловодства.
Более подробно об этом процессе можно прочитать в статье Сбор прополиса.
Поделиться с друзьями:
Здоровье на лапках пчелы. Рязанские ученые создают препараты из пыльцы | Полезные советы | ЗДОРОВЬЕ
Изучение пчёл и продуктов их жизнедеятельности — процесс, по мнению многих ученых, практически бесконечный: сколько еще тайн хранит в себе это крохотное создание, остается лишь гадать. Ясно лишь одно — потенциал в этой отрасли для человечества огромный.
В НИИ пчеловодства, уникальном российском учреждении с почти вековой историей, расположенного в городе Рыбное, исследовательская работа не прекращается, несмотря на кризисные времена. О том, каковы перспективы внедрения разработок рязанских учёных-пчеловодов, «АиФ-Рязань» рассказала кандидат биологических наук, энтомолог, старший научный сотрудник НИИ пчеловодства Наталия Билаш.
От БАДа до лекарства
Екатерина Смбатян, «АиФ-Рязань»: Наталия Григорьевна, расскажите о Ваших последних исследованиях.
Наталия Билаш: Сейчас мы планируем совместные исследования с учеными Рязанского государственного медицинского университета имени академика Павлова. Группа учёных под руководством заведующего кафедрой гистологии и биологии, профессора Юрия Ухова и профессора Ольги Баковецкой с большим интересом отнеслась к инновационному продукту НИИ пчеловодства. Вместе мы будем изучать биологические свойства пчелиной обножки, на основании которых её можно будет применять в качестве эффективного средства, повышающего жизненные силы и устойчивость организма при разных нагрузках, в том числе при стрессе.
Мы будем с нетерпением ждать результаты этой научно-исследовательской работы. Надеюсь, что в итоге мы разработаем замечательный отечественный продукт, помогающий людям.
— Насколько реально создавать такие препараты у нас в стране, в Рязанской области?
До сих не все тайны пчел разгаданы учеными. Фото: Commons.wikimedia.org— Вопрос о создании препаратов — не ко мне.
Пчелиная обножка — это пыльца, которую собирает пчела на задние лапки, перелетая с цветка на цветок. В это время пыльца обрабатывается на лапках ферментами, выделяемыми пчелой. Обножка обладает уникальным составом компонентов. Однако сложность в том, как из неё добыть эти самые компоненты. За годы работы удалось нам разработать технологию, позволяющую выделить биологически активные комплексы, которые могут найти широкое применение при создании оздоровительных продуктов, БАДов, в перспективе и фармацевтических форм.
«Валенки» из пыльцы
— Как же удалось заставить пчелу «снять» эти валеночки из пыльцы и добыть полезные вещества?
— Люди давно придумали устанавливать специальные барьеры: пока пчела не «очистит» о них лапки, домой она не попадёт.
Что касается пыльцевых зёрен, из которых и состоит обножка, то они покрыты оболочкой, устойчивой как к механическому воздействию, так и химическому. Извлечь комплекс веществ можно только через ростовое отверстие. Что мы и сделали, используя ферменты и воду. В итоге раствор проник внутрь пыльцевых зёрен, а обратно вышел уже с растворившимися в нём веществами из содержимого зёрен. Но главное, что используемые растворители экологически чистые: они не разрушают полезные вещества пыльцы и не несут никакого вреда организму человека.
Пыльца, которую собирают пчелы — настоящий кладезь целебных веществ. Фото: Commons.wikimedia.org— Помимо свойств самой пыльцы, она ещё и с ферментом пчелы уже связана. Что из этого получилось?
— Более 200 биологически активных компонентов! Среди них витамин Е, активность которого в 11 раз больше химических аналогов, полиненасыщенные жирные кислоты Омега-3 и Омега-6, антиканцерогенный компонент, витамины группы В, группы С, свободные аминокислоты, минералы — очень много фосфора, магния, калия, натрия, цинка и селена.
Плюс пищевые волокна, сорбент, снижающий уровень холестерина, интоксикацию, использующийся для профилактики рака прямой кишки.Ранозаживляющие, противовоспалительные — перечислять все свойства содержащихся в обножке веществ можно долго, в фармакологии диапазон их применения огромен, не говоря уже о косметологии. Но главное — всё это природные, а не химические вещества.
Богатство под ногами
— То, что продукты пчеловодства необычайно полезны, знают все, однако пользуются этим подарком природы очень немногие. Как Вы думаете, почему?
— Нужно, чтобы самих препаратов было больше, и они были доступными. Их нужно создавать. А на разработку одного препарата в Японии, например, уходит до 15 лет. И это при их-то базе!
Препараты из продуктов пчеловодства — это фактически биологически-активные добавки, чаще называемые БАДы. У российского обывателя они воспринимаются как лекарства.
И подход такой: «Я выпил, и должно тут же помочь, как от антибиотика». А БАД — это образ жизни.
Японцы, например, принимают маточное молочко и мёд уже с детского сада, у людей после 40 лет это становится образом жизни. И эта работа проводится на государственном уровне.
Тот же подход в Китае. Пыльцу там используют как антивозрастное средство. Дело в том, что пыльца — это половая клетка растения, содержащая самые ценные вещества, отмеренные природой на этот вид. И на её основе можно создать огромное количество композиций, позволяющих сохранять здоровье. А у нас такой культуры нет. И одна из причин — отношение людей. Мы лучше выпьем горсть таблеток, если совсем плохо, но мы не готовы всю жизнь строить планы поддержки здоровья, помогая своему организму. Не берём на себя этот труд.
Клиника Genesis Dnepr
СПЕРМА ЦВЕТОВ ДЛЯ ЗДОРОВЬЯ
« Сон, вызванный полетом пчелы вокруг граната, за секунду до пробуждения»
Сальвадор Дали
ЦВЕТОЧНАЯ ПЫЛЬЦА является мужским началом растений, она вырабатывается пыльниками окружающими цветочный пестик, располагающийся по центру цветка .
Пыльца используеться растениями для оплодотворения с целью производства СЕМЯН ( размножения растений ) ,
а пчелы собирая ее для своего потомства , попутно опыляют цветок и способствуют переносу пыльцы от тычинки к пестику …что и являеться сутью оплодотворения растений …
Когда пчела посещает цветки растений, к её телу прилипает большое количество зёрен пыльцы. Чтобы не растерять пыльцу и для удобства её транспортировки в улей, пчела тут же на цветке либо при полёте «вычёсывает» пыльцу специальными щёточками ног и складывает её в виде маленьких комков в т. н. «корзиночки» на задней паре ног. При этом пчела склеивает отдельные зёрна пыльцы секретом своих слюнных желёз.
ТАК ПОЛУЧАЕТЬСЯ » ПЧЕЛИННАЯ ПЫЛЬЦА » или «ОБНОЖКА»
Итак , «ЦВЕТОЧНАЯ ПЫЛЬЦА «- это вещество , которое используеться растениями для полученя своего потомства — СЕМЯН ,
а пчелы собирают и транспортируют ее для выращивания собственного ПОТОМСТВА , смачивая цветочную пыльцу продуктом слюных желез , которые и запускают процессы ферментации тем самым меняющие свойства пыльцы , создают по сути другой продукт «ПЧЕЛИНУЮ ПЫЛЬЦУ » как продукт пчеловодства .
Уже люди берут этот продукт у пчел с помощью ПЫЛЬЦЕУЛОВИТЕЛЯ т.е. устройства для отбирания у пчел пыльцы. Этот простой и доступный каждому пчеловоду прибор, помещается у летка. Пыльцеуловитель пропускает пчел в улей и задерживает пыльцу из корзинок. Опыты показали, что от сильной пчелиной семьи с помощью пыльцеуловителя можно получить 100 г цветочной пыльцы в день, а за летний сезон — 5 — 6 кг.
СОСТАВ
ПЧЕЛИННАЯ ПЫЛЬЦА — это еда для молодых пчел, которая примерно на 40% состоит из белка в виде свободных аминокислот , уже готовых для использования организмом . Она считается одним из наиболее полноценных питательных продуктов природы в мире .
Витаминов в пыльце столько, что проще сказать, каких среди них нет , содержатся практически все известные на сегодняшний день.
Среди минеральных и химических веществ в пыльце присутствуют: калий, фосфор, магний, кремний, кальций, медь, железо, сера, титан, хлор, марганец, серебро, барий, золото, палладий, вольфрам, ванадий, иридий, цинк, кобальт, мышьяк, платина, олово – всего более 28 элементов, которые являются стимуляторами биохимических и физиологических процессов организма.
Пчелиную пыльцу анализировали тысячи раз на новейшем диагностическом оборудовании, но, тем не менее, в пчелиной пыльце есть некоторые элементы, которые наука не может определить.
Пчелы добавляют что-то таинственное «свое».
Эти неопределяемые элементы вполне могут быть причиной такого эффективного действия пчелиной пыльцы в отношении множества различных проблем со здоровьем.
ПРИМЕНЕНИЕ В МЕДИЦИНЕ :
ЛЕЧЕНИЕ БЕСПЛОДИЯ У МУЖЧИН И ЖЕНЩИН
ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА ПРОСТАТИТА У МУЖЧИН
ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ВЫНОСЛИВОСТИ И РАБОТОСПОСОБНОСТИ после оперативных вмешательств и у спортсменов .
ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВСЕХ ВИДОВ ЗАВИСИМОСТЕЙ
ЛЕЧЕНИЕ ВСЕЙ ГРУППЫ КИШЕЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯ И ЖЕЛУДКА
ПРИ АНЕМИЯХ
ПРИ НАРУШЕНИИ МОЗГОВЫХ ФУНКЦИЙ У ДЕТЕЙ И ПОЖИЛЫХ
ЗАЩИЩАЕТ ОТ РАДИАЦИИ
ОБЛАДАЕТ ПРОТИВОРАКОВЫМИ СВОЙСТВАМИ И ИСПОЛЬЗУЕТЬСЯ ДЛЯ СНИЖЕНИЯ ПОБОЧНЫХ ЭФФЕКТОВ ХИМИОТЕРАПИИ :
В Венском университете д-р Питер Хернусс (Peter Hernuss) с коллегами провели исследование 25 женщин, страдающих от неоперабельного рака матки.
Поскольку операция была невозможна, женщин лечили химиотерапией.
У пациенток , которые получали пчелиную пыльцу с пищей, быстро возросла концентрация клеток иммунной системы, борющихся с раком, увеличилась выработка антител и заметно улучшился уровень красных кровяных телец .
Кроме того, эти женщины меньше страдали от ужасных побочных эффектов химиотерапии. Пчелиная пыльца уменьшила страшную тошноту, которой, как правило, сопровождается лечение, и помогла свести потерю волос к минимуму. Помимо этого, женщины лучше спали ночью.
ОСОБЕННОСТИ ДЕЙСТВИЯ ПЫЛЬЦЫ ПРИ ПРОБЛЕМАХ С ЗАЧАТИЕМ :
Пыльца стимулирует функцию яичников. Наилучшие результаты были получены при приеме добавок с пыльцой с рационом и ЗАМЕЩЕНИИ ЖИВОТНЫХ БЕЛКОВ ПЫЛЬЦОЙ .
Интенсивность овуляции увеличилась.
Параллельно увеличению овуляции, пыльца также улучшает способность яйцеклеток выдерживать инкубационный период.
Наилучшие результаты были получены при добавлении в рацион пыльцы , в результате чего выросла процентная доля яйцеклеток , по сравнению с контрольной группой.
ЛЕЧЕНИИ АЛЛЕРГИИ !!!!! :
Пчелинная пыльца — средство от сенной лихорадки, и аллергии. Вот только принимать ее нужно начинать хотя бы за шесть недель до начала сезона, а затем продолжать прием в течение всего сезона, если она будет помогать.
Веками пчелиную пыльцу с успехом применяли, чтобы помочь аллергикам избавиться от страданий. Этот метод — десенсибилизация — был разработан на рубеже века в медицинской школе больницы Святой Марии в Лондоне.
Лечение состоит во введении небольшого количества аллергена, чтобы стимулировать собственную иммунную систему пациента вырабатывать антитела, которые позволят устранить аллергическую реакцию. Похоже на вакцинацию от детских болезней.
Десенсибилизация основывается на предпосылке, что введение аллергена заставит организм вырабатывать антитела, которые будут подавлять реакцию на проблемное вещество, если пациент снова подвергнется его воздействию.
Врач Лео Конвей (Leo Conway) из Денвера (Колорадо) лечил своих пациентов пыльцой.
Д-р Конвей сообщил:
«Ни у одного пациента, который принимал антиген [пыльцу] в течение трех лет, не возникало никаких симптомов аллергии, независимо от того, где он жил и как питался»
СНИЖЕНИЕ ВЕСА:
Пчелиная пыльца творит чудеса для контроля веса или режима его стабилизации путем коррекции возможного нарушения химического баланса метаболизма в организме, который может лежать в основе ненормального увеличения или снижения веса.
Нормализующее и стабилизирующее действие этой идеальной пищи от пчел феноменально.
Она ускоряет сжигание калорий путем разжигания метаболических пожаров.
Пыльцу медоносных пчел скоро признают истинным натуральным продуктом для похудения. Пчелиная пыльца — низкокалорийный продукт.
Существенно повышая значение каждого питательного вещества, присутствующего в пище, которую вы едите, пчелиная пыльца еще и устраняет тягу к еде за счет аминокислоты фенилаланин .
Самый лучший лечебный эффект цветочная пыльца имеет в том случае, когда она СВЕЖАЯ , ведь после года ее хранения (даже правильного) она уже теряет 75% своей ценности .
НА «ЗАКУСКУ «
Пчелы это содружество особей по производству продуктов питания и строительного материала. Ведь вылетая на работу в полевых условиях, пчела собирает только три вида ресурса: НЕКТАР ( сахар ) , пыльцу ( пыльза растений ) и смолу.
Пройдя производство в улье, эти ресурсы превращаются в МЕД , ПЕРГУ , ПРОПОЛИС и ВОСК это для пчел .
Человек же берет из улья гораздо больше :
ПЧЕЛИННУЮ ПЫЛЬЦУ ( ОБНОЖКУ ) ( ферментированная цветочная пыльца )
МЕД ( фруктоза и глюкоза 75 % и сахароза 4% ) — корм для пчел .
ПЕРГУ (смесь меда , обножки и молочной кислоты ) — белковый корм для выращивания личинок пчел .
ПРОПОЛИС -смолистое вещество вырабатываемое пчёлами для замазывания щелей, регулирования проходимости летка, дезинфекции ячеек сот перед засевом яиц маткой, а также изоляции посторонних предметов в улье —
МАТОЧНОЕ МОЛОЧКО — используеться для питания пчелинной матки и личинок . Матка производит 2000 яиц в день
ЛИЧИНОЧНОЕ МОЛОЧКО ( ТРУТНЕВЫЙ ГОМОГЕНАТ ) — получают его обычно пресованием (выжимкой) кусочков сота с трутневыми, только что запечатанными или еще открытыми, личиночками.
ПОДМОР ( концентрат получаемый из умерших пчел ) — бесценный источник хитозана
ПЧЕЛИННЫЙ ЯД — продукт секреторной деятельности желез рабочих особей медоносной пчелы.
ЗАБРУС — срезанные крышечки с сотых перед откачкой меда .
ВОСК — для производства пчеласи сотых для меда .
все продукты обладают уникальными свойствами и используються в медицине ,
но только применение натурального и свежего ( не консервированного ) продукта обеспечивает лечебный эффект .
ПРОДУКТЫ ПЧЕЛОВОДСТВА ЭТО ЦЕЛЫЙ МИР
ПО СУТИ РЕАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ ДОКАЗАННОЙ ВЕКАМИ
Перелыгин И.В.
Пыльца цветочная (обножка). Технические условия – РТС-тендер
ГОСТ 28887-90
Группа С52
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
МКС 65.140
ОКСТУ 9882
Дата введения 1991-07-01
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН НИИ пчеловодства Пчелопрома РСФСР
2.
УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по управлению качеством продукции и стандартам от 29.12.90 N 3747
3. Срок проверки — III кв. 1993 г.
4. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
5. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
6. Ограничение срока действия снято по протоколу N 5-94 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 11-12-94)
7. ПЕРЕИЗДАНИЕ. Март 2011 г.
Настоящий стандарт распространяется на сухую цветочную пыльцу (пчелиные обножки), заготовляемую для использования в пищевых и кормовых целях, а также для промышленной переработки.
Требования настоящего стандарта являются обязательными.
1.1. Сухая цветочная пыльца должна соответствовать требованиям настоящего стандарта и изготовляться по технологической документации, утвержденной в установленном порядке.
1.2. Характеристики
1.2.1. По органолептическим и физико-химическим показателям цветочная пыльца должна соответствовать требованиям, указанным в таблице.
Наименование показателя | Характеристика и норма |
Внешний вид | Зернистая масса, легко сыпучая |
Консистенция обножки | Твердая, в пальцах не разминается, при надавливании твердым предметом плющится или частично крошится |
Размер зерна, мм | 1,0-4,0. Допускаются распавшиеся обножки в количестве не более 1,5% массы пробы |
Цвет | От желтого до фиолетового и черного |
Запах | Специфичный медово-цветочный, характерный для обножки |
Вкус | Пряный, сладковатый, может быть горьковатым или кисловатым |
Массовая доля механических примесей, %, не более | 0,1 |
Массовая доля влаги, % | От 8 до 10 |
Концентрация водородных ионов (рН) 2% водного раствора пыльцы, не менее | 4,3-5,3 |
Массовая доля сырого протеина, %, не менее | 21,0 |
Массовая доля сырой золы, %, не более | 4,0 |
Массовая доля минеральных примесей, %, не более | 0,6 |
Массовая доля флавоноидных соединений, %, не менее | 2,5 |
Показатель окисляемости, с, не более | 23,0 |
Ядовитые примеси | Не допускаются |
1.
2.2. Содержание тяжелых металлов и остаточных количеств пестицидов не должно превышать максимально допустимого уровня, утвержденного Минздравом СССР.
1.2.3. Не допускается пораженность пыльцы патогенными микроорганизмами, плесенью, личинками моли и др.
1.3. Упаковка
1.3.1. Цветочную сушеную пыльцу расфасовывают в чистые, прочные, без посторонних запахов герметично закрывающиеся:
банки стеклянные по ГОСТ 5717.1, ГОСТ 5717.2;
пакеты из полиэтиленовой пленки ПЦ-2, дублированной целлофаном по ГОСТ 7730;
мешки бумажные по ГОСТ 2226*, марки ВНМ, верхний слой — из влагопрочной бумаги.
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53361-2009.
1.3.2. Цветочную пыльцу (обножку) расфасовывают массой нетто до 20 кг.
1.3.3. Стеклянная, металлическая, картонная, бумажная или полиэтиленовая тара с цветочной пыльцой должна быть упакована в сухие, без посторонних запахов дощатые плотные ящики по ГОСТ 13358, ГОСТ 10131.
Дно, боковые стенки ящиков и пространство между единицами упаковки должны быть проложены сухим без постороннего запаха материалом (стружка, пенопласт, картон) с целью предупреждения перемещения тары в ящике.
1.4. Маркировка
1.4.1. Маркировку наносят на тару или бумажные этикетки непачкающейся краской печатным или типографским способом по ГОСТ 14192.
Этикетки к таре и упаковочным единицам приклеивают.
2.1. Цветочную пыльцу принимают партиями. Партией считают любое количество одного года сбора однородной по всем показателям цветочной пыльцы, предназначенной к единовременной приемке-сдаче и оформленное одним документом о качестве, в котором указывают:
номер документа;
год сбора цветочной пыльцы пчелами;
название основных пыльценосов и нектароносов;
массу брутто и нетто;
дату изготовления и расфасовки;
номер партии и количество мест в партии;
результаты испытаний;
обозначение настоящего стандарта;
печать предприятия-изготовителя.
2.2. При возникновении разногласий в оценке качества цветочной пыльцы проводят повторный отбор проб и испытание.
Результаты повторных испытаний распространяют на всю партию.
3.1. Методы отбора проб
3.1.1. Для проверки качества цветочной пыльцы на соответствующие требования стандарта зерновым щупом из разных упаковочных мест партии отбирают цветочной пыльцы 1%, если масса партии до 100 кг и 0,5% — если масса партии свыше 100 кг. Из отобранной цветочной пыльцы для проведения испытаний берут методом квартования среднюю пробу массой от 100 до 200 г.
Для этого отобранную цветочную пыльцу разравнивают в виде квадрата слоем толщиной не менее 3 см и по диагонали делят на четыре части. Два противоположных треугольника удаляют, а два оставшихся соединяют вместе и пыльцу перемешивают. Эту операцию повторяют до тех пор, пока не останется такое количество сырья, которое соответствует массе средней пробы.
3.1.2. Среднюю пробу цветочной пыльцы тщательно перемешивают и делят на две части. Одну часть цветочной пыльцы используют при испытании, а другую помещают в сухую, чистую стеклянную банку по ГОСТ 5717.2 вместимостью от 50 до 100 см, закрывают крышкой или притертой пробкой и парафинируют. На банку наклеивают этикетку и хранят в течение 3 мес для испытаний в случае разногласий между потребителем и поставщиком.
3.2. Внешний вид и цвет цветочной пыльцы определяют визуально при естественном дневном освещении. Запах, вкус, консистенцию, пораженность плесенью или личинками моли определяют органолептически.
3.3. Содержание сырого протеина, сырой золы, показателя окисляемости, флавоноидных соединений и ядовитых примесей определяют при наличии разногласий в оценке качества продукта.
3.4. Определение механических примесей
3.4.1. Аппаратура
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104*.
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.
Пинцет медицинский по ГОСТ 21241.
3.4.2. Проведение испытания
Навеску обножки массой 100 г взвешивают с погрешностью не более 0,01 г, раскладывают на чистом листе бумаги. Пинцетом выбирают примеси и взвешивают с погрешностью не более 0,01 г.
3.4.3. Обработка результатов
Массовую долю механических примесей () в процентах вычисляют по формуле
,
где — масса навески обножки, г;
— масса механических примесей, г.
За окончательный результат испытаний принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не должно превышать 0,5%.
Пыльцу цветочную ссыпают в банки и используют для испытаний.
3.5. Определение массовой доли влаги
3.5.1. Аппаратура, материалы
Шкаф сушильный лабораторный с температурой нагрева до 110 °С.
Термометр лабораторный.
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.
Эксикатор по ГОСТ 25336.
Электроплитка по ГОСТ 14919.
Стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 25336.
Палочка стеклянная.
Щипцы тигельные.
Чашки фарфоровые по ГОСТ 9147, диаметром 6-7 см.
Кальций хлористый (плавленый) по ТУ 6-09-4711*.
________________
* ТУ, упомянутые здесь и далее по тексту не приводятся. За информацией о документе Вы можете обратиться в Службу поддержки пользователей. — Примечание изготовителя базы данных.
3.5.2. Подготовка к испытанию
3.5.2.1. Эксикатор заправляют предварительно высушенным, прокаленным и охлажденным хлористым кальцием.
3.5.3. Проведение испытания
Две навески цветочной пыльцы по 1,5 г, взвешенных с погрешностью не более 0,001 г, помещают в бюксы, предварительно доведенные до постоянной массы. Открытые бюксы с пыльцой и крышкой от бюксы сушат в сушильном шкафу 5 ч при температуре 105 °С, или в вакуумном шкафу при температуре 80 °С. Затем бюксы с пыльцой закрывают крышкой и ставят в эксикатор над хлористым кальцием, охлаждают в течение 1 ч. Каждую бюксу с пыльцой взвешивают и снова сушат в течение 1 ч. Высушивание продолжают до постоянной массы. Масса считается постоянной, если разница между двумя последующими взвешиваниями после одночасового высушивания и одночасового охлаждения в эксикаторе не превышает 0,001 г.
3.5.4. Обработка результатов
Массовую долю влаги () в процентах в цветочной пыльце вычисляют по формуле
,
где — масса навески до высушивания, г;
— масса навески после высушивания, г.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, вычисленных с точностью до 0,1%. Допускаемое расхождение между результатами двух параллельных определений не должно превышать 0,3%.
3.6. Определение концентрации водородных ионов (рН) водного раствора цветочной пыльцы с массовой долей 2%
3.6.1. Аппаратура, материалы, реактивы
Мельница лабораторная.
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.
Лабораторный рН-метр типа ЛПУ-01 или другой марки, чувствительность которых не ниже 0,01 рН.
Мешалка.
Колбы мерные 2-500-2 или 2-1000-2 по ГОСТ 1770.
Колбы конические Кн-2-150-34 по ГОСТ 25336.
Стаканы химические В-1-50 по ГОСТ 25336.
Чашки фарфоровые 4, 5, 6 по ГОСТ 9147.
Воронки стеклянные по ГОСТ 25336.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Вода дистиллированная.
Набор реактивов для приготовления рабочих буферных растворов по ГОСТ 17227.
3.6.2. Проведение испытания
3.6.2.1. Градуировка рН-метра
Градуировку и проверку показаний прибора выполняют по стандартным буферным растворам.
3.6.2.2. Определение концентрации водородных ионов (рН)
В коническую колбу вместимостью 150 см вносят измельченную на мельнице навеску цветочной пыльцы массой 2 г, взвешенной с погрешностью не более 0,01 г, добавляют 100 см дистиллированной воды и ставят на мешалку для перемешивания в течение 30 мин. Раствор фильтруют через складчатый бумажный фильтр в сухую колбу. Фильтрат исследуемого раствора наливают в химический стакан, опускают в него концы электродов, включают прибор, предварительно прогретый в течение 30 мин и проводят отсчет по шкале рН-метра.
Измерение рН повторяют 2-3 раза, каждый раз вынимая электроды и меняя испытуемый раствор.
3.6.3. Обработка результатов
За окончательный результат принимают среднее арифметическое двух результатов параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не должно превышать 0,5 единицы рН.
3.7. Определение массовой доли сырого протеина
3.7.1. Аппаратура, материалы, реактивы
Мельница лабораторная.
Шкаф вытяжной по ГОСТ 23308.
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.
Горелка газовая или электроплитка по ГОСТ 14919.
Колбы конические со шлифом НШ-29 и стеклянной пробкой Кн-1-100-29/32, Кн-1, Кн-1-200-24/29, Кн-2-1000-34 ТСХ по ГОСТ 25336.
Колбы Къельдаля 2-250-29 ТСХ по ГОСТ 25336.
Пробки П-2-16-180 ХС или П-2-21-200 по ГОСТ 25336.
Установка для отгонки летучих соединений (аммиака).
Холодильник стеклянный лабораторный по ГОСТ 25336.
Насос водоструйный лабораторный стеклянный.
Колбы конические Кн-1-150-29/32, Кн-1-250-24/29 ТСХ, Кн-1-2000-29/32 по ГОСТ 25336.
Трубки соединительные стеклянные по ГОСТ 25336.
Воронки стеклянные по ГОСТ 25336.
Воронка Бюхнера по ГОСТ 9147.
Бюретки, пипетки градуированные по ГОСТ 1770.
Колба Бунзена для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336.
Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч. или ч.д.а., плотностью 1,84 г/см.
Кислота серная фиксанал.
Натрия гидроксид (натр едкий) по ГОСТ 4328, ч.д.а., раствор с массовой долей 40%.
Кислота щавелевая по ГОСТ 22180, ч.д.а.
Медь сернокислая по ГОСТ 4156*, ч.д.а., х.ч.
_________________
* Номер соответствует оригиналу. ГОСТ 4156-93 имеет наименование «Ножовки садовые. Технические условия». — Примечание изгготовителя базы данных.
Калий сернокислый по ГОСТ 4145, ч.д.а., х.ч.
Селен металлический по ТУ 6-09-5358.
Бумага лакмусовая красная.
Метиловый голубой.
Метиловый красный.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962*, раствор с массовой долей 96%.
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000.
Фенолфталеин.
Пергидроль по ГОСТ 177, ч.д.а.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Вода дистиллированная.
3.7.2. Подготовка к испытанию
3.7.2.1. Приготовление раствора серной кислоты концентрации 0,1 моль/дм
С ампулы фиксанала снимают этикетку или удаляют краску и промывают ее наружную поверхность дистиллированной водой. В мерную колбу вместимостью 1000 см вставляют фигурный стеклянный боек и легким ударом о конец бойка разбивают углубление ампулы и дают возможность полностью вылиться содержимому в мерную колбу. Не меняя положение ампулы, ее внутреннюю поверхность промывалкой тщательно промывают дистиллированной водой не менее 6 раз. Раствор в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают и переливают в склянку с притертой пробкой. Срок хранения раствора 6 мес.
3.7.2.2. Приготовление раствора гидроксида натрия (раствора едкого натра) с массовой долей и 40%
В фарфоровый или химический стакан вместимостью 200 см наливают около 50 см дистиллированной воды, вносят 60 г кристаллического едкого натрия, взвешенного с погрешностью не более 0,1 г, перемешивают стеклянной палочкой и после охлаждения до температуры окружающей среды раствор через стеклянную воронку переносят в мерную колбу вместимостью 100 см, дистиллированной водой объем раствора доводят до метки.
Для очистки гидроксида натрия от углекислых солей в раствор вносят около 100 мг кристаллического хлористого бария, перемешивают и через 5-7 дней прозрачный раствор гидроксида натрия осторожно сифоном сливают с осадка в чистую сухую склянку. Уточняют удельный вес раствора при помощи ареометра.
3.7.2.3. Приготовление раствора фенолфталеина массовой долей 0,1%
В мерную колбу вместимостью 100 см наливают 70 см спирта этилового ректификованного, вносят 0,1 г фенолфталеина, взвешенного с погрешностью не более 0,001 г, перемешивают и дистиллированной водой раствор доводят до метки. Раствор фенолфталеина через бумажный фильтр фильтруют в чистую сухую склянку.
3.7.2.4. Приготовление индикатора N 1: раствора метилового красного с массовой долей 0,4%
В мерную колбу вместимостью 100 см наливают около 70 см спирта этилового ректификованного, вносят 0,4 г метилового красного, взвешенного с погрешностью не более 0,0001 г, перемешивают и этиловым спиртом доводят объем до метки.
3.7.2.5. Приготовление индикатора N 2: раствора метиленового голубого (метиленовая синь) с массовой долей 0,2%
В мерную колбу вместимостью 100 см наливают около 70 см этилового ректификованного спирта, вносят 0,2 г метиленового голубого, взвешенного с погрешностью не более 0,0001 г, перемешивают и этиловым спиртом объем доводят до метки.
3.7.2.6. Приготовление раствора борной кислоты с массовой долей 2%
В мерную колбу вместимостью 1000 см наливают около 700 см дистиллированной воды, вносят 20 г борной кислоты, взвешенной с погрешностью не более 0,001 г, перемешивают и дистиллированной водой объем доводят до метки.
3.7.2.7. Приготовление рабочего раствора борной кислоты с массовой долей 2%
К 1000 см раствора борной кислоты с массовой долей 2% приливают 10 см индикатора Гроака, состоящего из равных объемов индикаторов NN 1 и 2, т.е. 5 см индикатора N 1 и 5 см индикатора N 2. Раствор борной кислоты с индикатором Гроака хранят в склянке из темного стекла с пробкой.
3.7.3. Проведение испытания
В сухую пробирку берут навеску измельченной на электромельнице пыльцы около 0,15 г, взвешенной с погрешностью не более 0,0001 г. На запаянный конец пробирки надевают резиновую трубку, пробирку с пыльцой вводят в колбу Къельдаля и содержимое без потерь высыпают на дно колбы. Массу навески испытуемого продукта () вычисляют по формуле
,
где — масса пробирки с испытуемым продуктом, г;
— масса пробирки без испытуемого продукта, г.
К навеске продукта в колбе Къельдаля приливают 3 см дистиллированной воды и через 30 мин добавляют 5 см концентрированной серной кислоты плотностью 1,84, вносят 2 см пергидроля. Содержимое колбы перемешивают и дают постоять не менее 30 мин. Колбу Къельдаля с содержимым прикрывают стеклянным баллончиком или стеклянной воронкой, наклонно ставят на электроплитку с песочной баней или колбонагреватель и помещают в вытяжной шкаф. Нагревают не допуская образования пены сначала на слабом огне, а затем усиливают нагревание так, чтобы жидкость кипела непрерывно, но равномерно. На стенках колбы не должно оставаться черных несгоревших частиц испытуемого материала. Сжигание заканчивают, когда содержимое колбы приобретает зеленовато-голубоватый цвет без желтого оттенка.
Колбы охлаждают и их содержимое без потерь, порциями дистиллированной воды смывают в мерную колбу вместимостью 100 см, перемешивают, охлаждают и дистиллированной водой объем доводят до метки.
Приступают к отгонке аммиака испытуемого раствора и его улавливанию раствором борной кислоты.
В коническую колбу вместимостью около 150 см (приемная колба) из бюретки наливают 10 см раствора борной кислоты с массовой долей 2%. В приемную колбу с борной кислотой погружают конец трубки холодильника аппарата для отгонки летучих соединений (аммиака). В колбу для отгонки в этом аппарате через воронку вливают 10 см испытуемого раствора (из мерной колбы), добавляют 2 капли фенолфталеина и 6 см раствора гидроксида натрия с массовой долей 40%, промывают воронку дистиллированной водой и перемешивают легким покачиванием отгонной колбы. Появление пузырьков воздуха в приемнике свидетельствует о герметичности системы, что является необходимым условием при получении объективных результатов. В отгонную колбу впускают из парообразователя перегретый пар, который, проходя через раствор в отгонной колбе, увлекает аммиак. Раствор аммиака улавливается раствором борной кислоты с массовой долей 2% в приемной колбе. Отгонку продолжают в течение 15-20 мин. Капля дистиллята из трубки холодильника не должна окрашивать лакмусовую бумагу. Затем конец трубки холодильника промывают дистиллированной водой над приемной колбой.
Содержимое приемной колбы титруют раствором серной кислоты концентрации 0,1 моль/дм до изменения окраски раствора от зеленого до красно-фиолетового.
3.7.4. Обработка результатов
Массовую долю сырого протеина () в процентах на абсолютно сухое вещество вычисляют по формуле
,
где — объем раствора серной кислоты концентрации 0,1 моль/дм, израсходованный на титрование, см;
— поправочный коэффициент к титру раствора серной кислоты концентрации 0,01 моль/дм;
0,14 — количество азота связывает 1 см раствора серной кислоты концентрации 0,01 моль/дм, мг;
6,25; 100 — постоянные коэффициенты;
— масса навески пыльцы, г;
— потеря в массе при высушивании испытуемого продукта, %;
— масса испытуемого продукта в абсолютно сухом состоянии, г;
100 — общий объем раствора, в котором растворена навеска, см;
10 — количество испытуемого раствора, см.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных исследований, допустимое расхождение между которыми не должно превышать 0,5%.
3.8. Определение массовой доли сырой золы и минеральных примесей
3.8.1. Аппаратура, реактивы
Мельница лабораторная.
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.
Электропечь лабораторная.
Тигли фарфоровые по ГОСТ 9147.
Эксикатор по ГОСТ 25336.
Электроплитка или газовая горелка по ГОСТ 14919.
Щипцы тигельные.
Баня водяная по ГОСТ 14919.
Стекла часовые.
Фильтр беззольный.
Кислота азотная по ГОСТ 4461.
Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч., раствор с массовой долей 10%.
Серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, ч.д.а., раствор с массовой долей 2%.
Вода дистиллированная.
3.8.2. Подготовка к испытанию
3.8.2.1. Приготовление раствора соляной кислоты с массовой долей 10%
В чистую сухую с притертой пробкой склянку вместимостью 700 см наливают 433 см воды дистиллированной, вносят 113 см соляной кислоты, перемешивают. Раствор годен в течение 6 мес.
3.8.2.2. Приготовление раствора азотнокислого серебра с массовой долей 2%
В мерную колбу вместимостью 100 см наливают 70 см дистиллированной воды, вносят 2 г азотнокислого серебра, взвешенного с погрешностью не более 0,001 г, перемешивают и водой дистиллированной объем доводят до метки. Раствор хранят в склянке из темного стекла.
3.8.3. Проведение испытания
3.8.3.1. Определение массовой доли сырой золы
Прокаливают пустой фарфоровый тигель в муфельной печи при температуре около 700 °С в течение 30 мин, охлаждают в эксикаторе 1 ч и взвешивают. В тигель берут навеску измельченного на электромельнице испытуемого продукта массой 3,0 г, взвешенного с погрешностью не более 0,001 г и ставят на асбестовую сетку электроплитки для обугливания пыльцы. Для полного сжигания угля тигли ставят в муфельную печь. Прокаливание ведут при красном калении при температуре 700 °С до белого или слегка сероватого цвета золы. Муфель выключают и остывающие, но еще горячие тигли при помощи тигельных щипцов ставят в эксикатор, охлаждают около 1 ч и взвешивают. Золу используют для определения минеральных примесей.
3.8.3.2. Обработка результатов
Массовую долю сырой золы () в процентах в абсолютно сухом материале высчитывают по формуле
,
где — масса тигля с золой, г;
— масса пустого тигля, г;
— масса навески пыльцы, г;
— потери в массе при высушивании пыльцы, %.
За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений, вычисленных с точностью до 0,01%, допускаемое расхождение между которыми не должно превышать 0,3%.
3.8.3.3. Определение массовой доли минеральных примесей
Для определения минеральных примесей в тигли с общей золой испытуемого материала приливают 2-3 см раствора соляной кислоты с массовой долей 10%, тигли покрывают часовым стеклом и нагревают 10 мин на кипящей водяной бане, затем снимают и охлаждают. Содержимое тиглей разбавляют 5 см воды, фильтруют через беззольный фильтр. Тигли и фильтр промывают дистиллированной водой до прекращения появления помутнения в промывных водах от одной капли раствора азотнокислого серебра с массовой долей 2%. Тигли и фильтры высушивают при температуре окружающего воздуха. Фильтры в тиглях осторожно сжигают на электроплите, а затем прокаливают в муфельной печи до постоянной массы.
3.8.4. Обработка результатов
Массовую долю минеральных примесей () в процентах в абсолютно сухом испытуемом материале вычисляют по формуле
,
где — масса золы минеральных примесей, г;
— масса навески пыльцы, г;
— потеря в массе при высушивании пыльцы, %.
За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений, вычисленных с точностью до 0,01%, допускаемое расхождение между которыми не должно превышать 0,5%.
3.9. Определение массовой доли флавоноидных соединений
3.9.1. Аппаратура, материалы, реактивы
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.
Мешалка.
Колбы мерные 2-25-1, 2-50-1 по ГОСТ 1770.
Колбы конические плоскодонные П-1-50-14/23 ТС и Кн-1-100-14/23 ТС по ГОСТ 25336.
Стаканы химические В-1-50 ТСХ или В-1-50 по ГОСТ 25336.
Пипетки вместимостью 2 и 10 см.
Воронки химические В-56-80 или В-75-110 ХС или В-75-140 ХС по ГОСТ 25336.
Цилиндры мерные 2-25, 2-50 по ГОСТ 1770.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962, раствор с массовой долей 96%.
Вода дистиллированная.
3.9.2. Проведение испытания
0,20 г испытуемого продукта, взвешенного с погрешностью не более 0,001, помещают в химический стакан вместимостью 50 см, прибавляют 4 см дистиллированной воды, перемешивают стеклянной палочкой до растворения продукта. К раствору прибавляют 20 см ацетона, перемешивают и оставляют в колбе с притертой пробкой в темном месте на 1 ч. Затем перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу вместимостью 100 см.
Измеряют оптическую плотность полученного раствора на фотоэлектроколориметре, используя светофильтр N 3 с длиной волны 400 нм, в кювете со слоем толщиной 10 мм.
В качестве контрольного раствора используют дистиллированную воду.
3.9.3. Обработка результатов
Массовую долю флавоноидных соединений () в процентах в цветочной пыльце вычисляют по формуле
,
где — оптическая плотность испытуемого раствора;
24 — разведение в см;
8,37 — коэффициент пропорциональности оптической плотности и концентрации флавоноидных соединений при длине волны 400 нм;
— масса навески продукта, г.
3.10. Определение показателя окисляемости (подлинности)
3.10.1. Аппаратура, материалы, реактивы
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.
Секундомер.
Воронки В-36-50 или В-36-80 ХС по ГОСТ 25336.
Пипетки вместимостью 1, 2 и 5 см.
Колбы конические Кн-2-25-34 ТХС и Кн-2-150-31 ТХС по ГОСТ 25336.
Стаканы химические В-1-50 ТХС и В-1-100 ТХС по ГОСТ 25336.
Колбы мерные 2-1000-1 или 2-1000-2 по ГОСТ 1770.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.
Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, х.ч. раствор концентрации 0,1 моль/дм.
Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч., раствор с массовой долей 20%.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962*, раствор с массовой долей 96%.
_________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000.
Вода дистиллированная.
3.10.2. Приготовление растворов
3.10.2.1. Приготовление раствора марганцовокислого калия концентрации 0,1 моль/дм
В мерную колбу вместимостью 1000 см вносят 3,2 г марганцовокислого калия, взвешенного с погрешностью не более 0,0001 г, растворяют в 700-800 см дистиллированной воды, объем доводят до метки. Раствор переносят в склянку из темного стекла и выдерживают до 10-15 дней. Раствор годен в течение 3 мес.
3.10.2.2. Приготовление раствора серной кислоты массовой долей 20%
В мерную колбу вместимостью 1000 см наливают около 700 см дистиллированной воды и 124 см серной кислоты плотностью 1,84 г/см и объем доводят дистиллированной водой до метки.
3.10.3. Проведение испытаний
Навеску пыльцы массой 1 г, взвешенной с погрешностью не более 0,001 г, помещают в химический стаканчик вместимостью 50 см, заливают 20 см свежепрокипяченной и охлажденной дистиллированной воды, растворяют, перемешивая стеклянной палочкой, приливают 5 см этилового спирта, перемешивают и выдерживают в течение 1 ч в темном месте. Затем раствор фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 см. Фильтр промывают дистиллированной водой и объем раствора доводят до метки.
В стакан вместимостью 50 см отбирают 2 см фильтрата, приливают 1 см раствора серной кислоты массовой долей 20%, раствор перемешивают плавными круговыми движениями стакана в течение 1 мин. К раствору добавляют 1 каплю (0,035-0,040 см) раствора марганцовокислого калия концентрации 0,1 моль/дм и одновременно включают секундомер.
Время (секунды) исчезновения розовой окраски раствора соответствует показателю окисляемости.
Показатель окисляемости определяют по двум параллельным измерениям двух навесок испытуемого продукта, допустимое расхождение между которыми не должно превышать 1 с.
Раствор испытывают при температуре 18-22 °С.
Испытание проводят только со свежеприготовленным (в день приготовления) раствором испытуемого продукта.
3.11. Определение ядовитых примесей
Содержание ядовитых примесей определяют по средней продолжительности жизни пчел в опытной и контрольной группах.
3.11.1. Аппаратура, материалы
Термостат биологический.
Садки лабораторные для пчел 120х120х40 мм.
Пробирки П2-16-180 ХС или П2-19-180 ПХС по ГОСТ 25336.
Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.
Пленка полиэтиленовая по ГОСТ 10354.
Кормовая масса Шольца (канди).
Пчелиная семья с расплодом.
3.11.2. Проведение испытания
Навеску цветочной пыльцы массой 40 г смешивают с 60 г канди. Смесь делят на две части, каждую из которых завертывают в полиэтиленовую пленку. Две навески канди без пыльцы массой по 60 г тоже завертывают в полиэтиленовую пленку. На поверхности пленки вырезают ножницами отверстие диаметром 15 мм, чтобы обеспечить доступ пчел к корму.
Корм с пыльцой размещают в двух садках опытной группы. Кормовую массу без пыльцы укладывают в два садка контрольной группы. В каждый садок помещают по 60 пчел, взятых от одной семьи с сотовой рамки, имеющей открытый расплод. Пробирки наполняют питьевой водой комнатной температуры, закрывают ватой и ставят в садок, чтобы пчелы имели доступ к поилкам. В садках пчел содержат в течение 6 сут в термостате при температуре 30 °С. Ежедневно учитывают количество погибших и живых пчел. Среднюю продолжительность жизни пчел в опытной и контрольной группах () вычисляют по формуле
,
где — количество живых пчел на соответствующий день учета в двух садках опытной (контрольной) группы;
120 — общее количество пчел в группе (опытной или контрольной).
Средняя продолжительность жизни пчел опытной группы должна быть не менее контрольной. При меньшей продолжительности жизни опытных пчел испытываемая цветочная пыльца непригодна для пищевых и кормовых целей, и промпереработки.
3.12. Определение ртути — по ГОСТ 26927.
3.13. Определение свинца — по ГОСТ 26932.
3.14. Определение кадмия — по ГОСТ 26933.
3.15. Определение мышьяка — по ГОСТ 26930.
3.16. Определение остаточных количеств пестицидов — по методам, утвержденным Минздравом СССР.
4.1. Сушеную цветочную пыльцу перевозят всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозок грузов, действующими на соответствующем виде транспорта.
Продукт должен быть предохранен от атмосферных осадков и прямых солнечных лучей.
4.2. Хранить цветочную пыльцу следует в чистых, сухих, не имеющих посторонних запахов помещениях при температуре от 0 до 15 °С и относительной влажности воздуха не более 75%.
Изготовитель гарантирует соответствие качества сухой цветочной пыльцы требованиям настоящего стандарта при соблюдении условий транспортирования и хранения. Гарантийный срок хранения цветочной пыльцы — 24 мес со времени ее сбора.
Как собирают пыльцу — Как это сделано, как это работает, как это устроено — LiveJournal
В этой статье, я расскажу о том, как и где пчёлы собирают пыльцу, каким образом пчеловод забирает её у пчёл и что делает перед тем, как пыльца поступит в продажу.
Как и где пчёлы собирают пыльцу?
Пыльца – это мужские половые клетки растений. Она состоит из мельчайших пыльцевых зёрен. Пчелы собирают её для собственных нужд и для выкармливания своих деток. Для этих насекомых пыльца является единственным белковым кормом.
Больше всего пыльцы пчёлы собирают весной в первой половине дня. Пыльцу пчёлы собирают с цветов растений и деревьев. Когда пчела приземляется на цветок, то пыльца с него, как бы липнет к пчеле, это происходит из-за того, что пыльца заряжена положительным зарядом, а пчела отрицательным зарядом.
Пчела лапками сгребает с себя прилипшую пыльцу и скатывает её в комочки, которые закрепляет на задних ножках в специальных «корзиночках». Чтобы пыльца не рассыпалась пчела смачивает её нектаром. Размещая на своих ножках пыльцевые комочки (обножку) важно, чтобы они имели одинаковый вес и размер, иначе будет неудобно лететь.
Прилетев домой, пчела не всегда сразу проходит в улей. Если пыльца влажная, например с одуванчика, то пчела прежде чем зайти в улей, останавливается и как бы отдыхая на солнышке, вентилирует комочки пыльцы на задних лапках.
Как пчеловод собирает пыльцу?
Чтобы забрать у пчёл пыльцу, пчеловод покупает или изготавливает специальные пыльцеуловители. Они состоят из решётки и коробочки для сбора пыльцы. Пыльцеуловители вешаются перед входом в улей.
В решётке пыльцеуловителя сделаны круглые отверстия, проходя через которые пчёлы вынуждены подгибать задние ножки так, что пыльца с них слетает. Эта слетевшая с ножек пчелы пыльца попадает в специальную коробочку из которой её в последствии и забирает пчеловод.
Пыльцу пчеловод может собирать не каждый день. Если, например, пчёлы с утра собрали пыльцу, а потом пошёл дождик, то всё, что нападало в коробочку, намокнет и превратиться в «кашу». Такая пыльца уже не пригодна. Поэтому дней в которые пчеловод может собрать пыльцу не так много. В период медосбора пыльцу тоже не собирают, так как, проходя через ячейки пыльцесборника, пчёлы толпятся у входа в улей и мешают друг другу, тем самым снижая принос нектара в улей.
Как сохранить собранную пыльцу.
После того, как пчеловод собрал пыльцу ему необходимо её сохранить. В пыльце много влаги и поэтому она может заплесневеть и испортиться. Есть несколько способов сохранить пыльцу. Её можно заморозить в морозильнике, при минус 18 градусов Цельсия. Так же пыльцу, можно законсервировать мёдом, смешав её с ним в пропорции от 1 к 1 до 1 к 3. Чаще всего пыльцу сушат. Тут тоже есть свои тонкости.
Сушить пыльцу на солнце нельзя. Температура сушки должна быть ниже + 40 градусов Цельсия. Если эти условия не соблюдаются, то полезные вещества находящиеся в пыльце улетучатся и толку от неё не будет.
У себя на пасеке я сушу пыльцу в специальной сушилке для овощей. Насыпаю её тонким слоем на марлю или тюль, устанавливаю температуру сушки + 35-38 градусов Цельсия и оставляю на сутки. Когда пыльца высохла, она становится твёрдой и её комочки не разрушаются, когда их берёшь в руки. В таком виде пыльца может храниться достаточно долгое время. Но её нужно убрать в плотно закрывающуюся посуду и поставить в тёмное место.
Собранная и высушенная пчеловодом пыльца фасуется в стеклянную и пласмассовую посуду с плотной крышкой, после этого купить пыльцу можно в Москве, Пензе, Санкт-Петербурге и других городах России.
Интересен тот факт, что если бы пыльцу собирала одна пчела, то для того, чтобы ей собрать всего лишь 100 гр. нужно было сделать 6000 вылетов и потратить на это 130 дней!
Мнение эксперта. Отравления пчел | ГБУ РО «Ростовская облСББЖ с ПО»
Известно, что пчелы являются одним из индикаторов экологического состояния территории, и в последнее время из-за ухудшения экологии во всем мире наблюдается значительное снижение количества семей пчел. Причинами ослабления или гибели пчелиной семьи не обязательно являются инфекции или паразиты, ими могут быть разного рода отравления пчел (токсикозы).
Причиной отравления пчел, как правило, является некачественный корм, это может быть и мед, содержащий повышенное содержание пади, и нектар с ядовитых растений, а также нектар и пыльца с растений обработанных разного рода химикатами, пестицидами. Помимо этого причиной отравления пчел может стать повышенное содержание солей минералов в воде. В каждом конкретном случае наблюдается комплекс симптомов, указывающий на интоксикацию и ее причину.
Чем могут отравиться пчелы и как предупредить их отравление?
Падевое отравление пчел
Одной из наиболее распространенных причин, которая вызывает массовую гибель пчел, является падевое отравление. Речь идет о наличии в пище, которую употребляют насекомые, пади-вещества, которое вырабатывается некоторыми насекомыми (тля, листоблошки) и растениями или деревьями – тополем, осиной, пихтой. Падь, наносящая вред пчелам, сладкая на вкус, поэтому они потребляют ее в больших количествах. Падевый мед насекомые поедают чаще всего при недостатке питательных веществ. В результате возникает сильное расстройство пищеварения. Из-за массовых отравлений пчелиная семья слабеет, возможна гибель матки. В наиболее тяжелых случаях погибают все насекомые из улья. При осмотре погибших пчел выявляют изменения в кишечнике: его цвет становится черным или темно-коричневым. Он дряблый и хрупкий, легко разрушается.
Чаще всего падевое отравление отмечают в летнее время, когда в гнезде накапливается большое количество пади. Не исключена вероятность массовой интоксикации в осенне-зимний период.
Интоксикация пчел нектаром
Отравление медоносных насекомых нектаром может произойти при его сборе с ядовитых для пчел растений. Риск заражения повышается, если такие растения можно найти в радиусе 1 км от пасеки. К ядовитым растениям, способным вызвать нектарный токсикоз, относятся: шафран; волчья ягода; черный паслен; багульник; аптечный розмарин; василек; лук репчатый; калужница болотная; олеандр; ракитник; зверобой; рододендрон; молочай; лавр благородный. В природе существует около 35 семейств высших растений, пыльца которых ядовита для пчел. При плохих погодных условиях даже неядовитые растения могут вырабатывать токсический нектар. Патогенность нектара обусловлена наличием в нем эфирных масел, алкалоидов, сапонинов и некоторых других компонентов, которые вызывают гибель медоносных насекомых.
Чаще всего интоксикация пчел нектаром происходит в конце мая либо начале июня. Риск повышают такие неблагоприятные факторы, как засуха, дождливая погода, низкие температуры.
Отравление нектаром начинается с возбужденного состояния пчел, которое постепенно переходит в угнетение. Из-за паралича конечностей, крыльев, брюшка и усов насекомые теряют способность двигаться и летать. Они способны только совершать слабые движения. Длительность интоксикации, как и исход, зависят от конкретного ядовитого растения, с которого был собран нектар. Если насекомые собирали его с белены, то период отравления длится до 20 дней, после чего наступает массовая гибель. От пыльцы лютика пчелы также умирают в больших количествах. При сборе нектара с репчатого лука насекомые страдают от выраженного расстройства пищеварения. Кроме того, у маток сокращается яйцекладка и частично гибнут личинки.
Мед с содержанием ядовитого нектара вызывает отравление не только пчел, но и людей.
Отравление пыльцой
Медоносные насекомые травятся и пыльцой. Пыльцевой токсикоз – это незаразная болезнь, относящаяся к группе фитотоксикозов. Подобное заболевание связано с периодом цветения ядовитых для насекомых растений, произрастающих в окрестностях пасеки. Для пчел опасна пыльца растений, которые были упомянуты в предыдущем пункте. Они в избытке содержат вредные для медоносов гликозиды, алкалоиды и эфирные масла. Пчелы-сборщицы, которые приносят пыльцу в улей, размещая ее в области задних ног, не страдают от нее. Интоксикации в большей степени подвержены молодые насекомые в возрасте 3-13 дней при употреблении в пищу занесенной в улей отравленной пыльцы. Под действием ядовитых веществ, которые входят в состав пыльцы ядовитых растений, происходит нарушение пищеварения и перистальтики, непереваренные частицы скапливаются в организме, что и провоцирует отравление. Пчелы беспокойны, находятся в возбужденном состоянии. Они не способны двигаться. Многие насекомые выпадают из ульев и расползаются по земле.
Если отравление сильное, то гибнут не единичные особи, а значительная часть пчелиной семьи, не исключая маток, трутней, а также открытый и запечатанный расплод.
Отравление возникает также при употреблении пыльцы неядовитых растений, в которой развиваются токсинообразующие микробы. Это патогенные микроорганизмы групп мукоров, аспергиллов, актиномицетов.
Солевое отравление пчел
Солевой токсикоз – еще одна разновидность отравления пчел. Оно возникает в осеннее, зимнее или весеннее время. Интоксикация возникает как результат переизбытка минеральных солей в организме медоносов, поступающих в организм вместе с пищей и водой. Чаще всего солевое отравление связывают со скармливанием пчелам отходов сахара с примесью минеральных солей, а также подача им воды, в которой повышено содержание соли. Пчелы могут заразиться, если пьют загрязненную сточную воду из животноводческих ферм. При солевом токсикозе у насекомых происходят дегенеративные изменения кишки, а также скопление микроорганизмов на отдельных участках кишечника. Чаще всего от солевого отравления страдают рабочие пчелы. Выраженность интоксикации зависит от концентрации солей в кормах либо воде. Симптомы интоксикации типичные: насекомые вначале приходят в возбужденное состояние, активно ползают по улью и выползают из него. У них возникает сильная жажда. Через некоторое время пчелы становятся вялыми, страдают от поноса.
Неблагоприятный исход чаще наблюдается в зимнее время. У пчел происходят необратимые дегенеративные изменения кишечника, приводящие в итоге к гибели.
Интоксикация химикатами
Химический токсикоз у медоносов возникает при отравлении химическими препаратами (гербицидами, инсектицидами), которыми обрабатывают растения для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур. Отравление могут вызвать: кишечные инсектициды (мышьяк, метоксихлор, барий, тиофос): отравление возникает при поступлении в организм пчелы химикатов, которые вызывают гибель как взрослых особей, так и личинок; водные растворы минеральных удобрений, которыми опрыскивают листья растений; фурмигатные инсектициды, применяющиеся в парообразном или газообразном виде (синильная кислота, дихлорэтан, нафталин).
Химическая интоксикация регистрируется в период жизненной активности пчел – с апреля по октябрь.
Пчеловоды отмечают на своей пасеке признаки химического токсикоза практически сразу же после того, как в зоне лета пчел пасеки проводилась химическая борьба сельхозпроизводителей или представителей лесного хозяйства с вредными насекомыми. Пчеловод начинает находить погибающих пчел как на территории пасеки, так и около летков и в ульях. Больные пчелы начинают осыпаться с сотов, ползают как внутри улья, так и вне его. Отравление у пчел начинается с фазы возбуждения, которая затем переходит в угнетение. При возбуждении пчелы начинают быстро двигаться, совершать круговые движения, переворачиваться на спину, ножками очищают свои ротовые органы. В состоянии угнетения больные пчелы принимают сидячее положение, сгибают брюшко, идут судорожные сокращения тела и конечностей. При отравлении пчел мышьяковистыми ядами у некоторых пчел появляется понос и выделения изо рта, поэтому при патвскрытии кишечник, медовый зоб часто бывают пустыми. При отравлении органическими ядами пчелы приходят в сильное возбуждение (быстро взлетают и тут же падают, совершают быстрые круговые движения, по брюшку определяются частые дыхательные движения), затем у больных пчел наступает фаза угнетения, сопровождающаяся потерей подвижности. В этой фазе пчелы погибают. Диагноз на химический токсикоз ставиться на основании проведенного химико-токсикологического исследования в лаборатории.
Профилактика отравления
Мероприятия по предупреждению отравления пчел предусматривают следующее:
- Каждая пасека должна быть зарегистрирована в государственной ветеринарной службе. У пчеловода должен быть паспорт пасеки, в котором каждый год ветеринарная служба делает отметки о количестве пчелосемей и о проведённом осмотре. Туда же заносят результаты анализов по заболеваниям пчёл. Всё это важно для последующих действий, если случилась беда, и пчёл потравили. Пчеловод должен иметь разрешение на расположение пасеки в определённом хозяйстве.
- За 3-5 дней до начала применения ядохимикатов в районе проводится оповещение пчеловодов через средства массовой информации, местное радиовещание или письменное уведомление о предстоящих работах для того, чтобы у пчеловода была возможность вывезти пчел на безопасное место, не ближе 5км от места применения ядохимикатов, или принять меры к изоляции пчел на срок действия ядохимикатов на месте. Все пчеловоды в своей местности должны знать сроки обработки ядохимикатами сельскохозяйственных и лесных культур. Пчеловоды в районе должны работать в теснейшем контакте с управлением сельского и лесного хозяйства, специалистами по защите растений и учреждениями государственной ветеринарной сети. Свои огороды должны опрыскивать только безвредными для пчел микробиологическими препаратами. Занимаясь разведением пчел, пчеловод должен учитывать, что опрыскивать растения можно только до начала их цветения. При лечении пчел, пораженных инвазиями и микозами, пчеловоды должны применять только те лекарственные препараты, применение которых согласовано с Госсанэпиднадзором и Департаментом ветеринарии.
- При отравлении пчел пестицидами пчеловоды должны руководствоваться «Инструкцией по профилактике отравлений пчел пестицидами», утвержденной Всесоюзным производственно-научным объединением по агрохимическому обслуживанию сельского хозяйства «Союзсельхозхимия» и Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР от 14.06.1989г.
Заместитель директора ГБУ РО «Ростовская облСББЖ с ПО»
И.И. Пушкарева
Значение пыльцевой диеты в поддержании кондиции пчел Химический состав пыльцы — Pasieka24
Значение пыльцевой диеты в поддержании кондиции пчел Химический состав пыльцы
Имаго медоносной пчелы в каждом возрасте питается нектаром, пыльцой же, в основном, кормятся работницы, ухаживающие за личинками [DeGrandi-Hoffman et al., 2018]. Цветочная пыльца является основным источником белков, аминокислот, липидов, крахмала, стеринов, витаминов и минералов для этих насекомых [Di Pasquale et al., 2013].
Пчелиные семьи собирают ежегодно от 10 до 26 кг пыльцы, а ее ежедневное потребление на одну работницу составляет от 3,4 до 4,3 мг [Brodschneider and Crailsheim, 2010].
фото: Катаржина Юдицка
Среди множества аминокислот, содержащихся в пыльце, 10 являются необходимыми для развития взрослого пчелы. Это аргинин, гистидин, лизин, триптофан, фенилаланин, метионин, треонин, лейцин, изолейцин и валин [Di Pasquale et al., 2013].
Триптофан отвечает за развитие горловых желез, а валин играет важную роль в синтезе маточного молочка. Изолейцин является носителем личиночных феромонов, которые выделяются, когда личинка голодна, а пролин и гидроксипролин поддерживают терморегуляцию и мобилизацию энергии, особенно в зимний период [DeGrandi-Hoffman et al. 2018].
Важным компонентом пыльцы являются жирные кислоты. Линоленовая кислота необходима для развития желез, процесса обучения, эффективного питания работниц, а также обладает антимикробными свойствами. Лауриновая кислота, с другой стороны, обладает бактерицидными свойствами, в частности, против личинок Paenibacillus, которые вызывают американский гнилец [DeGrandi-Hoffman et al., 2018].
[…] — можете читать только фрагменты статей — подписка
Роль пыльцы
Пыльца, богатая белком, необходима для развития горловых желез, которые выделяют маточное молочко для кормления личинок, маток, трутней и старших работниц. Важно, чтобы пчелиная семья имела возможность собирать пыльцу, богатую питательными веществами, отвечающими за развитие расплода.
В условиях нехватки питания, работницы, занимающиеся детвой, убивают своих подопечных Brodschneider and Crailsheim, 2010]. Как показано в лабораторных условиях, из личинок, лишенных надлежащей пищи, развиваются пчелы с пониженным весом и размером тела, кроме того появляются отклонения в полете, что проявляется, низшей максимальной скорость движения работницы в воздухе [Brodschneider et al. 2009].
Недостаточное количество богатой в необходимые питательные элементы пыльцы приведет к сокращению числа воспитываемого потомства и, следовательно, к ослаблению семьи.
Ограничение количества или присутствие только пыльцы с бедным биохимическим составом может отрицательно повлиять на продолжительность жизни пчелы. Отсутствие качественного корма влияет на то, что насекомые живут вдвое короче, чем хорошо питающиеся особи [Di Pasquale, 2016].
[…] — можете читать только фрагменты статей — подписка
Моно- и полипыльцевая диета
Медоносная пчела относится к так называемым полимиктическим насекомым, которые опыляют многие виды растений [Praz et al., 2008]. Однако в местах, где преобладают крупномасштабные монокультурные хозяйства, доступ к разнообразной кормовой базе ограничен.
Пищевые ресурсы в таких условиях характеризуются низким видовым разнообразием и значительными колебаниями, возникающими в результате ограничения времени цветения (часто только один раз в год). Кроме того, обножки с таких плантаций могут быть загрязнены средствами защиты растений [Di Pasquale in., 2016].
В этих условиях работницы часто вынуждены собирать взяток низкой пищевой ценности или же такую, которая не соответствует текущим потребностям семьи. Это влияет на состояние пчел. Исследования показывают, что разнообразие пыльцы обеспечивает пчелам более сбалансированное питание [Alau et al., 2010; Di Pasquale et al., 2016].
В 2017 году ареалы кукурузы в Польше составили 1 миллион 191 тысяч га [Тышка, 2018]. Пыльца кукурузы характеризуется дефицитом одной из необходимых пчелам аминокислот — гистидина. Как следствие, диета, опирающаяся на этом типе растений в 80%, снижает продолжительность жизни пчел и способность выращивания расплода.
[…] — можете читать только фрагменты статей — подписка
Предпочтения в выборе пыльцы
Медоносная пчела не собирает пыльцу с растений случайным образом. На предпочтения в сборе в первую очередь влияют питательная ценность пыльцы, свойства, связанные с этим (запах, цвет, кислотность, размер зерна), а также состояние пчелосемьи.
Это поведение модулируется процессом обучения и распознавания того, какие растения имеют оптимальную питательную ценность [Hendriksma and Shafir, 2016; Corby-Harris et al., 2018].
[…] — можете читать только фрагменты статей — подписка
Первая наблюдаемая стратегия работниц состояла в пассивной балансировке питательных веществ в рационе с использованием всех доступных типов рациона. Маклеллан [McLellan, 1978] указывает, что это стратегия пассивной защиты баланса питания.
А именно, вероятность того, что основные питательные вещества отсутствуют, уменьшается, когда в рационе усредняются различные ресурсы.
Вторая стратегия основывалась на активном балансировании питания пчелиной семьи путем более частого выбора рациона 2, дополняющего прежний дефицит аминокислот и жирных кислот.
Важным вопросом является то, демонстрируют ли пчелы, выращивающие расплод и потребляющие наибольшее количество пыльцы в пчелиной колонии, предпочтения в выборе видов растений с точки зрения питательной ценности корма. Количественный дефицит пыльцы пчелы-кормилицы сообщают пчелам-сборщицам посредством осязания или трифаллаксии (передача секреции горловых желез) [Camazine et al., 1998].
[…] — можете читать только фрагменты статей — подписка
Рис. 1. Процентное содержание белка и минеральных солей в пыльце из сельскохозяйственных растений и из пол природных местообитаний [% / 100 г пыльцы].
Красной линией подчеркнута пыльца рапса, для которой было характерно сходное содержание белка и минеральных солей, как в пыльце из полуприродных мест. Основано на: Requier et al. [2015].
Почему, с другой стороны, сборщицы избегали сбора пыльцы рапса в пользу растений из полуприродных мест произрастания? Согласно Requier et al. причиной может быть меньший диаметр пыльцы рапса (около 24 мкм), что, вероятно, замедляет сбор.
Во время цветения этого культивируемого растения семейство пчел находится на стадии развития, когда требуется большое количество пыльцы высокого качества [Odoux et al., 2014]. Поэтому выбор падает на растения, которые имеют пыльцу большего диаметра (клевер — 36 мкм, клон — 30 мкм, боярышник — 38 мкм) и более высокую питательную ценность (рис. 1).
Интересно, что сравнение качества пыльцы, собранной медоносной пчелой и шмелями в одной и той же области, показало, что пчелы собирают пыльцу с более низким содержанием питательных веществ. Это говорит о том, что для оценки качества пыльцы пчелы не так эффективны, как шмели. [Leonhardt and Bluththgen, 2012].
мгр Лукаш Никевич, д-р Агата Беднарек
Кафедра физиологии животных и экотоксикологии Силезского университета в Катовице
Alaux C, Ducloz F, Crauser D, Le Conte Y. (2010). Diet effects on honeybee immunocompetence. BiolLett. 23;6(4):562-565.
Brodschneider R, Crailsheim K. (2010). Nutrition and health in honey bees. Apidologie. 41: 278–294
Brodschneider R., Riessberger-Gallé U., Crailsheim K. (2009). Flight performance of artificially reared honeybees (Apis mellifera), Apidologie 40, 441–449.
Calderone NW, Johnson BR. (2002). The within-nest behaviour of honeybee pollen foragers in colonies with a high or low need for pollen. Animal Behaviour. 63(4):749–58.
Camazine S, Crailsheim K, Hrassnigg N, Robinson G, E, Leonhard B, Kropiunigg H.(1998). Protein trophallaxis and the regulation of pollen foraging by honey bees (A1pis mellifera L.). Apidologie.29(1–2):113–26.
Corby-Harris V, Snyder L, Meador C, Ayotte T. (2018). Honey bee (Apis mellifera) nurses do not consume pollens based on their nutritional quality. PLoS One. 11;13(1):e0191050.
DeGrandi-Hoffman G, Gage SL, Corby-Harris V, Carroll M, Chambers M, Graham H, Watkins deJong E, Hidalgo G, Calle S, Azzouz-Olden F, Meador C, Snyder L, Ziolkowski N. (2018). Connecting the nutrient composition of seasonal pollens with changing nutritional needs of honey bee (Apis mellifera L.) colonies. J Insect Physiol. 109:114-124.
Di Pasquale G, Salignon M, Le Conte Y, Belzunces LP, Decourtye A, Kretzschmar A, Suchail S, Brunet JL, Alaux C. (2013). Influence of pollen nutrition on honey bee health: do pollen quality and diversity matter? PLoS One. 5;8(8):e72016.
Di Pasquale G,Alaux C, Le Conte Y, Odoux JF, Pioz M, Vaissière BE, Belzunces LP, Decourtye A. (2016). Variations in the Availability of Pollen Resources Affect Honey Bee Health. PLoS One. 15;11(9):e0162818.
Doull K.M. (1980a) Relationships between consumption of a pollen supplement, honey production, and broodrearing in colonies of honeybees Apis mellifera L. I, Apidologie 11, 361–365.
Doull K.M. (1980b) Relationships between consumption of a pollen supplement, honey production and broodrearing in colonies of honeybees Apis mellifera L. II, Apidologie 11, 367–374
Dreller C, Page RE Jr., Fondrk MK. (1999) Regulation of pollen foraging in honeybee colonies: effects of young brood, stored pollen, and empty space. BehavEcolSociobiol. 45(3):227–33.
Hanley ME,Franco M, Pichon S, Darvill B, Goulson D. (2008). Breeding system, pollinator choice and variation in pollen quality in British herbaceous plants. Functional Ecology. 22, 592–598.
Hendriksma HP, Shafir S. (2016). Honey bee foragers balance colony nutritional deficiencies. BehavEcolSociobiol. 70:509–517.
Herbert EW, H. Shimanuki H. (1978). Chemical composition and nutritive value of bee-collected and bee-stored pollen. Apidologie, Springer Verlag. 9(1), pp.33-40.
Leonhardt SD, Blüthgen N. (2012). The same, but different: pollen foraging in honeybee and bumblebee colonies. Apidologie. 43(4):449–64.
Mattila H.R., Otis G.W. (2006a) Influence of pollen diet in spring on development of honey bee (Hymenoptera: Apidae) colonies, J. Econ. Entomol. 99, 604–613.
McLellan AR. (1978) Growth and decline of honeybee colonies and interrelationships of adult bees, brood, honey and pollen. J ApplEcol 15:155–161.
Odoux JF, Aupinel P, Gateff S, Requier F, Henry M, Bretagnolle M. (2014). ECOBEE: a tool for long-term bee colony monitoring at landscape scale in West European intensive agrosystems. Journal of Apicultural Research. 53:57–66.
Praz CJ, Müller A, Dorn S. (2008). Specialized bees fail to develop on non-host pollen: do plants chemically protect their pollen? Ecology. 89(3):795-804
Requier F, Odoux JF, Tamic T, Moreau N, Henry M, Decourtye A, Bretagnolle V. (2015). Honey bee diet in intensive farmland habitats reveals an unexpectedly high flower richness and a major role of weeds. Ecol Appl. 25(4):881-90.
Tyszka M. (2018). PZPK: Powierzchnia uprawy kukurydzy w 2018 r. to 1191 tys. ha. Portal farmer.pl, adres: http://www.farmer.pl/produkcja-roslinna/zboza/pzpk-powierzchnia-uprawy-kukurydzy-w-2018-r-to-1191-tys-ha,81050.html.
Vanderplanck M, Moerman R, Rasmont P, Lognay G3 Wathelet B, Wattiez R, Michez D. (2014). How does pollen chemistry impact development and feeding behaviour of polylectic bees? PLoS One. 21;9(1):e86209.
границ | Биодоступность питательных веществ и противовоспалительные свойства ферментированной пчелиной пыльцы: комплексное исследование
Введение
Пчелиный хлеб (BB) и пчелиная пыльца (BCP) признаны ценными пищевыми добавками для питания человека благодаря значительному содержанию белков, незаменимых аминокислот, ненасыщенных жирных кислот, минералов, витаминов, фенольных соединений, каротиноидных пигментов и т. Д. и фитостерины (Khalifa et al., 2020; Thakur and Nanda, 2020).Это множество питательных веществ и функциональных соединений опосредует различные биологические эффекты, такие как антирадикальные, противораковые, противовоспалительные, гепатопротекторные, антиатеросклеротические и иммуномодулирующие (Khalifa et al., 2020; Thakur and Nanda, 2020). Недавно внимание исследователей привлекла способность пчелиной пыльцы восстанавливать нарушенную барьерную функцию кишечника (Chen et al., 2019; Li et al., 2019). В связи с ростом осведомленности о хронических воспалительных заболеваниях желудочно-кишечного тракта как об одном из основных хронических заболеваний во всем мире, поиск новых эффективных подходов к питанию без побочных эффектов стал привлекательной темой (Di Cagno et al., 2019б).
Пчелиный хлеб получается из смеси пыльцы растений, нектара, меда и выделений желез пчел, которые упаковываются пчелами в клетки улья и подвергаются процессу созревания, опосредованному пчелиными микробными сообществами (Anderson et al., 2011). Хотя для сбора BB из сот было предложено несколько технологий, все эти методы имеют ограничения (например, потеря питательных веществ, трудоемкость и вредное воздействие на улей; Urcan et al., 2017).По этой причине маркетинг BB не используется большинством пчеловодов. И наоборот, BCP собирают перед любым процессом созревания с помощью ловушек, установленных на входе в ульи, что делает их удобной технологией для пчеловодов и безвредной для улья (Campos et al., 2010). BB и BCP отличаются по питательности и биохимии, хотя пчелиная пыльца является основным ингредиентом BB. Фактически, внешний слой пыльцы зерновых (интина и экзина) плохо усваивается моногастральными организмами, такими как люди, и может снизить биодоступность питательных веществ более чем на 50% (Kieliszek et al., 2018; Сулуага-Домингес и др., 2019; Kostić et al., 2020). Превращение BCP в BB приводит к нескольким биохимическим изменениям, включая модификацию комплекса интина-экзина, что, в свою очередь, приводит к увеличению питательной ценности и усвояемости (Kieliszek et al., 2018; Kostić et al., 2020). Эти изменения предполагают, что BCP необходимо переработать перед употреблением в пищу человеком, чтобы увеличить доступность питательных веществ для всасывания в кишечнике. Одним из наиболее привлекательных вариантов является моделирование естественного брожения, происходящего внутри улья, ведущего к ББ (Zuluaga et al., 2014). Недавно мы разработали протокол ферментации BCP, основанный на ферментации с выбранным консорциумом, состоящим из штаммов Apilactobacillus kunkeei и Hanseniaspora uvarum , что привело к стабильному, безопасному и стандартизированному ферментированному продукту с повышенной усвояемостью белка и концентрацией свободных фенольных соединений. (Di Cagno et al., 2019a). BCP представляет собой экстремальную среду для бактерий из-за низкого значения pH, осмотического стресса и высокого уровня фенольных соединений, где A.kunkeei стал хорошо адаптированным видом (Di Cagno et al., 2019a; Filannino et al., 2019).
Ведущая роль микробов в обеспечении биодоступности питательных веществ во время ферментации BCP является предметом обсуждения (Anderson et al., 2014; Carroll et al., 2017; Di Cagno et al., 2019a), и доступно несколько интервенционных исследований по потреблению ферментированных BCP. (Uțoiu et al., 2018; Bakour et al., 2019; Kostić et al., 2020). В условиях нашего исследования мы систематически сравнивали ферментированные и неферментированные BCP, чтобы выяснить, может ли ферментация влиять на биодоступность питательных веществ, а также на противовоспалительные и иммуномодулирующие свойства BCP.Использовали модели In vitro и ex vivo , наиболее близкие к системам in vivo . В желудочно-кишечной партии in vitro мы предоставили оригинальные доказательства доступности фенольных соединений после имитации переваривания ферментированных BCP. Хотя BCP представляет собой ценный резервуар фенольных соединений, которые привлекают внимание из-за их широкого спектра функций, способствующих укреплению здоровья (Li et al., 2018), их биодоступность представляет собой решающий момент для использования BCP в качестве пищевой добавки (Kieliszek et al., 2018; Сулуага-Домингес и др., 2019; Kostić et al., 2020). Способность ферментированных BCP изменять клеточный окислительно-восстановительный статус [производство активных форм кислорода (ROS)], модулировать секрецию провоспалительных медиаторов [интерлейкин-8 (IL-8), интерлейкин-6 (IL-6), хемотаксический белок-1 моноцитов (MCP-1), факторы некроза опухоли α (TNF-α) и простагландин E2 (PGE-2)], и для противодействия нарушению целостности эпителия исследовали с помощью модели кишечной абсорбции с использованием клеточной линии-2 аденокарциномы толстой кишки человека (Caco-2).После слияния клетки Caco-2 структурно и функционально дифференцируются в энтероцитоподобные клетки, представляющие собой подходящую модель для оценки физиологической реакции слизистой оболочки кишечника на окислительный стресс и воспалительный статус (Bedoya-Ramírez et al., 2017; Di Cagno et al., 2019b ). Растущее количество исследований подтверждает роль постбиотиков как стимуляторов общего состояния здоровья, включая дерматологический уровень (Knackstedt et al., 2020; Rinaldi et al., 2020). Таким образом, противовоспалительная активность ферментированных BCP была исследована с использованием кератиноцитов в качестве дополнительной модели (Lagha and Grenier, 2019; Sánchez-Marzo et al., 2019). Кератиноциты активно участвуют в кожных иммунных ответах за счет экспрессии цитокинов и хемотаксических факторов, которые могут передавать как положительные, так и отрицательные сигналы клеткам врожденного и адаптивного иммунитета (Albanesi et al., 2005).
Материалы и методы
Микроорганизмы и условия культивирования
A. kunkeei PF12, PL13 и PF15 и H. uvarum AN8Y27B, принадлежащие коллекции культур Департамента почвоведения, растениеводства и пищевых наук Университета Бари Альдо Моро (Бари, Италия), были использованы как смешанные. закваски для брожения BCP.Их способность управлять стандартизированной ферментацией BCP на лабораторных, пилотных и полномасштабных уровнях была предварительно проверена (Di Cagno et al., 2019a; Giuliani et al., 2020). Культуры поддерживали в виде исходных материалов в 15% (v v -1 ) глицерине при -80 ° C и регулярно размножали. Фруктофильные молочнокислые бактерии культивировали при 30 ° C в течение 24 ч в бульоне фруктозно-дрожжевой экстракт-полипептон (FYP) (10 г D-фруктозы, 10 г дрожжевого экстракта, 5 г полипептона, 2 г ацетата натрия, 0,5 г Tween 80, 0,2 г MgSO 4 · 7H 2 O, 0.01 г MnSO 4 · 4H 2 O, 0,01 г FeSO 4 · 7H 2 O и 0,01 г NaCl на литр дистиллированной воды). H. uvarum AN8Y27B культивировали при 30 ° C в течение 36 ч в бульоне дрожжевой экстракт-пептон-декстроза (YPD) (10 г дрожжевого экстракта, 20 г бактериологического пептона и 20 г декстрозы на литр дистиллированной воды).
Ферментация BCP
Пыльца плюща, собранная пчелами (BCP), была собрана в сентябре – октябре 2018 г. на органических полях в регионе Апулия (Италия).BCP ферментировали согласно стандартизированному протоколу, ранее описанному Di Cagno et al. (2019a), который включал смешанный инокулят штаммов A. kunkeei PF12, PL13 и PF15 и H. uvarum AN8Y27B. Вкратце, микроорганизмы культивировали до достижения поздней фазы экспоненциального роста, дважды промывали 50 мМ фосфатным буфером (pH 7,0) и использовали для инокуляции BCP с конечной плотностью прибл. 8 Log КОЕ г -1 . BCP добавляли стерильной водой для достижения конечного содержания воды 40% (вес -1 ), инокулировали смешанным стартером, помещали в запаянные пробирки и инкубировали при 30 ° C в течение 216 часов.BCP, ферментированный выбранной смешанной закваской (Started-BCP), был охарактеризован, как описано ниже. BCP, обработанные в тех же условиях, за исключением использования микробных заквасок (Unstarted-BCP), и свежие BCP без какой-либо обработки [сырая пыльца, собранная пчелами (Raw-BCP)] использовались в качестве контроля. Unstarted-BCP подвергся самопроизвольной ферментации, чтобы частично имитировать спонтанную ферментацию перги в клетках улья. Плотность мезофильных молочнокислых бактерий и дрожжевых клеток контролировали путем подсчета на чашках на агаре FYP, содержащем 0.1% циклогексимида (Sigma Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) инкубировали при 30 ° C в течение 48 ч, а на агаре YPD добавляли 0,1% хлорамфеникола и инкубировали при 25 ° C в течение 72 ч соответственно. Лиофилизированные образцы BCP использовали для последующих анализов.
In vitro Желудочно-кишечный периодический анализ биодоступности фенольных соединенийДля оценки биодоступности питательных веществ и биологически активных соединений в Raw-, Unstarted- и Started-BCP, мы выбрали фенольные соединения в качестве целевых соединений.Биодоступность фенольных соединений в образцах BCP была исследована с помощью процесса периодического желудочно-кишечного переваривания in vitro в соответствии с Eid et al. (2014) и Celep et al. (2015), с небольшими изменениями. БЦП (10 г) гомогенизировали в дистиллированной воде (50 мл) в течение 2 мин с помощью стоматолога. Затем 20 мг α-амилазы растворяли в 6,25 мл раствора CaCl 2 (1 мМ) и добавляли к смеси. Смесь инкубировали при 37 ° C в течение 30 минут в условиях перемешивания (100 об / мин) для имитации фазы перорального переваривания.Для моделирования желудочного пищеварения пепсин (2,7 г) растворяли в 25 мл 0,1 М HCl и добавляли к смеси. Затем значение pH доводили до 2,0, используя 6 M HCl, и смесь инкубировали при 37 ° C в течение 3 часов в условиях перемешивания. Для моделирования условий тонкого кишечника панкреатин (560 мг) и желчь (3,5 г) растворяли в 125 мл 0,1 М NaHCO 3 и добавляли к смеси. Значение pH медленно доводили до 7,0, используя 6 M NaOH, и сегмент целлюлозной диализной трубки (отсеченная молекулярная масса 12 кДа) помещали внутрь химического стакана.Смесь инкубировали при 37 ° C в течение 3 ч при перемешивании (100 об / мин). После инкубации раствор, который диффундировал в диализную трубку, принимали за фракцию, доступную для сыворотки. Последний центрифугировали при 16000 об / мин, фильтровали через нейлоновый шприц-фильтр с размером пор 0,45 мкм и определяли общее количество фенольных соединений по методу Фолина-Чокальте (Singleton and Rossi, 1965; Singleton et al., 1999). Данные были выражены в g эквивалентах галловой кислоты на литр расщепленного BCP. Расщепленные in vitro образцы BCP сушили вымораживанием и использовали для последующих анализов.
Культуры клеток Caco-2 человека
Клетки Caco-2 человека были получены из АТСС (АТСС® HTB-37 ™) и использовались между пассажами 15 и 35 для всех экспериментов. Клетки культивировали в среде DMEM с высоким содержанием глюкозы с добавлением 10% (vv -1 ) фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1% (vv -1 ) HEPES, NEAA и 1% (vv -1 ) пенициллина / стрептомицин, поддерживаемый при 37 ° C в инкубаторе с 5% CO 2 , и субкультивирование при 80–90% конфлюэнции каждые 3-4 дня.
Анализ жизнеспособности клеток Caco-2
Метаболическая активность клеток линии 2 аденокарциномы толстой кишки оценивалась с помощью анализа 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромида (МТТ). Клетки высевали в 96-луночном планшете в концентрации 2 × 10 4 . После достижения слияния клетки обрабатывали Raw-, Unstarted- и Started-BCP в различных концентрациях (10-500 мкг / мл -1 ) в течение 24 часов. По окончании обработки среду отбрасывали и заменяли 100 мкл 0.5 мг / мл раствора -1 МТТ. После 2 ч инкубации при 37 ° C раствор МТТ удаляли, кристаллы формазана растворяли в 100 мкл диметилсульфоксида, и оптическую плотность считывали на считывающем устройстве для многостенных планшетов (Bio-Rad, Hercules, CA, США) при 570 ° C. нм. Процент жизнеспособности рассчитывали относительно необработанных клеток Caco-2.
Высвобождение ЛДГ в клетках Caco-2
Цитотоксичность сырых, незапущенных и запущенных BCP определяли путем измерения высвобождения лактатдегидрогеназы (LDH) в культуральную среду Caco-2.Клетки Caco-2 высевали в 96-луночный планшет при плотности 1,5 × 10 4 клеток / лунку в 200 мкл среды. На пятый день культивирования клетки обрабатывали различными концентрациями пыльцы RW или ферментированной пыльцы. После 24 ч инкубации супернатанты собирали и центрифугировали при 200 × g в течение 5 минут при комнатной температуре и анализировали с использованием набора для анализа цитотоксичности Pierce LDH (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, США) в соответствии с инструкциями производителя для оценки LDH. концентрация в питательной среде.Процент цитотоксичности рассчитывали следующим образом:
% Цитотоксичности = обработанная BCP активность ЛПН — Спонтанная активность ЛПН / максимальная активность ЛПН — Спонтанная активность ЛПН × 100, где необработанные клетки называют контролем спонтанной активности ЛДГ, а клетки, обработанные 5% тритоном х-100, называют контролем максимальной активности ЛДГ.
Высвобождение провоспалительных медиаторов клетками Caco-2
Высвобождение интерлейкина-8, IL-6, MCP-1, TNF-α и PGE-2 клетками Caco-2 через 24 часа обработки Raw-, Unstarted- и Started-BCP (100 мкг мл -1 ) количественно определяли с использованием коммерческих наборов для ELISA.Клетки Caco-2, предварительно обработанные BCP в течение 6 часов, дополнительно стимулировали воспалительным стимулом, а затем инкубировали еще 18 часов. Воспалительным стимулом для IL-8, IL-6, MCP-1 и TNF-α был интерлейкин-1β (IL-1β) в концентрации 25 нг / мл -1 . Смесь цитокинов (LPS, 10 нг мл -1 ; TNF-α, 50 нг мл -1 ; и IL-1β, 25 нг мл -1 ) была воспалительным стимулом для PGE-2. Набор для ELISA (R&D Systems) использовали в соответствии с инструкциями производителя.Оптическую плотность считывали с помощью ридера для микропланшетов (Bio-Rad) при 450 нм.
Измерение активных форм кислорода в клетках Caco-2
Внутриклеточное содержание АФК оценивали с использованием 2 ‘, 7’-дихлородигидрофлуоресцеиндиацетат ацетилового эфира (DCFH-DA; Invitrogen). Клетки инкубировали со 100 мкг мл -1 Raw-, Unstarted- и Started-BCP в течение 24 часов, а набор образцов подвергали воздействию 50 мкМ H 2 O 2 в течение последних 6 часов до стимулировать производство АФК. В конце обработки клетки дважды промывали PBS и инкубировали с 80 мкМ DCFH-DA (Life Technologies), приготовленным в полной среде для культивирования клеток, в течение 30 минут при 37 ° C.Их собирали соскабливанием, и интенсивность флуоресценции (FI) DCFH-DA измеряли при λ exc / λ em 480/570 нм (Agilent Technologies). После удаления фона ( exc / em 480/650 нм) флуоресценцию DCF нормализовали по концентрации белка.
Трансэпителиальное электрическое сопротивление
Трансэпителиальное электрическое сопротивление (TEER) использовали как меру целостности клеточного монослоя и оценивали до и после всех обработок.Клетки Caco-2 высевали с плотностью 2 × 10 5 клеток на мл на вставки Transwell с поликарбонатной мембраной с размером пор 0,4 мкм (Corning, Inc.; Lowell, MA). Клетки культивировали в течение 21 дня для достижения дифференциации, а питательную среду обновляли каждые 2–3 дня. Полностью дифференцированные монослои показали значения TEER 500–700 Ом. Дифференцированные монослои Caco-2 обрабатывали Raw-, Unstarted- и Started-BCP в концентрации 100 мкг / мл -1 в течение 24 часов, а набор образцов подвергали воздействию смеси воспалительных цитокинов за последние 18 часов. h для имитации хронической дисфункции кишечного барьера, связанной с воспалением.Цитомикс состоял из IL-1β (25 нг мл -1 ), TNF-α (50 нг мл -1 ) и IFN-γ (50 нг мл -1 ). В конце эксперимента планшеты затем переносили в термопланшет, установленный на 37 ° C, и измеряли TEER, используя эпителиальный вольт-омметр с электродом в виде палочки для еды (Millicell ERS-2, EMD Millipore, Billerica, MA). Электрод погружали под углом 90 ° одним концом в базолатеральную камеру, а другой — в апикальную камеру. Соблюдали осторожность, чтобы избежать контакта электрода с монослоем.Вставку без ячеек использовали в качестве бланка, и ее среднее сопротивление вычитали из всех образцов. TEER выражали в Ом × см 2 .
Анализ проницаемости
Флуоресцеина изотиоцианат-декстран (FITC-декстран; MW 4 кДа; Sigma Aldrich) использовали в качестве параклеточного маркера для монослоев клеток Caco-2. В конце 24 часов измерения TEER клетки промывали PBS и 1 мг / мл -1 FITC-декстрана в PBS добавляли к апикальной стороне клеточного монослоя, а в базолатеральном компартменте — только PBS.Двести микролитров образцов были собраны из базолатерального отсека через 2 часа и перенесены в 96-луночные планшеты, и диффузный флуоресцентный индикатор был измерен флуорометрией ( λ exc / λ em 485/528 нм). Интенсивность флуоресценции FITC-декстрана измеряли на флуоресцентном спектрофотометре (Agilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния, США) при возбуждении / испускании 495/525 нм.
Культуры кератиноцитов человека
Нормальные кератиноциты человека NCTC 2544 (Национальный институт исследований рака, Италия) культивировали при 5% CO 2 , 37 ° C в среде RPMI, содержащей 2 мМ l-глутамина, 1% пенициллина (100 Ед мл -1 ) и стрептомицин (100 Ед. мл -1 ) с добавлением 10% FBS (базальная среда).Клетки инкубировали в поверхностных культуральных колбах размером 25 см 2 при 37 ° C с 5% CO. 2 до прибл. Достигнуто около 80% впадения. Затем клетки собирали с трипсином / ЭДТА и высевали с плотностью 5 × 10 4 клеток на лунку в 96-луночные планшеты для анализа МТТ и 1 × 10 6 клеток на лунку в 12-луночные планшеты для qRT-PCR. , соответственно.
Относительная экспрессия гена TNF-α в кератиноцитах человека
Через 24 часа после посева на 12-луночные планшеты 80% конфлюэнтных клеток NCTC2544 подвергали воздействию Raw-, Unstarted- и Started-BCP (100 мкг мл -1 ) в течение 16-24 часов.Набор образцов одновременно подвергался воздействию LPS 10 мкг / мл -1 . Среду RPMI с 2,5% FBS, 2 мМ l-глутамина и 1% пенициллина (100 ед. Мл -1 ) и стрептомицина (100 ед. Мл -1 ) использовали в качестве основной среды. Клетки в основной среде использовали в качестве отрицательного контроля, а клетки, инкубированные только с LPS, использовали в качестве положительного контроля. После обработки среды экстрагировали РНК для анализа qRT-PCR. Использовали метод Tri Reagent (Sigma Aldrich), описанный Chomczynski и Mackey (1995).Затем кДНК синтезировали из 2 мкг РНК-матрицы в реакционном объеме 20 мкл с использованием набора PrimeScript RT-PCR Kit (Takara, Japan). кДНК амплифицировали и детектировали с помощью системы ПЦР в реальном времени Stratagene Mx3000P (Agilent Technologies). Амплификацию кДНК из клеток NCTC2544 проводили с использованием следующих анализов экспрессии гена Taqman: Hs00174128_m1 ( TNF-α ) в качестве гена-мишени и Hs999999 m1 [глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа человека ( GAPDH ) в качестве генов домашнего хозяйства, соответственно] .ПЦР-амплификации проводили в общем объеме 20 мкл. Реакционная смесь содержала 10 мкл 2X Premix Ex Taq (Takara), 1 мкл теста на экспрессию генов 20x TaqMan, 0,4 мкл эталонного красителя RoX II (Takara), 4,6 мкл воды и 4 мкл ДНК. Условия ПЦР были следующими: 95 ° C в течение 30 секунд, затем 40 циклов при 95 ° C в течение 5 секунд, 60 ° C в течение 20 секунд. Реакции ПЦР выполняли с использованием аппарата для ПЦР MX3000p (Stratagene, La Jolla, CA). Порог цикла Δ (Vigetti et al., 2008) использовали для расчета относительной распространенности экспрессии каждого гена.
Статистический анализ
Анализы проводили в трех повторностях в трех биологических повторностях для каждого состояния. Данные были подвергнуты тесту ANOVA для множественных сравнений (односторонний ANOVA с последующей процедурой Тьюки при p <0,05) с использованием статистического программного обеспечения Statistica 7.0 (Statsoft).
Результаты
Обработка BCP
Started-BCP был засеян до конечной плотности ок. 8 Log CFU g −1 с выбранным смешанным стартером, состоящим из A.kunkeei PF12, PL13 и PF15 и H. uvarum AN8Y27B. Способность к деформации, а также параметры процесса были ранее исследованы Di Cagno et al. (2019a). Начальная плотность клеток молочнокислых бактерий и дрожжей в Unstarted-BCP составляла 5,41 ± 0,21 и 6,53 ± 0,27 Log КОЕ г -1, соответственно. Во время ферментации Started-BCP плотность клеток молочнокислых бактерий в BCP достигала прибл. 9 Log КОЕ г -1 через 96 ч, оставалось почти стабильным до 144 ч, затем снизилось ( p <0.05) до 7,15 ± 0,29 Log КОЕ г -1 на протяжении всего времени инкубации. С другой стороны, во время спонтанной ферментации Unstarted-BCP, молочные бактерии достигли плотности клеток ок. 9 Log КОЕ г -1 только через 120 ч и внезапно снизился ( p <0,05) до 4,0 ± 0,31 Log КОЕ г -1 . В течение первых 24 ч инкубации плотность дрожжевых клеток немного увеличивалась ( p > 0,05) как для запущенных, так и для незапущенных BCP, затем постепенно снижалась на протяжении всего времени инкубации до прибл.4 Log КОЕ г -1 .
In vitro Желудочно-кишечный периодический анализ биодоступности BCP и фенольных соединенийБиодоступность питательных веществ и функциональных соединений, рассчитанная как часть их общего количества, доступная для метаболизма человека, представляет собой критическую проблему для BCP, заслуживающую исследования. Обычно это влечет за собой внедрение in vitro , смоделированного желудочно-кишечного пищеварения. После переваривания поджелудочной железы и диализа общее количество фенольных соединений в доступной сыворотке фракции, полученной из Raw-BCP, составляло 1.67 ± 0,07 г / л -1 , тогда как доступные в сыворотке фенольные соединения от Started-BCP были значительно ( p <0,05) выше прибл. 22%. Доступность феноликов не изменилась ( p > 0,05) в Unstarted-BCP.
Анализы цитотоксичности на клетках Caco-2
Предварительно цитотоксичность образцов BCP была исследована с помощью тестов MTT и LDH (рис. 1). Небольшое дозозависимое снижение жизнеспособности клеток наблюдалось в клетках Caco-2 из-за воздействия BCP (рис. 1A).Обработка BCP до 100 мкг / мл -1 не показала цитотоксических эффектов. Обработка более высокими дозами (500 мкг / мл -1 ) с Raw-BCP значительно ( p <0,05), но немного нарушила пролиферацию клеток Caco-2, тогда как жизнеспособность клеток все еще приближалась к контрольному уровню после обработки 500 мкг мл — 1 незапущенных и запущенных BCP. Что касается высвобождения ЛДГ (рис. 1В), стабильность мембраны сильно снизилась после обработки 500 мкг мл -1 BCP, тогда как незначительное снижение было обнаружено до 100 мкг мл -1 .Как при лечении 10, так и при 500 мкг / мл -1 Started-BCP приводил к более низкому высвобождению ЛДГ по сравнению с Raw- и Unstarted-BCP. Чтобы избежать цитотоксичности со стороны BCP, для последующих анализов на клетках Caco-2 была выбрана концентрация 100 мкг / мл -1 как наивысшая доза без значительных цитотоксических эффектов.
Рисунок 1 . Анализы 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолийбромида (МТТ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) на клетках линии 2 аденокарциномы толстой кишки (Caco-2): (A) Жизнеспособность (%) клеток Caco-2, обработанных разными концентрациями (10-500 мкг / мл -1 ) необработанной пыльцы, собранной пчелами (Raw-BCP; черные столбцы), Unstarted-BCP (белый) и Started-BCP ( серый).Процент жизнеспособности определяли с помощью анализа МТТ и рассчитывали по отношению к необработанным клеткам Сасо-2; (B) Высвобождение ЛДГ (%) в культуральную среду клетками Caco-2, обработанными различными концентрациями (10–500 мкг мл -1 ) Raw-BCP (черные столбцы), Unstarted-BCP (белые), и Started-BCP (серый). Процент цитотоксичности рассчитывали следующим образом:% цитотоксичности = [(активность ЛДГ, обработанная BCP — спонтанная активность ЛДГ) / (максимальная активность ЛДГ — спонтанная активность ЛДГ)] × 100.Необработанные клетки Caco-2 называют спонтанной активностью ЛДГ, тогда как клетки, обработанные 20% тритоном х-100, называют максимальной активностью ЛДГ (пунктирная полоса). Данные представляют собой средние значения (± стандартное отклонение) трех биологических повторностей, проанализированных в трех повторностях. Столбцы с разными надстрочными буквами существенно различаются ( p <0,05).
Секреция провоспалительных медиаторов клетками Caco-2 при лечении BCP
Для оценки потенциального взаимодействия между обработками BCP и синтезу провоспалительных медиаторов клетками Caco-2 их секрецию в культуральной среде количественно оценивали с помощью ELISA.В обычных физиологических условиях обработка Raw- и Unstarted-BCP незначительно ( p <0,05) увеличивала высвобождение IL-8 по сравнению с необработанными клетками Caco-2 (отрицательный контроль; фиг. 2). Небольшое, но не значимое ( p > 0,05) увеличение было вызвано Started-BCP (рис. 2). Дальнейшее лечение провоспалительным ИЛ-1β стимулировало секрецию ИЛ-8 по сравнению с отрицательным контролем. Эффект провоспалительного стимула был значительным ( p <0.05), которому противодействовали обработки Raw- и Unstarted-BCP, и полностью подавлялся Started-BCP. Аналогичная тенденция наблюдалась и для IL-6 (рис. 2). Обработка BCP слегка индуцировала высвобождение IL-6 в обычных физиологических условиях, но сильно противодействовала стимулу IL-1β, с самым высоким ингибирующим эффектом на высвобождение IL-6, наблюдаемым при обработке Started-BCP (фиг. 2).
Рисунок 2 . Высвобождение интерлейкина-8 (IL-8), интерлейкина-6 (IL-6), хемотаксического белка моноцитов-1 (MCP-1) и факторов некроза опухоли-α (TNF-α) (мкг / мл -1 ) клетками Caco-2.Клетки обрабатывали в течение 24 часов 100 мкг мл -1 Raw-BCP (черные полосы), Unstarted-BCP (белые) и Started-BCP (серые). Набор образцов стимулировали интерлейкином-1β (IL-1β; 25 нг / мл -1 ) в течение последних 18 часов. Также сообщалось об уровнях цитокинов, высвобождаемых необработанными клетками (отрицательный контроль, зеленые столбцы) и клетками, обработанными только IL-1β (положительный контроль, пунктирные столбцы). Данные представляют собой средние значения (± стандартное отклонение) трех биологических повторностей, проанализированных в трех повторностях. Столбцы с разными надстрочными буквами существенно различаются ( p <0.05).
Обработка пыльцы, собранной пчелами, не оказала значительного воздействия ( p <0,05) на секрецию MCP-1, TNF-α и PGE2 клетками Caco-2 в обычных физиологических условиях, но сильно противодействовала провоспалительному стимулу, индуцированному ИЛ-1β или смесь цитокинов (Рисунки 2, 3). В целом, Started-BCP проявил наивысший ингибирующий эффект ( p <0,05), за ним следовали Raw- и Unstarted-BCP.
Рисунок 3 . Количества простагландина E2 (PGE2) (пг мг -1 протеинов) высвобождаются клетками Caco-2.Клетки обрабатывали в течение 24 ч 100 мкг мл -1 Raw-BCP, Unstarted-BCP и Started-BCP. Набор образцов стимулировали цитомиксом (LPS, 10 нг / мл -1 ; TNF-α, 50 нг / мл -1 ; и IL-1, 25 нг / мл -1 ) в течение последних 18 часов. . Также сообщалось об уровнях PGE2, высвобождаемых необработанными клетками (отрицательный контроль) и клетками, обработанными только цитомиксом (положительный контроль). Данные представляют собой средние значения (± стандартное отклонение) трех биологических повторностей, проанализированных в трех повторностях. Столбцы с разными надстрочными буквами существенно различаются ( p <0.05).
Внутриклеточные активные формы кислорода
Чтобы получить представление о защитных эффектах BCP против окислительного стресса, мы исследовали накопление ROS в клетках Caco-2 при обычном окислительно-восстановительном состоянии клеток, а также при окислительном стрессе, индуцированном H 2 O 2 . Внутриклеточные ROS были измерены с помощью зонда 2 ‘, 7-дихлорфлуоресциндиацетата (DCFH-DA) окисления (рис. 4). Обработка BCP не вызывала окислительного стресса в клетках Caco-2. Внутриклеточные ROS достоверно ( p <0.05) увеличивалось, когда клетки обрабатывали H 2 O 2 (164 ± 22 FI) по сравнению с отрицательным контролем (23 ± 4 FI). Предварительная обработка BCP значительно противодействовала увеличению ROS, несмотря на окислительный стресс, вызванный H 2 O 2 , с самым низким ( p <0,05) уровнем ROS (63 ± 16 FI), обнаруживаемым с помощью Started- BCP (рисунок 4).
Рисунок 4 . Уровни внутриклеточных активных форм кислорода (ROS) в клетках Caco-2, измеренные как интенсивность флуоресценции (FI) диацетата 20,70-дихлорфлуоресцина (DCFH-DA).Клетки Caco-2 обрабатывали в течение 24 ч 100 мкг мл -1 Raw-BCP, Unstarted-BCP и Started-BCP. Набор образцов подвергали воздействию 50 мкМ H 2 O 2 в течение последних 6 часов для индукции окислительного стресса. Также сообщалось об уровнях ROS в необработанных клетках (отрицательный контроль) и в клетках, обработанных только H 2 O 2 (положительный контроль). Данные представляют собой средние значения (± стандартное отклонение) трех биологических повторностей, проанализированных в трех повторностях. Столбцы с разными надстрочными буквами существенно различаются ( p <0.05).
Влияние лечения BCP на барьерную функцию кишечника
Функцию эпителиального барьера контролировали посредством измерения вызванных воспалением изменений TEER и проницаемости в монослоях клеток Caco-2. Без провоспалительного стимула BCP не оказывал значительного влияния ( p > 0,05) на TEER по сравнению с отрицательным контролем (необработанные клетки; фиг. 5). Воздействие на клетки Caco-2 смеси воспалительных цитокинов вызывало значительную ( p <0.05) снижение TEER (около 68%; Рисунок 5). Предварительная обработка клеток BCP оказывала защитный эффект. После инкубации с провоспалительным стимулом наименьшее ( p <0,05) снижение TEER было обнаружено при лечении Started-BCP (около 26%; рис. 5). Защитный эффект был менее эффективным, когда клетки Caco-2 обрабатывались Raw- и Unstarted-BCP, что приводило к снижению TEER примерно на 1%. 43 и 37% соответственно (рисунок 5).
Рисунок 5 . Трансэпителиальное электрическое сопротивление (TEER; Ом × см 2 ) клеток Caco-2.Клетки обрабатывали в течение 24 ч 100 мкг мл -1 Raw-BCP, Unstarted-BCP и Started-BCP. Набор образцов подвергался воздействию смеси воспалительных цитокинов (IL-1β, 25 нг мл -1 ; TNF-α, 50 нг мл -1 ; и IFN-γ, 50 нг мл -1 ) за последние 18 ч. Также сообщалось об уровнях TEER необработанных клеток (отрицательный контроль) и клеток, обработанных только цитомиксом (положительный контроль). Данные представляют собой средние значения (± стандартное отклонение) трех биологических повторностей, проанализированных в трех повторностях.
В соответствии с изменениями TEER, воздействие на клетки Caco-2 провоспалительного цитомикс значительно увеличивало проницаемость клеточных монослоев (примерно 537%; фиг. 6). Обработка BCP значительно снижала проницаемость, вызванную воспалением, при этом наименьшее увеличение наблюдалось при использовании Started-BCP (примерно 113%), за которым следовали обработки Raw- и Unstarted-BCP (примерно 334 и 265% соответственно; Рисунок 6 ).
Рисунок 6 . Интенсивность флуоресценции флуоресцеинизотиоцианат-декстрана (FITC-декстрана), проникающего через монослои Caco-2.Клетки Caco-2 обрабатывали в течение 24 ч 100 мкг мл -1 Raw-BCP, Unstarted-BCP и Started-BCP. Набор образцов подвергался воздействию смеси воспалительных цитокинов (IL-1β, 25 нг мл -1 ; TNF-α, 50 нг мл -1 ; и IFN-γ, 50 нг мл -1 ) за последние 18 ч. Также сообщалось об уровнях FITC-декстрана, проникшего через необработанные клетки (отрицательный контроль) и клетки, обработанные только цитомиксом (положительный контроль). Данные представляют собой средние значения (± стандартное отклонение) трех биологических повторностей, проанализированных в трех повторностях.Столбцы с разными надстрочными буквами существенно различаются ( p <0,05).
Противовоспалительная активность BCP в кератиноцитах человека
Предварительно цитотоксичность образцов BCP по отношению к кератиноцитам человека была исследована с помощью анализа MTT. Обработка BCP до 100 мкг / мл -1 не показала цитотоксических эффектов, поэтому для последующих анализов на клетках кератиноцитов была выбрана концентрация 100 мкг / мл -1 . Воспалительный ответ, индуцированный LPS, оценивали путем измерения относительной экспрессии гена TNF- α (фигура 7).Результаты показали, что уровни мРНК TNF-α были увеличены LPS-индуцированным воспалением. Обработка клеток Started-BCP и, в меньшей степени, Unstarted-BCP снижала ( p <0,05) уровни транскрипции провоспалительного цитокина TNF-α (фигура 7).
Рисунок 7 . Относительная экспрессия (2 — Δ ΔCt ) гена TNF-α в клетках Caco-2. Клетки обрабатывали в течение 16 (A) и 24 ч (B) Raw-BCP, Unstarted-BCP и Started-BCP (100 мкг мл -1 ).Набор образцов одновременно подвергался воздействию LPS 10 мкг / мл -1 . Также сообщалось об относительной экспрессии гена TNF-α в необработанных клетках (отрицательный контроль) и клетках, обработанных только LPS (положительный контроль). Данные представляют собой средние значения (± стандартное отклонение) трех биологических повторностей, проанализированных в трех повторностях. Столбцы с разными надстрочными буквами существенно различаются ( p <0,05).
Обсуждение
Предыдущие исследования показали, что BCP обладает множеством ценных питательных свойств и терапевтических эффектов (Khalifa et al., 2020; Такур и Нанда, 2020), в том числе улучшающие барьерную функцию кишечника и иммунную систему желудочно-кишечного тракта, лечение воспалительного статуса и предотвращение повреждений, вызванных окислительным стрессом (Chen et al., 2019; Li et al., 2019 ; Zhang et al., 2020). Благоприятные эффекты биологически активных соединений из BCP зависят от их биодоступности, которая определяется как количество, высвобождаемое во время переваривания из пищевой матрицы и доступное для абсорбции в тонком кишечнике.В то время как множество исследований описывало изобилие биоактивных соединений в BCP, внешний слой пыльцы зерна не легко усваивается людьми, что приводит к снижению биодоступности питательных веществ (Kieliszek et al., 2018; Zuluaga-Domínguez et al., 2019 ; Kostić et al., 2020). Кроме того, некоторые биоактивные соединения, такие как фенолы, связаны с полисахаридами растений, что может препятствовать их высвобождению и растворению в химусе. Для оценки биодоступности питательных веществ и биологически активных соединений в качестве целевых соединений были выбраны фенольные соединения.Самая высокая доступность фенольных соединений в сыворотке в Started-BCP предполагает положительный эффект ферментации на биодоступность питательных веществ по сравнению с Raw-BCP, вероятно, из-за разрушения стенок пыльцы (Di Cagno et al., 2019a). Кроме того, разложение белков и углеводов, связанных с фенольными соединениями, бактериями и дрожжами, вероятно, способствовало высвобождению неэкстрагируемых фенольных соединений (Tlais et al., 2021). В любом случае повышенная биодоступность была обнаружена только в контролируемых условиях ферментации с выбранными заквасками, тогда как Unstarted-BCP не отличался от Raw-BCP.Эти результаты позволяют предположить, что микробный состав и условия ферментации представляют собой ключевые факторы во время обработки BCP для увеличения доли доступных питательных веществ для всасывания в кишечнике (Di Cagno et al., 2019a). Когда было показано, что ферментация влияет на биодоступность питательных веществ и биоактивных соединений, мы дополнительно исследовали, может ли ферментированный BCP проявлять улучшенные противовоспалительные и иммуномодулирующие свойства по сравнению с Raw-BCP. Подавление острой фазы воспалительной реакции представляет собой одну из основных целей лечения хронических воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта, таких как синдром раздраженного кишечника (СРК; Sinagra et al., 2016; Di Cagno et al., 2019b). Многие исследования подчеркнули ключевую роль провоспалительных медиаторов, таких как IL-8, IL-6, MCP-1, TNF-α и PGE2, в патогенезе воспалительных заболеваний (Wang et al., 2015). В условиях нашего исследования лечение Started-BCP остановило резкое повышение уровней IL-8, IL-6, MCP-1, TNF-α и PGE2, вызванное провоспалительным стимулом в клетках Caco-2. Такой же защитный эффект был незначительным после лечения Raw- или Unstarted-BCP. Помимо иммунологических исследований, клетки Caco-2 представляют собой одну из наиболее широко используемых моделей для имитации слизистой оболочки кишечника, поскольку они способны спонтанно дифференцироваться и образовывать плотные соединения, напоминая нормальный кишечный эпителий.Повышенная проницаемость кишечного эпителия и нарушение его барьерной функции участвуют в патогенезе хронических воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта (Michielan, D’Incà, 2015; Landy et al., 2016). Путем добавления воспалительных стимулов мы экспериментально индуцировали нарушение регуляции плотного соединения и нарушение кишечного барьера в монослоях клеток Caco-2. Как следует из более высокого значения TEER и более низкого уровня проницаемости, Started-BCP противодействовал пагубному влиянию на целостность монослоя клеток Caco-2 и его барьерную функцию более эффективно, чем это было обнаружено с Raw- и Unstarted-BCP.АФК были признаны медиаторами воспалительных процессов, возникающих при большинстве хронических воспалительных заболеваний, включая СРК (Alzoghaibi, 2013; Pereira et al., 2017). Независимо от того, происходит ли в обычных физиологических условиях баланс между производством АФК и антиоксидантными ферментативными и неферментативными механизмами защиты, окислительный стресс возникает в организме человека, когда антиоксидантная защита подавляется накоплением АФК, что приводит к повреждению клеточных структур. и биомакромолекулы.Эндогенные системы антиоксидантной защиты человека дополняются восстанавливающими соединениями пищевого происхождения, такими как витамины и фенолы (Bouayed and Bohn, 2010; Halliwell et al., 2020). Мы исследовали защитный эффект образцов BCP против окислительного стресса, используя клеточные линии Caco-2 в качестве модели. Started-BCP успешно противодействовал индуцированному H 2 O 2 внутриклеточному накоплению ROS, тогда как при Unstarted-BCP наблюдался лишь незначительный эффект. Для обогащения нашего организма экзогенными биологически активными соединениями, помимо диеты, можно использовать несколько подходов, включая дерматологические применения (Cohen et al., 1991; Теббе и др., 1997). Кератиноциты являются активными участниками восстановления эпидермиса и иммунной защиты кожи за счет секреции факторов роста и цитокинов и представляют собой подходящий инструмент в механистических исследованиях воспаления и разработки лекарств (Pastore et al., 2011; Magcwebeba et al., 2016) . Мы показали, что Started-BCP может играть защитную роль против LPS-индуцированного воспаления в кератиноцитах человека линии HaCaT, противодействуя накоплению TNF-α. TNF-α представляет собой провоспалительный цитокин, который активирует эндогенный воспалительный каскад, и он ответственен за хроническое воспаление, такое как пародонтит и псориаз (Chiricozzi et al., 2011; Лага и Гренье, 2019).
Стоит отметить, что фитохимические вещества могут оказывать вредное или благоприятное воздействие на клетки человека в зависимости от их дозозависимого поведения (Bouayed and Bohn, 2010). Обработка BCP в концентрации 100 мкг / мл -1 не подорвала жизнеспособность клеток Caco-2 и кератиноцитов. В обычных физиологических условиях и без какого-либо воспалительного стимула лечение BCP не нарушало профиль воспалительных биомаркеров и уровень внутриклеточных АФК в клетках человека или целостность монослоя клеток Caco-2, что свидетельствует об отсутствии побочных эффектов BCP. .
Основные результаты нашего исследования касаются улучшенных противовоспалительных и иммуномодулирующих свойств Started-BCP по сравнению с Raw- и Unstarted-BCP. Полезные функциональные свойства Started-BCP, вероятно, связаны с большей биодоступностью присущих ему биоактивных соединений, таких как фенолы. BCP представляет собой ценный резервуар фенольных соединений, особенно флавоноидов, фенольных кислот и феноламинов, которые, как было показано, удаляют свободные радикалы и АФК и защищают от повреждений, вызванных окислительным стрессом (Zhang et al., 2020). Независимо от их антиоксидантной активности фенольные соединения также способны вмешиваться в воспалительные пути трансдукции, взаимодействуя с внутриклеточными сигнальными каскадами или связываясь с сайтами связывания АТФ нескольких белков (Bouayed and Bohn, 2010). Также было показано, что диетические фенолы модулируют экспрессию белков плотных контактов в монослоях кишечных клеток человека (Bianchi et al., 2019). Хотя широко известно, что BCP содержит множество основных питательных веществ и фитохимических веществ, в нескольких исследованиях подчеркивалось, что Raw-BCP нелегко усваивается, что приводит к низкой биодоступности его ценных компонентов (Kieliszek et al., 2018; Сулуага-Домингес и др., 2019; Kostić et al., 2020). Помимо повышенной биодоступности питательных веществ, улучшенные полезные функции Started-BCP также могут быть связаны с микробными метаболитами, высвобождаемыми во время ферментации BCP (Filannino et al., 2018). Например, микробные катаболиты, возникающие в результате метаболизма фенольных соединений, могут обладать большей биологической и антиоксидантной активностью по сравнению с их предшественниками (Filannino et al., 2018). Другие производные микробов, такие как алкилкатехины (например,g., 4-винилкатехол и 4-этилкатехол), способны препятствовать индукции сигнальных путей NF-kB и MAPKs в клетках млекопитающих (Filannino et al., 2018). Нельзя исключить высвобождение противовоспалительных пептидов (Saisavoey et al., 2020) из-за интенсивного гидролиза белка во время ферментации BCP (Di Cagno et al., 2019a). Спонтанная ферментация, происходящая в Unstarted-BCP, вызвала незначительные изменения биоактивности BCP по сравнению с Started-BCP. Очевидная неэффективность спонтанной ферментации может быть приписана неконтролируемому росту дрожжей, плесени и других бактериальных групп, а также более медленным и менее интенсивным биохимическим изменениям, происходящим в Started-BCP (Di Cagno et al., 2019а).
Ферментация BCP с использованием выбранных микробных заквасок обеспечивает биотехнологическое решение проблем, связанных с низкой усвояемостью BCP человеком. Ферментация также позволяет сочетать уникальный профиль питательных веществ и биоактивных соединений BCP и дополнительный эффект микробной ферментации, улучшая его питательные и функциональные характеристики. Протокол ферментации, который мы изучили, приводит к тому, что BCP, содержащие макро- и микронутриенты, легче усваиваются, что оказывает благотворное влияние на воспалительную дисфункцию благодаря своему влиянию на окислительный стресс, медиаторы воспаления и пути, а также целостность кишечного барьера у людей.Мы также подчеркнули, что влияние ферментации на BCP сильно зависит от использования выбранных микробных заквасок.
Заявление о доступности данных
Оригинальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью / дополнительные материалы, дальнейшие запросы можно направлять соответствующим авторам.
Авторские взносы
Эксперименты проводилиПФ, ОВ, ДП, ФМ, АПр. PF и RC разработали исследование и руководили проектом.PF, RC, OV и APl разработали результаты и написали черновик рукописи. М.Г. был научным руководителем и критически отредактировал рукопись. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.
Финансирование
Эта работа была поддержана Издательским фондом открытого доступа Свободного университета Бозен-Больцано.
Конфликт интересов
DP работал в компании Giuliani S.p.A (Милан, Италия).
Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Список литературы
Альбанези, К., Скарпони, К., Джустизьери, М. Л., и Джироломони, Г. (2005). Кератиноциты при воспалительных заболеваниях кожи. Curr. Лекарство нацелено на воспаление. Аллергия 4, 329–334. DOI: 10.2174 / 1568010054022033
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Андерсон, К. Э., Кэрролл, М. Дж., Шихан, Т. И., Мотт, Б. М., Мэйс, П., и Корби-Харрис, В. (2014). Пыльца медоносных пчел, хранящаяся в ульях: многие доказательства подтверждают сохранение пыльцы, а не преобразование питательных веществ. Мол. Ecol. 23, 5904–5917. DOI: 10.1111 / mec.12966
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Андерсон, К. Э., Шихан, Т. Х., Экхольм, Б. Дж., Мотт, Б. М., и Дегранди-Хоффман, Г. (2011). Новая парадигма здоровья колонии: микробный баланс медоносной пчелы и улья ( Apis mellifera ). Насекомое. Soc. 58, 431–444. DOI: 10.1007 / s00040-011-0194-6
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Бакура, М., Фернандес, Э., Баррос, Л., Сокович, М., Люсси, Б., и Феррейра, И. К. (2019). Пчелиный хлеб как функциональный продукт: химический состав и биологически активные свойства. LWT Food Sci. Technol. 109, 276–282. DOI: 10.1016 / j.lwt.2019.02.008
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Бедоя-Рамирес, Д., Силла, А., Контрерас-Кальдерон, Дж., И Алегрия-Торан, А. (2017). Оценка антиоксидантной способности, фурановых соединений и цитопротекторных / цитотоксических эффектов на клетки Caco-2 коммерческого колумбийского кофе. Food Chem. 219, 364–372. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2016.09.159
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Бьянки, М. Г., Чиу, М., Таурино, Г., Бригенти, Ф., Дель Рио, Д., Мена, П. и др. (2019). Катехин и процианидин В2 модулируют экспрессию белков плотных контактов, но не защищают от вызванных воспалением изменений проницаемости монослоев клеток кишечника человека. Питательные вещества 11: 2271. DOI: 10.3390 / nu11102271
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Буайед, Дж., и Бон, Т. (2010). Экзогенные антиоксиданты — палки о двух концах в клеточном окислительно-восстановительном состоянии: благотворное влияние на здоровье при физиологических дозах по сравнению с пагубным воздействием при высоких дозах. Oxidative Med. Клетка. Longev. 3, 228–237. DOI: 10.4161 / oxim.3.4.12858
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Кампос, М., Фриджерио, К., Лопес, Дж., И Богданов, С. (2010). Какое будущее у пчелиной пыльцы? J. ApiProd. ApiMed. Sci. 2, 131–144. DOI: 10.3896 / IBRA.4.02.4.01
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Кэрролл, М. Дж., Браун, Н., Гудолл, К., Даунс, А. М., Шинан, Т. Х., и Андерсон, К. Э. (2017). Медоносные пчелы предпочитают употреблять свежую пыльцу. PLoS One 12: e0175933. DOI: 10.1371 / journal.pone.0175933
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Селеп, Э., Чарехсаз, М., Акьюз, С., Акар, Э. Т., и Ешилада, Э. (2015). Влияние желудочно-кишечного пищеварения in vitro на биодоступность фенольных компонентов и антиоксидантный потенциал некоторых турецких фруктовых вин. Food Res. Int. 78, 209–215. DOI: 10.1016 / j.foodres.2015.10.009
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Chen, S., Zhao, H., Cheng, N., and Cao, W. (2019). Пыльца рапса облегчает колит, вызванный декстрансульфатом натрия (DSS), нейтрализуя IL-1β и регулируя микробиоту кишечника у мышей. Food Res. Int. 122, 241–251. DOI: 10.1016 / j.foodres.2019.04.022
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Кирикоцци, А., Guttman-Yassky, E., Suárez-Farinas, M., Nograles, K. E., Tian, S., Cardinale, I., et al. (2011). Интегративные ответы на IL-17 и TNF-α в кератиноцитах человека составляют ключевые воспалительные патогенные цепи при псориазе. J. Invest. Дерматол. 131, 677–687. DOI: 10.1038 / jid.2010.340
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Chomczynski, P., and Mackey, K. (1995). Краткие технические отчеты. Модификация процедуры реагента TRI для выделения РНК из источников, богатых полисахаридами и протеогликанами. Biotechniques 19, 942–945.
PubMed Аннотация | Google Scholar
Коэн, К., Досу, Г., Ружье, А., и Роге, Р. (1991). Измерение медиаторов воспаления, продуцируемых кератиноцитами человека in vitro: прогнозирующая оценка кожного раздражения. Toxicol. in Vitro 5, 407–410. DOI: 10.1016 / 0887-2333 (91) -I
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ди Каньо, Р., Филаннино, П., Кантаторе, В., и Гоббетти, М.(2019a). Новое твердофазное брожение пчелиной пыльцы, имитирующее естественный процесс брожения пчелиного хлеба. Food Microbiol. 82, 218–230. DOI: 10.1016 / j.fm.2019.02.007
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ди Каньо, Р., Филаннино, П., Винсентини, О., Кантаторе, В., Кавоски, И., и Гоббетти, М. (2019b). Ферментированный сок Portulaca oleracea L.: новый функциональный напиток с потенциально улучшающим действием на воспаление кишечника и повреждение эпителия. Питательные вещества 11: 248. DOI: 10.3390 / nu11020248
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ид, Н., Энани, С., Уолтон, Г., Корона, Г., Костабиле, А., Гибсон, Г. и др. (2014). Влияние плодов финиковой пальмы и входящих в их состав полифенолов на микробную экологию кишечника, бактериальные метаболиты и пролиферацию клеток рака толстой кишки. J. Nutr. Sci. 3: e46. DOI: 10.1017 / jns.2014.16
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Филаннино, П., Ди Канно, Р., Гоббетти, М. (2018). Метаболические и функциональные пути молочнокислых бактерий в растительной пище: выбирайтесь из лабиринта. Curr. Opin. Biotechnol. 49, 64–72. DOI: 10.1016 / j.copbio.2017.07.016
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Филаннино, П., Ди Канно, Р., Тлайс, А.З.А., Кантаторе, В., и Гоббетти, М. (2019). Богатые фруктозой ниши проследили эволюцию молочнокислых бактерий в сторону фруктофильных видов. Crit. Ред.Microbiol. 45, 65–81. DOI: 10.1080 / 1040841X.2018.1543649
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Джулиани Г., Гоббетти М., Ди Каньо Р., Филаннино П., Кантаторе В., Масколо А. и др. (2020). Микробиологический процесс производства перги. Рейсвейк, Нидерланды, Европейское патентное ведомство. Международный патент № WO2020016770 (A1). Доступно по адресу: https://patentscope.wipo.int/search/en/detail.jsf?docId=WO2020016770 (по состоянию на 18 декабря 2020 г.).
Google Scholar
Халифа, С.А.М., Элашал, М., Келишек, М., Газала, Н.Э., Фараг, М.А., Саид, А., и др. (2020). Последние сведения о химических и фармакологических исследованиях перги. Trends Food Sci. Technol. 97, 300–316. DOI: 10.1016 / j.tifs.2019.08.021
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Келишек, М., Пивоварек, К., Кот, А. М., Блавеяк, С., Хлебовска-Смигель, А., и Вольска, И. (2018). Пыльца и перга как новые полезные для здоровья продукты: обзор. Trends Food Sci. Technol. 71, 170–180. DOI: 10.1016 / j.tifs.2017.10.021
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Knackstedt, R., Knackstedt, T., and Gatherwright, J. (2020). Роль местных пробиотиков при кожных заболеваниях: систематический обзор исследований на животных и людях и их значение для будущих методов лечения. Exp. Дерматол. 29, 15–21. DOI: 10.1111 / exd.14032
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Костич, А.Э., Милинчич, Д. Д., Барак, М. Б., Али Шариати, М., Тешич,. Л., и Пешич, М. Б. (2020). Применение пыльцы в качестве функционального пищевого и кормового ингредиента — настоящее и перспективы. Biomol. Ther. 10:84. DOI: 10.3390 / biom10010084
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Лага, А. Б., и Гренье, Д. (2019). Полифенолы чая защищают кератиноциты десен от индуцированной TNF-α дисфункции барьера плотного соединения и ослабляют воспалительную реакцию моноцитов / макрофагов. Цитокин 115, 64–75. DOI: 10.1016 / j.cyto.2018.12.009
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Лэнди, Дж., Ронд, Э., Инглиш, Н., Кларк, С. К., Харт, А. Л., Найт, С. С. и др. (2016). Плотные соединения при воспалительных заболеваниях кишечника и воспалительных заболеваниях кишечника, связанных с колоректальным раком. World J. Gastroenterol. 22, 3117–3126. DOI: 10.3748 / wjg.v22.i11.3117
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Li, Q., Liang, X., Guo, N., Hu, L., Wu, Y., Xue, X., et al. (2019). Защитное действие экстракта пчелиной пыльцы на дисфункцию кишечного барьера Caco-2, вызванную декстрансульфатом натрия. Биомед. Фармакотер. 117, 109–200. DOI: 10.1016 / j.biopha.2019.109200
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ли, К. К., Ван, К., Маркучи, М. К., Савая, А. К. Х. Ф., Ху, Л., Сюэ, X. F. и др. (2018). Богатая питательными веществами пчелиная пыльца: кладезь активных природных метаболитов. J. Funct. Продукты питания 49, 472–484. DOI: 10.1016 / j.jff.2018.09.008
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Magcwebeba, T., Swart, P., Swanevelder, S., Joubert, E., and Gelderblom, W. (2016). Противовоспалительное действие Aspalathus linearis и Cyclopia spp. экстракты в модели UVB / кератиноцитов (HaCaT) с использованием накопления интерлейкина-1α в качестве биомаркера. Молекулы 21: 1323. DOI: 10.3390 / молекулы21101323
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Михиелан, А., и Д’Инка, Р. (2015). Кишечная проницаемость при воспалительном заболевании кишечника: патогенез, клиническая оценка и терапия повышенной проницаемости кишечника. Mediat. Воспаление. 2015: 628157. DOI: 10.1155 / 2015/628157
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Пасторе С., Лулли Д., Потапович А. И., Фиданза П., Костюк В. А., Делламбра Э. и др. (2011). Дифференциальная модуляция реакций стресс-воспаление растительными полифенолами в культивируемых нормальных кератиноцитах человека и иммортализованных клетках HaCaT. J. Dermatol. Sci. 63, 104–114. DOI: 10.1016 / j.jdermsci.2011.04.011
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Перейра, К. К., Дурайнш, К., Коэльо, Р., Грациу, Д., Силва, М., Пейшото, А., и др. (2017). Связь полиморфизма антиоксидантных генов с воспалительным заболеванием кишечника. PLoS One 12: e0169102. DOI: 10.1371 / journal.pone.0169102
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ринальди, Ф., Тринк, А., Пинто, Д. (2020). Эффективность постбиотиков в PRP-подобных косметических продуктах для лечения области celsi облысения: рандомизированное двойное слепое исследование в параллельных группах. Dermatol. Ther. 10, 483–493. DOI: 10.1007 / s13555-020-00369-9
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Сайсавой, Т., Сангтану, П., Чанчао, К., Реамтонг, О., и Карнчанатат, А. (2020). Идентификация новых противовоспалительных пептидов из гидролизата пчелиной пыльцы ( Apis mellifera ) в RAW264, стимулированном липополисахаридами.7 макрофагов. J. Apic. Res. 1–10. DOI: 10.1080 / 00218839.2020.1745434
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Санчес-Марсо, Н., Перес-Санчес, А., Руис-Торрес, В., Мартинес-Тебар, А., Кастильо, Х., Эрранс-Лопес, М. и др. (2019). Антиоксидантная и фотозащитная активность апигенина и его производной калиевой соли в кератиноцитах человека и абсорбция монослоями клеток Caco-2. Внутр. J. Mol. Sci. 20: 2148. DOI: 10.3390 / ijms20092148
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Sinagra, E., Помпеи, Г., Томаселло, Г., Каппелло, Ф., Морреале, Г. К., Амвросиадис, Г. и др. (2016). Воспаление при синдроме раздраженного кишечника: миф или новая цель лечения? World J. Gastroenterol. 22, 2242–2255. DOI: 10.3748 / wjg.v22.i7.2242
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Синглтон, В. Л., Ортофер, Р., Ламуэла-Равентос, Р. М. (1999). Анализ общих фенолов и других субстратов окисления и антиоксидантов с помощью реактива Фолина – Чокальто. Methods Enzymol. 29, 152–178. DOI: 10.1016 / S0076-6879 (99) 99017-1
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Синглтон, В. Л., Росси, Дж. А. (1965). Колориметрия общих фенолов с реагентами фосфорно-фосфорно-вольфрамовая кислота. г. J. Enol. Витич. 16, 144–153.
Google Scholar
Теббе Б., Ву С., Гейлен К. К., Эберле Дж., Коделья В. и Орфанос К. Э. (1997). L-аскорбиновая кислота ингибирует УФА-индуцированное перекисное окисление липидов и секрецию ИЛ-1альфа и ИЛ-6 в культивируемых кератиноцитах человека in vitro. J. Invest. Дерматол. 108, 302–306. DOI: 10.1111 / 1523-1747.ep12286468
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Тхакур М. и Нанда В. (2020). Состав и функции пчелиной пыльцы: обзор. Trends Food Sci. Technol. 98, 82–106. DOI: 10.1016 / j.tifs.2020.02.001
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Тлайс, А.З., Да Рос, А., Филанино, П., Винсентини, О., Гоббетти, М., и Ди Каньо, Р. (2021).Биотехнологическая переработка побочных продуктов яблока: модель резервуара для производства пищевой добавки, обогащенной биогенными фенольными соединениями. Food Chem. 335: 127616. DOI: 10.1016 / j.foodchem.2020.127616
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Уркан, А., Мэргитэц, Л. А., Дезмирэн, Д. С., Бобиш, О., Бонта, В., и Мурезан, К. И. (2017). Химический состав и биологическая активность перги-обзор. Бык. Univ. Agric. Sci. Вет. Med.Клуж-Напока J. Anim. Sci. Biotechnol. 74, 6–14. DOI: 10.15835 / buasvmcn-asb: 12646
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Uțoiu, E., Matei, F., Toma, A., Diguță, C.F., tefan, L.M., Mănoiu, S., et al. (2018). Пчела собирает пыльцу с повышенной пользой для здоровья, полученную путем ферментации с консорциумом чайного гриба. Питательные вещества 10: 1365. DOI: 10.3390 / nu10101365
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Вигетти, Д., Виола, М., Karousou, E., Rizzi, M., Moretto, P., Genasetti, A., et al. (2008). Гиалуронан-CD44-ERK1 / 2 регулирует подвижность гладкомышечных клеток аорты человека во время старения. J. Biol. Chem. 283, 4448–4458. DOI: 10.1074 / jbc.M7000
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ван В., Ся Т. и Ю X. (2015). Вогонин подавляет воспалительную реакцию и поддерживает функцию кишечного барьера посредством TLR4-MyD88-TAK1-опосредованного пути NF-B in vitro. Inflamm.Res. 64, 423–431. DOI: 10.1007 / s00011-015-0822-0
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Чжан Х., Лю Р. и Лу К. (2020). Разделение и характеристика феноламинов и флавоноидов из пыльцы рапсовых пчел, а также сравнение их антиоксидантной активности и защитного действия против окислительного стресса. Молекулы 25: 1264. DOI: 10.3390 / молекулы25061264
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Сулуага, К.М., Серрато, Дж. К. Б. и Кикасан, М. К. (2014). Альтернативы валоризации колумбийской пчелиной пыльцы для использования в качестве пищевого ресурса — структурированный обзор. Vitae 21, 237–247.
Google Scholar
Сулуага-Домингес, К., Кастро-Меркадо, Л., и Сесилия Кикасан, М. (2019). Влияние ферментативного гидролиза на структурные характеристики и биоактивный состав пчелиной пыльцы. J. Food Process. Консерв. 3: e13983. DOI: 10.1111 / jfpp.13983
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Состав и функции пчелиной пыльцы: обзор
https: // doi.org / 10.1016 / j.tifs.2020.02.001Права на получение и содержаниеОсновные моменты
- •
Обобщены физико-химические и функциональные свойства пчелиной пыльцы из различных источников.
- •
Пчелиная пыльца в среднем содержит 54,22% углеводов, 21,30% белков, 5,31% липидов и 2,91% золы.
- •
Функциональные свойства рассматриваются как ключевые элементы для повышения ценности пчелиной пыльцы.
- •
Предлагается исследование одноцветковой пчелиной пыльцы различного ботанического и географического происхождения.
- •
Также учитывается потребность в гармонизированных глобальных стандартах безопасности пчелиной пыльцы.
Реферат
Предпосылки
Сегодня пищевая промышленность возвращается к натуральным продуктам после упора на обработанные продукты из-за более высокого потребительского спроса на продукты, которые хорошо известны благодаря полезным питательным веществам. Пчелиная пыльца известна как натуральный суперпродукт благодаря своим незаменимым питательным и лечебным свойствам. Однако физико-химические и пищевые свойства пчелиной пыльцы неоднозначны, которые сильно различаются из-за разницы в ботаническом и географическом происхождении.
Объем и подход
Таким образом, настоящее исследование представляет собой обновленный обзор путем критического обзора литературы по химическим составляющим (сахарам, аминокислотам, жирным кислотам, минералам, витаминам и фенольным соединениям) пчелиной пыльцы с 2009 года из более чем 20 стран мира. Также впервые обсуждаются функциональные свойства различных видов пчелиной пыльцы растительного происхождения и их пищевое применение.
Основные результаты и выводы
Согласно систематическому обзору более 100 исследований, пчелиная пыльца содержит в среднем 54.22% (18,50–84,25%) углеводов, 21,30% (4,50–40,70%) белков, 5,31% (0,41–13,50%) липидов, 8,75% (0,15–31,26%) клетчатки, 2,91% (0,50–7,75%) золы, 13,41 г / 100 г (2,77–28,49 г / 100 г) глюкозы, 15,36 г / 100 г (4,9–33,48 г / 100 г) фруктозы, 4,25 г / 100 г (0,05–9,02 г / 100 г) сахарозы, 4951,61 мг / кг (3,06–13366,60 мг / кг) калия, 4157,86 мг / кг (234,40–9587,00 мг / кг) фосфора, 1751,22 мг / кг (1,09–5752,19 мг / кг) кальция, 1246,99 мг / кг (44,00–4680,53 мг / кг) кг) магния, 46,97 мг / кг (0,10–105,80 мг / кг) цинка, 197.41 мг / кг (2,60–1180,00 мг / кг) железа и 30,59 мг GAE / г (0,69–213,20 мг GAE / г) общего содержания фенолов. Благодаря своим функциональным свойствам пчелиная пыльца может быть рекомендована в качестве натурального пищевого ингредиента в некоторых пищевых продуктах. Кроме того, в настоящем документе большое внимание уделяется изучению пыльцы одноцветковых пчел из разных географических регионов и связанным с этим вопросам безопасности, чтобы установить глобальные стандарты качества и безопасности пыльцы в ближайшие годы.
Ключевые слова
Пчелиная пыльца
Незаменимые амино и ω-3 жирные кислоты
Витамины комплекса B
Полифенолы
Функциональные свойства
Пищевые применения
Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)
Просмотреть полный текст © ElseОООВсе права защищены.
Рекомендуемые статьи
Цитирующие статьи
Пчелиная пыльца — 5 унций.
7,50 долл. США
Что такое пчелиная пыльца?
Медоносная пчела собирает сотни, а иногда и миллионы пыльцевых зерен с одного цветка. Пчелы упаковывают пыльцу в гранулы с помощью специальных гребней и волосков на задних лапах, а из их желудков выделяется липкое вещество. Неся по две гранулы за раз, они возвращаются в улей со своей добычей, которую в конечном итоге скармливают своим детенышам.Иногда пчеловоды прикрепляют к дверному проему улья небольшой ящик с сеткой. Экран пропускает пчел, но осторожно и безвредно удаляет мелкие гранулы пыльцы с их ног. Пчеловоды собирают лишь небольшое количество ульев, чтобы пчелы не лишались основной части их корма. Собранные гранулы затем упаковываются и продаются под названием «пчелиная пыльца».
Каковы преимущества употребления пчелиной пыльцы?
Пчелиная пыльца рекламируется как отличное средство для всего: от укрепления вашей иммунной системы, повышения уровня энергии, замедления процесса старения, лечения проблем бесплодия и предотвращения простуды и гриппа.Говорят, что местная пчелиная пыльца оказывает такое же или большее влияние, как и местный мед, на снижение сезонной аллергии. К сожалению, все преимущества пчелиной пыльцы не подтверждены медицинскими исследованиями, поэтому вы должны решить для себя, хотите ли вы попробовать.
Как взять пчелиную пыльцу?
Всегда руководствуйтесь здравым смыслом, когда добавляете что-то новое в свой рацион. Взрослые могут попробовать добавлять пчелиную пыльцу по ¼ чайной ложки за раз, но не более двух чайных ложек в день. Детям следует начинать с нескольких гранул, не превышая ½ чайной ложки в день.
Если вы заинтересованы в приеме пчелиной пыльцы по состоянию здоровья или в надежде уменьшить последствия сезонной аллергии, вы должны действовать с осторожностью. Даже если у вас никогда раньше не было аллергической реакции на пыльцу или продукты пчеловодства, сначала следует принимать пыльцу очень медленно и в очень небольших количествах. Тем, у кого есть аллергия на мед или пчел, определенно не следует употреблять пчелиную пыльцу.
10 способов использования пчелиной пыльцы:
Примечание: Вы не хотите нагревать пчелиную пыльцу, потому что это разрушит все ее полезные питательные вещества.Для измельчения пчелиной пыльцы можно использовать ступку и пестик или обработать ее в кофемолке для кофе / специй.
- Используйте гранулы как добавку к йогурту или хлопьям
- Добавьте измельченную пчелиную пыльцу в остывающую домашнюю мюсли, пока она еще влажная и липкая.
- Смешайте измельченную пыльцу или гранулы в смузи
- Добавлять в батончики из сырого протеина, сырые десерты или конфеты
- Посыпать гранулами салат
- Добавьте измельченную пыльцу в заправку для салатов, например, в медовую горчицу
- Посыпать попкорн измельченной пыльцой
- Используйте гранулы в качестве украшения поверх темного шоколада
- Использовать измельченную пыльцу в качестве покрытия для засахаренного миндаля или фундука
- Поджарить цельнозерновой хлеб, намазать шоколадной пастой из лесных орехов и посыпать гранулами пчелиной пыльцы.
Местная пчелиная пыльца — единственное, что вылечило мою сезонную аллергию
Я не создан для активного отдыха на природе. Апрель — самый жестокий месяц, когда выращивают сирень на еще холодной земле и стреляют пыльцой прямо мне в лицо. С мая по октябрь не легче: у меня чешутся глаза с того момента, как первый цветок сакуры публикуется в Instagram, до тех пор, пока с севера не вернется последний из так называемых «гляделок». Я принял все известные Дуэйну Риду антигистаминные препараты, назальные спреи и глазные капли.Помогло только одно: местная пчелиная пыльца, съедаемая ежедневно ложкой.
Я не из тех, кто прирожденный ву-ву. Я пробовала несколько суперпродуктов, порошков и порошков, которые предназначены для очистки моей кожи и повышения жизненных сил, и я почти уверен, что мои волосы по-прежнему растут с той же ледяной скоростью, и я такой же «жизнеспособный», как и Я когда-либо был. Местная пчелиная пыльца — единственное, что я могу сказать от хиппи, потому что она, кажется, действительно улучшила качество моей жизни.
Эта пчелиная пыльца от Andrew’s Honey помогает контролировать мою аллергию в Нью-Йорке.
Фото Челси КрейгПчелиная пыльца — это обычно используемый термин для обозначения цветочной пыльцы, собираемой пчелами вне улья. Когда они возвращаются, они связывают порошкообразную пыльцу со своей слюной, чтобы создать форму уплотненных гранул. Пыльца скармливается молодым пчелам как источник белка, а мед является источником углеводов. Слюна разрушает клеточные стенки этой цветочной пыльцы, делая ее более легко усваиваемой. Наука!
Любая пчелиная пыльца, которую вы потребляете, будет восхитительна, но только местные продукты облегчили мои симптомы аллергии.Предположительно, это связано с тем, что употребление в пищу пчелиной пыльцы, состоящей из частично расщепленного аллергена, позволяет организму выработать иммунитет к указанной аллергии. [Согласно Эндрю Коте , основателю компании Andrew’s Honey, которую я покупаю на Зеленом рынке Юнион-сквер в Нью-Йорке. «Основная идея состоит в том, что, если кто-то потребляет пыльцу из той же области, где они живут и дышат, по-видимому, у них выработается толерантность к этой пыльце. Так что в следующий раз, когда они вдохнут его, он не будет таким чуждым для их тела. Если вы делаете прививку от гриппа, вы получаете небольшое количество вируса гриппа, вводимое в ваше тело в качестве противоядия от гриппа, поэтому принцип тот же.«Эти утверждения не подтверждаются FDA, но мы с владельцем местного хиппи-магазина считаем, что это правда. Из-за разнообразия видов растений по всей стране употребление в пищу пчелиной пыльцы из ульев Огайо мало что даст для аллергиков, скажем, в Колорадо.
Так что соберите немного местной пчелиной пыльцы на фермерском рынке, в магазине здоровой пищи или в Интернете. Вы узнаете, что это гранулы, похожие по внешнему виду на конфеты Nerds, и они могут быть разных цветов в зависимости от того, где вы живете.Моя пыльца из Нью-Йорка имеет почти цвет радуги, а моя пыльца из Коннектикута имеет оттенки желтого и красного. Коте не любит давать рекомендации по дозировке, но предлагает начинать с малого: «Практическое правило — взрослый человек должен принимать по чайной ложке без горки в день, а затем действовать дальше».
Даже если польза пчелиной пыльцы для здоровья не подтверждена, аромат делает ее плацебо, которое я с радостью буду регулярно есть. На вкус он более ореховый, более цветочный. Я рекомендую усилить впечатление от пчелиной пыльцы, добавив ее в смузи или добавив в мороженое.Один из моих любимых завтраков состоит из посыпания пчелиной пыльцы толстого ломтика тоста, намазанного рикоттой, усыпанного ягодами и сбрызнутого бальзамическим уксусом. Вы не можете сделать это с помощью спрея для носа.
Если у вас в анамнезе был анафилактический шок или у вас сильная аллергия на укусы пчел, лучше избегать пчелиной пыльцы. Если вы беременны, кормите грудью или принимаете антикоагулянты, проконсультируйтесь с врачом перед употреблением.
Пчелиная пыльца 8 унций — Walker Honey Farm
Пыльца растений в форме гранул точно так же, как пчелы доставляют ее от цветка в улей.Пчелиная пыльца богата витаминами, минералами, аминокислотами и многим другим. Он содержит все основные компоненты жизни и богат редкими и драгоценными соединениями, которые действуют глубоко и надолго. Никакая другая еда на земле не предлагает такой естественный спектр питания.
Контейнер нагаллона
Во всем мире пчелиная пыльца признана не только идеальным источником пищи, но и источником пищи с широким лечебным действием, в том числе:
- Восстановить утраченное сексуальное желание и энергию
- Облегчить менструальные спазмы
- Ускорение заживления ран
- Устранение депрессии и усталости
- Нормализовать проблемы с пищеварением
- Снять головную боль при мигрени
- Устранение различных проблем с простатой
- Повышение фертильности у женщин и мужчин
- Снижение холестерина
- Значительно повысить уровень энергии
- Контроль веса
Ежедневное употребление пчелиной пыльцы может помочь вам выработать устойчивость к аллергии на пыльцу, передаваемую по воздуху.
Основные ингредиенты:
Углеводы 48,5%
Белок 21,2%
Волокно 14,2%
Жирные кислоты 9,9%
Ясень 3,5%
Как принимать пчелиную пыльцу
Если вы взрослый, начните с 1 чайной ложки пчелиных гранул утром, желательно за 30 минут до завтрака, а затем запейте небольшим количеством воды, сока или молока. Вы также можете добавлять пчелиную пыльцу в пищу, такую как салат, хлопья, бутерброды с арахисовым маслом или смузи. Важно, чтобы вы не употребляли горячие напитки, такие как кокос или кофе, в качестве жидкости после дозировки пыльцы, потому что тепло влияет на ее эффективность.
Вы можете увеличивать потребление каждый день на несколько гранул, пока не достигнете дозировки в 2 чайные ложки пчелиных гранул в день. Для регулярного и нормального ежедневного употребления пчелиной пыльцы вы можете принимать до 1 столовой ложки этой чудесной пищи в день.
Дозировка пыльцы для детей очень минимальна. Вы можете начать с приема трех пчелиных гранул в день. Увеличивайте дозировку на две гранулы каждые несколько дней, пока не получите половину чайной ложки, что является наиболее идеальной дозировкой для детей. Если им не нравится вкус, вы можете смешать гранулы с сырым медом и съесть его или даже разбавить его напитком комнатной температуры.
Пчелиная пыльца: опасная пища для детей-аллергиков. Идентификация ответственных аллергенов
ВведениеПищевые добавки, такие как пчелиная пыльца, мед, маточное молочко и прополис, были предложены для облегчения различных заболеваний, таких как бронхит, дерматит и аллергия. Однако эти положительные эффекты не были продемонстрированы до сих пор, кроме того, наблюдались побочные эффекты, такие как аллергические реакции или даже анафилактические реакции.1–5 Мы обследовали мальчика, у которого развилась анафилактическая реакция при первом приеме пчелиной пыльцы.
История болезниУ четырехлетнего мальчика прошлой весной и осенью развился аллергический ринит. Два месяца спустя, когда он впервые проглотил небольшую ложку пчелиной пыльцы, у него сразу же появился сильный зуд во рту, языке и глотке с отеком язычка, затрудненным глотанием и изолированными крапивницами на грудной клетке. Одышки и других проявлений не было. Симптомы исчезли через шестьдесят минут после приема внутрь антигистаминными препаратами. Наш пациент никогда раньше не употреблял мед или пчелиную пыльцу, маточное молочко или прополис.Он страдал аллергией на рыбу в возрасте одного года, но в это время он переносил все остальные продукты (рис. 1).
Последовательный тест с пчелиной пыльцой (10 мг / мл) дал положительный результат. Кожные прик-тесты (SPT) проводились с экстрактами глицериновых аллергенов (Bial-Aristegui, Бильбао, Испания) обычной местной пыльцы (Lolium perenne, Cynodom dactylon, Olea europaea, Platanus acerifolia, Plantago lanceolata, Cupressus aficonica, Artemisina vulgaris). и все они были положительными.Кожные пробы с экстрактами клещей домашней пыли (Dermatophagoides pteronyssimus, Dermatophagoides farinae), грибов обыкновенного рода (Aspergillus, Alternaria, Cladosporium) и перхоти животных (собаки, кошки, кролики, лошади и хомяки) были отрицательными. Раствор глицерозалина и 1% дигидрохлорид гистамина применяли в качестве отрицательного и положительного контролей соответственно. Чистый диаметр волдыря на 3 мм больше, чем у отрицательного контроля, считался положительным.
Уровни триптазы в сыворотке были 3.5 мкг / мл (UNI CAP 100 Phadia Diagnostics AB, Упсала, Швеция). Общий сывороточный IgE составил 435kU / л, а специфический сывороточный IgE против пыльцы Lolium perenne — 4.9kU / L; Olea europaea 6.4kU / L; Platanus acerifolia 3,4kU / L; Cupressus arizonica 2,2кЕд / л; Taraxacum officinalis 14,8kU / L; и Artemisia vulgaris 15,5kU / L (Uni CAP, Pharmacia Diagnostics AB, Упсала, Швеция). Более того, сывороточный специфический IgE, определенный с помощью EAST (Enzyme AllergoSorbent Test), составлял 6kU / L против экстракта пчелиной пыльцы; 52,2kU / L для nArt v 1; 4.6kU / L для nOle e 1; От 2kU / L до nLol p 1; 0.7kU / L на Pla a 2; и
кЕд / л для Pla a 1 и персикового LTP (nPru p 3).Был проведен анализ пыльцы пчел, состав которой показан в таблице 1. Мы обнаружили, что пыльца семейства сложноцветных (Compositae) была выдающимся компонентом в образце: пыльца A. vulgaris, T. officinalis и Helianthus sp. составляют 13% выборки.
Иммуноблоттинг-ингибирование SDS-PAGE выполняли для оценки уровня перекрестной реактивности между экстрактом пчелиной пыльцы и экстрактами из различных сенсибилизирующих пыльц.Результаты показали, что пыльца A. vulgaris была экстрактом с самой сильной способностью ингибировать связывание IgE.
ОбсуждениеНатуральные продукты для здоровья, включая продукты, содержащие производные пчел, доступны населению в качестве пищевых добавок и рекламируются как равные или более эффективные и менее токсичные, чем обычные лекарства. Однако известно, что некоторые «натуральные» лекарства обладают побочными эффектами. Пчелиная пыльца рекомендована для лечения «любых заболеваний, от инфекционных до аллергических», но было обнаружено, что она вызывает анафилактические реакции.Пчелиная пыльца представляет собой сложную гетерогенную смесь пыльцы разных видов растений, и была продемонстрирована ее этиологическая роль в некоторых аллергических клинических проявлениях после приема внутрь пчелиной пыльцы и других продуктов пчеловодства.1–6 Мы описываем 4-летнего мальчика с немедленные аллергические симптомы после проглатывания пчелиной пыльцы. У нашего пациента впервые появились симптомы респираторной аллергии на пыльцу за два месяца до аллергической реакции, весной и осенью во время опыления.У него была аллергическая реакция после первого приема пчелиной пыльцы. Он никогда не употреблял мед, пчелиную пыльцу, маточное молочко или прополис.
Специфические измерения IgE показали значительные уровни сывороточного специфического IgE против различных типов пыльцы, например травы и оливы, но самые высокие уровни были обнаружены против пыльцы видов, принадлежащих к семейству сложноцветных (A. vulgaris и T. officinalis). Кроме того, специфический IgE против Art v 1 был намного выше, чем значения, обнаруженные для любого из других изученных маркерных аллергенов (Lol p 1, Ole e 1, Pla a 1 и Pla a 2) и A.vulgaris показала самую сильную способность ингибировать связывание IgE, когда экстракт пчелиной пыльцы использовали в твердой фазе в анализе ингибирования иммуноблоттинга.
Учитывая наличие перекрестной реактивности пыльцы внутри семейства сложноцветных, 7–9 все полученные результаты (клинические данные, состав образца пчелиной пыльцы и результаты in vivo и in vitro) указывают на пыльцу сложноцветных как наиболее вероятную. источник аллергена, ответственный за неблагоприятную реакцию после приема внутрь пчелиной пыльцы.Таким образом, в этом случае первичная сенсибилизация может быть связана с переносимой по воздуху пыльцой сложноцветных.
Некоторые исследования обнаружили противоаллергический эффект фенольного экстракта пчелиной пыльцы и мирицетина у мышей, сенсибилизированных овальбумином.10 Недавно Isikawa et al. обнаружили ингибирующий эффект пчелиной пыльцы на дегрануляцию тучных клеток, предотвращая связывание IgE в тучных клетках.11 Однако необходимы дополнительные исследования для изучения этих полезных эффектов.
Пчелиная пыльца, мед, маточное молочко или прополис не следует применять пациентам с аллергической предрасположенностью, особенно с аллергией на пыльцу, поскольку хорошо известно, что у лиц с атопией и астмой может возникнуть повышенный риск аллергических реакций после есть эти продукты.Общественность и медицинские работники должны знать о риске аллергических реакций, возникающих после употребления в пищу определенных продуктов, полученных из пчел. Предупреждающие этикетки, указывающие на возможные побочные реакции, должны быть найдены на упаковке этих продуктов для защиты населения от этой опасности.
Конфликт интересовАвторы не заявляют о конфликте интересов.
человек едят пчелиную пыльцу как лекарство от болезней
—Виктория Бекхэм (@victoriabeckham) 21 апреля 2014 г.
Оказывается, пчелиная пыльца стала популярной примерно в 2014 году, когда Виктория Бекхэм написала об этом в Твиттере.Она якобы регулярно принимает его, чтобы уменьшить признаки старения. Такие знаменитости, как Кортни Кардашьян, Гвинет Пэлтроу и Меган Маркл, также усилили популярность суперпродуктов в СМИ. Из-за недавнего повторного появления этой тенденции в моей ленте в Instagram я решил разобраться, о чем именно идет речь.
Что такое пчелиная пыльца?
Сообщение, опубликованное Qinyatogullari (@qinyatogullari)
Пчелиная пыльца — это, по сути, пчелиный корм.Пчелы собирают пыльцу с цветов, смешивают с медом и другими ингредиентами из улья и хранят в мешочках на задних лапах, чтобы переносить их от одного цветка к другому. Как только пчела собрала достаточно пыльцы, смесь, хранящаяся в ее лапках, конденсируется в маленькие гранулы. Пчеловоды используют устройства для удаления этой пыльцы, чтобы продавать их в качестве коммерческого продукта питания для людей.
В результате получаются маленькие хрустящие желтые наггетсы, которые можно добавлять в блюда для придания текстуры. Многие описывают его как «горько-сладкий».Его также можно приобрести в менее чистой форме капсул.
Почему люди его едят?
Сообщение, опубликованное Wylane (@wylane)
Как говорится в твите Виктории Бекхэм, «пчелиная пыльца содержит около 22 аминокислот, 18 витаминов, 25 минералов, 59 следов. элементов, 11 ферментов или коферментов, 14 жирных кислот, 11 углеводов и примерно 25% белка.Оно чрезвычайно богато каротинами и богато витаминами комплекса B и лецитином ».
Люди, которые доверяют этому веществу, заявляют о широком спектре преимуществ, включая снижение риска рака, повышение энергии, лечение холода, потерю веса и уменьшение признаков болезни. Некоторые также говорят, что пчелиная пыльца, если принимать ее в умеренных количествах, может помочь тем, у кого аллергия на пыльцу.
Я решил немного разобраться в этом. Как оказалось, эти утверждения в значительной степени не подтверждаются конкретными исследованиями, однако есть является доказательством, подтверждающим питательный состав пыльцы.Точный состав пыльцы зависит от того, где пчела собирает пыльцу, как от региона, так и от вида цветов, поэтому важно помнить, что не все марки коммерческой пчелиной пыльцы имеют одинаковую пищевую ценность.
Что это значит для пчел?
Сообщение, опубликованное Dedzuo Oijhi (@dedzuo)